Малат.нон

Отмытые и подсушенные с помош,ью кусочка фильтрова льной бумаги электроды полярографа осторожно опускают в кювету, заполненную 2 мл среды 1 (проба 1) до полного выхода пузырька воздуха. С помощью специального потенциометра устанавливают перо включенного самописца в исходное положение, соответствующее исходной концентрации кислорода в среде (в самописцах типа КСП-4 — в крайнее правое положение). Включают движение диаграммной ленты и, убедившись в отсутствии дрейфа, с помощью микропипетки добавляют в кювету 0,04—0,05 мл густой суспензии митохондрий (4—6 мг белка). В течение 40—60 с регистрируют медленное эндогенное дыхание и добавляют 0,02 мл сукцината (10 мМ), который вызывает небольшую стимуляцию дыхания. Через 40—60 с в кювету вносят раствор СаСЬ ( 100 мкМ). При этом дыхание сначала резко активируется, затем быстро снижается до исходного уровня. Добавку повторяют несколько раз до тех пор, пока стимуляция дыхания после каждого добавления сменяется четко выраженным торможением. Учитывая количество добавленного СаСЬ, оценивают его максимальную концентрацию, вызывающую обратимую стимуляцию дыхания. Для препарата интактных прочно сопряженных митохондрий (4—6 мг белка в кювете) эта концентрация обычно составляет 400—500 мкМ. В пробе 2 убеждаются в том, что выбранная концентрация СаСЬ вызывает обратимую стимуляцию дыхания с отчетливым выходом в контролируемое состояние. Для определения величины АДФ/О записывают следующую пробу. С этой целью в кювету со средой последовательно добавляют митохондрии, сукцинат и АДФ в концентрации от 300 до 400 мкМ (определение АДФ/О см. на с. 462). Проводят три аналогичных измерения с использованием в качестве субстрата окисления смесь глутамат—малат (по 5 мМ). В этом случае целесообразно уменьшить концентрацию добавляемого СаСЬ в 1,5—2 раза, а в среду инкубации предварительно добавить (непосредственно в кювету) 1 мМ НАД+ для предотвращения утечки эндогенных пиридиннуклеотидов. [c.452]

Равновесие реакции окисления малата окисленным динуклеотидом (реакция 1) сильно сдвинуто влево. Ее протекание становится возможным в присутствии искусственных акцепторов электронов ФМС и ДХФИФ, быстро и практически необратимо окисляющих НАДН в не-знзиматических реакциях (2) и (3). Восстановление ДХФИФ приводит к спектральным изменениям, что позволяет использовать спектрофотометрический подход для регистрации реакции. Измерение концентрации малата описанным методом следует проводить в присутствии ас-партат-аминотрансферазы (КФ 2.6.1.1), катализирующей непрерывное удаление оксалоацетата — сильного ингибитора маталдегидрогеназы. [c.461]

Аммоний малат см. Аммоний яблочнокислый Аммоний малеинат см. Аммоний малеиновокислый Аммоний малеиновокислый [c.39]

Натрий малат см. Натрий яблочнокислый [c.344]

Однако паратион очень ядовит для теплокровных поэтому уже в течение ряда лет проводятся поиски менее токсичных и столь же эффективных эфиров фосфорной кислоты. В качестве таких соединений можно указать малат ион и диазинон, которые в настоящее [c.522]

Малат 0,87 Ксиленоловый оранжевый (HL- -) 2,00 [c.369]

Малат калия — 0,5 М раствор, pH 8,0. [c.439]

Диаллил-DL-малат см. Диаллиловый эфир DL-яб-лочной кислоты [c.142]

Диаллиловый эфир DL-яблочной кислоты Диаллил-ОЬ-малат [c.143]

Калий малат см. Калий яблочнокислый [c.244]

Кальций малат см. Кальций яблочнокислый [c.255]

В кювету полярографа помещают 2 мл среды инкубации (п. 4), погружают электроды и устанавливают положение пера самописца в исходное положение. Добавляют примерно 50 мкл густой ( — 100 мг/мл) суспензии митохондрий. Через 1—2 мин в кювету добавляют глутамат и малат до конечной концентрации, равной 5 мМ. Регистрируют постоянную скорость дыхания и через 1—2 мин добавляют 100 мкМ 2,4-динитрофенол. Наблюдают увеличение скорости поглощения кислорода. [c.440]

Рубидий малат см. Рубидий яблочнокислый Рубидий малонат см. Рубидий малоновокислый Рубидий малоновокислый [c.430]

Смесь 0,5 М глутамата и 0,5 М малата калия, pH 7,4. [c.451]

Свинец (II) малат см. Свинец (II) яблочнокислый [c.437]

Кальций яблочнокислый, 1-водный Кальций малат Яблочной кислоты кальциевая соль [ООССН2СН (ОН) СОО] Са НгО [c.260]

Свинец (II) малат Яблочной кислоты свинцовая (II) [c.441]

Смесь глутамат калия (0,5 М) и малат калия (0,5 М). [c.464]

Ацетилкофермент А играет роль сырья в цикле лимонной кислоты, изображенном на рис. 21-23. В цикле лимонной кислоты ацетатная группа, содержащая два атома углерода, соединяется сначала с четырехуглеродным оксалоацетатом, в результате чего образуется шестиуглеродный цитрат-ион. Затем этот цитрат-ион распадается в семь стадий с высвобождением двух из его атомов углерода в виде Oj и снова восстанавливается в окса-лоацетат. Каждая из этих стадий цикла лимонной кислоты представляет собой окисление (изоцитрата в я-кетоглютарат, малата в оксалоацетат), либо перегруппировку, необходимую как подготовку к последующему окислению (цитрата в изоцитрат). На четырех окислительных стадиях высвобождающаяся энергия используется для восстановления молекулы-переносчика энергии НАД или ФАД. [c.330]

Этиловый эфир N-aцe-тил- -фенилаланина я-Нитрафениловый эфир N-карбобензокси- -тирозина -малат [c.269]

Аммоний малат Яблочной кислоты диаммонийная соль [c.45]

Рубидий малат Яблочной кислоты дирубидиевая соль [c.432]

В полярографическую кювету, содержащую 2 мл среды инкубации,, погружают электроды, вносят 50 мкл суспензии обработанных антимицином митохондрий, добавляют 5 мМ малат и 5 мМ глутамат и через 1—2 мин вносят 50 мкл густой (50—70 мг/мл) суспензии препарата Кейлина—Хартри. Внесение субмитохондриальных фрагментов практически не вызывает стимуляции поглощения кислорода. Реакцию инициируют добавлением 4 мкМ Qa (осуществляющего перенос элект ронов между митохондриями и субмитохондриальными фрагментами неспособными окислять малат). По ходу реакции добавляют 100 мкМ динитрофенол и регистрируют увеличение скорости поглощения кисло рода. В том случае, если стимуляция разобщителем не наблюдается рекомендуется вдвое понизить количество вносимого препарата Кей лина—Хартри и (или) уменьшить концентрацию вносимого Q i. Нов торяют измерение с другими гомологами убихинона Qi (3 мкМ) и Qe (3 мкМ). Убеждаются в полной чувствительности наблюдаемой убихинон-редуктазной активности (измеренной с различными гомологами убихинона) к ротенону. С этой целью в кювету по ходу реакции вносят 5 мкМ ротенон и наблюдают полное ингибирование реакции. [c.440]

Проба содержит смесь растворов 2,5 мл 0,006 М трис-НС1 (pH 7,2), 0,03 мл 5-10- М ротенона, 0,03 мл 0,01 М ЭДТА, 0,03 мл антимицина А (среда инкубации № 2) и 0,3 мл 0,6 М сукцината аммония. В течение 2 мин после добавления митохондрий регистрируют оптическую плотность, затем добавляют 2 мМ (NH4)2HP04 и регистрируют падение оптической плотности еще 3 мин. Аналогичным образом ставят пробу с 0,6 М раствором малата аммония. [c.448]

Проба содержит среду инкубации № 2 и 0,3 мл 0,6 М раствора цитрата аммония. Регистрируют оптическую плотность в течение 2 мин после добавления митохондрий, затем добавляют 2 мМ (NH4)2HP04 и еще через 2 мин — 2 мМ малата аммония. Регистрируют оптическую [c.448]

Среда для измерения концентрации малата, содержащая 20 мМ фосфат калия (pH 7,4), 0,2 мМ ЭДТА, 1 мМ НАД+, 10 мМ глутамат калия — 100 мл. [c.461]

Для определения концентрации образовавшегося малата в спектрофотометрическую кювету вносят 3 мл среды для измерения концентрации малата, добавляют 50 мкМ дихлорфенолиндофенол, 1 мМ феназинметосульфат, малатдегидрогеназу — 50 мкг/мл и аспартатамино-трансферазу — 50 мкг/мл. Определяют значение оптической плотности раствора при длине волны 600 нм, соответствующей максимуму поглощения окисленной формы ДХФИФ (емм ° =20). В кювету добавляют 50—100 мкл раствора малата и фиксируют уменьшение оптической плотности, связанное с восстановлением дихлорфенолиндофенола. Рекомендуется определить указанным методом концентрацию приготовленного по навеске раствора L-малата. Рассчитывают концентрацию образующегося в результате реакции окисления янтарной кислоты малата и определяют стехиометрическое соотношение окисленного сукцината к образованному малату в отсутствие и в присутствии разобщителя. [c.462]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология