Ацилаза свиной почки

Ацилаза из почек свиньи [c.59]

Свежий раствор ацилазы готовят следующим образом. Со свежей свиной почки (около 75 г) срезают жир, разрезают ее на мелкие куски, растирают в ступке с песком и суспендируют в 150 мл воды. Смесь центрифугируют на холоду до получения прозрачного раствора. Раствор осторожно декантируют в целлофановый мешочек (длиной 20, диаметром 2,5 ем), завязывают его, помещают в ванну с холодной проточной водой и оставляют на ночь. При диализе удаляются растворимые компоненты почек, мешающие выделению аминокислоты. Раствор фермента снова центрифугируют и сохраняют при 5°. Объем составляет примерно 75 мл. [c.213]

Разделение ,/-аланина (I) производится действием ацилазы на N-ацетилпроизводное (П) в слабощелочном растворе. Этот фермент, содержащийся в свиных почках, катализирует быстрый гидролиз N-ацилпроизводных природных /-аминокислот и практически не действует на соответствующие d-изомеры, не встречающиеся в природе. М-ацетил- ,/-аланин (II) может быть, таким образом, превращен в смесь /-( + )-аланина (П1) и Ы-ацетил-с -аланина (IV). [c.148]

Сходные методы были использованы для выяснения механизма действия амино-ацилазы из почек свиньи [3237], аспарагиназы [3238], а также ферментов других классов [3239]. [c.317]

В качестве примера такого ферментативного разделения рассмотрим расщепление ( )-лейцина при помощи фермента ацилазы, выделенного из почек свиньи. Этот фермент катализирует гидролиз амидных связей ъ-аминокислот, но не в-аминокислот. Сначала рацемическую аминокислоту ацетилируют уксусным ангидридом [c.392]

Для расщепления аминокислот используют ацилазу из почки свиньи. Сначала ацилируют рацемическую аминокислоту, затем ациламинокислоту гидролизуют в присутствии фермента и свободную кислоту отделяют от ацильного производного ее энантиомера. Обнаружено, что полученная таким путем оптически активная аминокислота имеет конфигурацию природного энантиомера (обычно 5), а оставшаяся ацнламинокислота соответствует нснриродному К-изомеру. Объясните это. [c.92]

Одним ИЗ недостатков метода является то, что ацилазы, выделенные из свиной почки, неустойчивы и поэтому их следует готовить непосредственно перед употреблением. К счастью, для некоторых аминокислот были тщательно разработаны методы расщепления, при которых используют продажные ферменты. Например [70], реакция ( )-ацетилфенилаланина с п-толуидином, которую катализирует папаип, дает п-толуидид ацетил-Ь-фенилаланина и непрореагировавший ацетил-О-фенилаланин. Смесь этих веществ можно легко разделить химически и по отдельности гидролизовать до 0-(4-)-фенилаланина и Ь-(—)-фенилаланина. [c.79]

При помощи ацилаз можно разделить рацемические смеси большинства аминокислот. Ацилазы аминокислот — широко распространенные ферменты, они содержатся в тканях животных (хорошо изучена и широко используется ацилаза из почек свиньи), у растений и микроорганизмов. Ферменты из различных источников различаются по своей субстратной специфичности, обнаружен даже фермент, избирательно гидролизующий Ы-ацетил-О-аминокислоты. Известен фермент, гидролизирующий Ы-8-ациллизин. [c.46]

Ацилаза-1 из почек свиньи, лиофилизированная Гексокииаза из дрожжей, раствор Гиалуронидаза из семенников быка [c.641]

Гринштейн нашла, что ацилаза, выделяемая из почек, например, свиньи, расщепляет только Ь-антиподы ацетиламинокислот и хлораце-тиламинокислот. [c.456]

В последнее время все шире применяются некоторые биохимические методы, более быстрые, чем химические. Один из них состоит в превращении D, L-аминокислоты в эфир и гидролизе последнего такими ферментами, как панаин или химотрипсин, атакующими только эфиры L-форм. Во-втором, очень сходном методе, N-ацилпроизводные (ацетилированные, хлорацетилированные или трифторацетилированные) D, L-аминокислот подвергаются асимметрическому гидролизу ферментами (ацилазами), выделенными из почек свиней или крыс, или сырой карбо-ксипептидазой. При этом получается L-аминокислота наряду с D-ацил-аминокислотой [c.383]

Особое значение приобрели ферментативные методы расщепления рацемических аминокислот. Чаще всего для этого используется ацилаза — фермент, выделяемый из почек свиней. Разделяемую аминокислоту (например, ДХ-аланин) ацетилируют и полученный aцeтил-D, -aлaнин обрабатывают в водном растворе ацилазой, под действием которой происходит стереоспе-цифический гидролиз -ацетилаланина [c.779]

При использовании ферментов возможны различные пути. Обычно они основаны на том, что в живых организмах ферментативные системы реагируют с тем энантиомером, который встречается в природе. Например, Пастер обнаружил, что грибок плесени Peni illium glau um разрушает природную (-f)-винную кислоту, а не (—)-энантиомер, не встречающийся в природе. Если в синтетическую ( )-винную кислоту внести эту плесень, то разрушаются молекулы ( + )-кислоты и в растворе остаются молекулы (—)-кислоты таким путем из ферментированной смеси получают чистую —)-кислоту. Причина, по которой хиральный фермент реагирует только с одним из двух энантиомерных субстратов, была объяснена выше. В другом случае вместо разрушения одни из двух энантиомеров подвергается химическому превращению. Например, при расщеплении синтетических а-аминокислот на оптически активные аминокислоты (из которых построены все природные белки) рацемическую кислоту сначала ацилируют и получают рацемическую ациламинокислоту. Последнюю затем гидролизуют в присутствии фермента ацилазы, получаемого из почки свиньи. Ферментативный гидролиз затрагивает только ацетильные производные природных (обычно S) аминокислот эти аминокислоты получаются таким образом в свободном состоянии и легко отделяются от оставшихся ацетильных производных R-аминокислот. Свободные R-аминокислоты можно получить гидролизом оставшихся R-ацетиламино-кислот обычными химическими методами (например, в присутствии соляной кислоты). [c.31]

Ацетоциннамон см. Бензилиденацетон Ацетуровая кислота см. К-Ацетилглицин Ацилаза I из почек свиньи [c.61]

Крайний слз чай кинетического разделения при получении оптически активных соединений встречается, когда настолько больше А (+) (или наоборот), что может быть достигнуто почти по.тное превращение одного из энаптиомеров без заметной реакции другого. Этот метод исключительно успешно использовали Грин-штейн с сотр. (см. работу [104] и литературу, на которую ссылаются авторы этой работы) для получения онтически активных аминокислот. К-Ацетильное или К-хлорацетильное производное рацемической аминокислоты К-49, 8-49) под действием выделенного из гомогената печени свиньи фермента ацилазы I (хиральный реагент) нри 37 °С в течение 12 ч дает гидролизованпый природный энантиомер (5-50), который выделяют из реакционной среды обычными методами. Затем выделяют незатрагиваемый ферментом [c.45]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология