Аминокислоты выделение индивидуальных

Часть выделенного индивидуального дипептида растворяют в разбавленной соляной кислоте и полученную каплю подвергают действию нитрозных газов в течение 10 мин при 37° [40]. Свободная аминогруппа аминокислоты, карбоксил которой амидно связан в молекуле дипептида, под влиянием нитрозных газов замещается на гидроксил. После упаривания реакционной смеси, гидролиза остатка 6 н. соляной кислотой в капилляре и упаривания гидролизат хроматографированием на бумаге можно разделить на оксикислоту и аминокислоту. Нингидрин обнаружит присутствие только той аминокислоты, которая была связана в пептиде своей аминогруппой. [c.480]

Применение распределительной хроматографии для изучения химии и обмена аминокислот и белков имеет наибольшее значение, так как с ее помощью удается разрешить труднейшие задачи разделения, идентификации и выделения индивидуальных аминокислот и пептидов из их смесей. В литературе описано много работ по хроматографическому разделению и определению аминокислот. [c.144]

Метод нашел применение в электродиализных процессах как метод контроля при получении основных аминокислотных фракций из белковых гидролизатов и выделении индивидуальных аминокислот из этих фракций. [c.253]

Таким образом, применение диализных и электродиализных схем и методов очистки и выделения индивидуальных Ь-аминокислот требует разработки такой аппаратуры и таких приемов работы, которые позволили бы получать хороший выход Ь-аминокислоты и обеспечивали ее хроматографическую чистоту. [c.449]

Электролиз растворов аминокислот проводится главным образом для очистки от примесей минеральных солей и кислот и выделения индивидуальных аминокислот из их смесей. [c.261]

Ко второй половине XIX в. было показано, что хотя в природе и существует много разных типов белков, все они являются крупными молекулами, распадающимися при гидролизе на более простые соединения, аминокислоты. На фиг. 14 приведена структурная формула, общая для всех входящих в состав белков аминокислот. Все аминокислоты содержат атом углерода, называемый а-углеродом, к которому присоединены аминогруппа и карбоксильная группа. Остальные две валентности а-атома углерода обычно насыщены атомом водорода и боковой цепью. Конкретная структура боковой цепи аминокислоты и определяет ее индивидуальные свойства. Самая простая из аминокислот, глицин, вообще не имеет боковой цепи. У этой аминокислоты с а-атомом углерода соединены просто два атома водорода. Глицин был одной из первых идентифицированных аминокислот. Выделение глицина из желатина датируется 1820 годом. К концу XIX в. были идентифицированы 16 аминокислот из тех двадцати, которые, как мы теперь знаем, входят в состав белков (фиг. 15). Последняя из открытых аминокислот, треонин, была идентифицирована в 1935 г. [c.38]

Выделение из белковых веществ. Важнейший источник a-a шнo-кислот — природные белки. При гидролизе белков (стр. 289) образуются сложные смеси, содержащие различные аминокислоты, а также некоторые другие вещества. Трудность заключается в разделении таких смесей на составные части. Однако теперь уже существуют разнообразные методы, позволяющие выделять из белковых гидролизатов индивидуальные аминокислоты. [c.285]

Индивидуальность полученных препаратов гликопротеинов контролируется чаще всего аналитическим ультрацентрифугированием (см., например, ), электрофорезом с подвижной границей или на носителях, хроматографией на ДЭАЭ-целлюлозе. Как и в случае полисахаридов, критерием однородности выделенного гликопротеина может служить неизменность его мономерного состава (моносахаридов и аминокислот) и физико-химических свойств при применении нескольких способов очистки. Для определения нативности выделенных веществ особое значение имеет контроль их биологической активности, в первую очередь иммунологических свойств. [c.567]

При питании больных диабетом (или животных, у которых диабет был вызван искусственно при помощи флоризина) индивидуальными аминокислотами наблюдалось, что большинство аминокислот вызывает повышенное выделение глюкозы и лишь некоторые (лейцин, изолейцин, фенилаланин и тирозин) дают ацетон и аце-тоуксусную кислоту, являющиеся, как известно, метаболитами жиров (том I). Следовательно, аминокислоты делятся на глюкогенные и кетогенные. (Продукты превращения следующих четырех аминокислот неизвестны лизина, метионина, триптофана и гистидина.) Отсюда следует, что в процессе расщепления аминокислот в организме некоторые аминокислоты включаются, начиная с определенной стадии, в обмен углеводов, а другие —в обмен жиров. Ниже мы опишем вкратце начало процесса расщепления аминокислот в живых организмах. [c.387]

Методом ГЖХ в виде различных летучих производных могут быть определены как индивидуальные аминокислоты, так и их смеси, выделенные из сложных по своему составу биологических объектов белков, пептидов, энзимов. [c.72]

ЭЛЕКТРОДИАЛИЗНЫЕ МЕТОДЫ РАЗДЕЛЕНИЯ ГИДРОЛИЗАТОВ БЕЛКОВОГО СЫРЬЯ НА АМИНОКИСЛОТНЫЕ ФРАКЦИИ И ВЫДЕЛЕНИЕ ИЗ ФРАКЦИИ НЕКОТОРЫХ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ АМИНОКИСЛОТ. Сообщение 3. ЭЛЕКТРОДИАЛИЗНЫЕ МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ -АРГИНИНА, [c.274]

Разработанные ранее электродиализные методы разделения гидролизатов белкового сырья на аминокислотные фракции и выделения из фракций некоторых индивидуальных -аминокислот [1, 2] создают предпосылки для применения электродиализа в процессах разделения -аминокислот и нх [c.391]

Аминокислоты. Ионообменному выделению из растворов и получению индивидуальных аминокислот посвящена обширная литература, например [74]. Мы ограничимся лишь краткой характеристикой ионообменного поведения аминокислот и приведем несколько примеров расщепления их солей. [c.147]

Количественное выделение аминокислот из этой смеси и их определение — одна из сложнейших задач аналитической химии [1, 2]. Это связано с тем, что химические и физические свойства аминокислот, обусловленные строением молекул, довольно близки [3], поэтому специфичных реагентов на индивидуальные аминокислоты нет. Химические методы количественного определения отдельных аминокислот в смеси длительны, трудоемки и не дают удовлетворительных результатов [1]. [c.16]

Выделение меченых аминокислот достигается следующим образом. Водоросли настаивают в 80% этиловом спирте, затем отделяют центрифугированием и подвергают гидролизу 6н. H I в запаянной ампуле при 105—110° С. Белковый гидролизат упаривают в вакууме и очищают от углеводов, органических кислот и гуминоподобных веществ. Раствор, содержащий смесь аминокислот пропускают через катионит КУ-2 в Н+-форме. Использование в качестве элюента соляной кислоты различной концентрации позволяет разделить смесь на отдельные группы аминокислот (рис. 14). Разделение групп аминокислот на индивидуальные соединения можно осуществить методом препаративной бумажной хроматографии. [c.57]

Точную аналогию с определением соответствующих элементов с помощью изотопного разбавления представляет использование меченых атомов для определения соответствующих соединений, присутствующих в смеси. Количественное определение содержания данного вещества в смеси обычными методами требует реагента, специфичного для этого вещества. Если такого реагента не существует, то необходимо количественно выделить индивидуал)эНое соединение из смеси. Применение предположительно специфического реагента опасно при наличии в смеси соединений со сходной структурой. Выделение индивидуального соединения обычно ставит нас перед альтернативой выделение малого количества рассматриваемого соединения без примесей либо полное его выделение с примесями чистота и полнота выделения взаимно исключают друг друга. В качестве примера можно привести исследование [1701] гидролизатов белков, содержащих около 24 а-аминокислот, количественное содержание которых должно быть определено для установления структуры белка. При использовании метода изотопного разбавления, представляющего единственный метод полного анализа, необходимо синтезировать каждую из имеющихся а-аминокислот в изотонически обогащенной форме. Например, глицин, содержащий обогащенный азот, образует неразделимую смесь с необогащенным глицином. Выделение малых количеств чистого глицина с последующим измерением отношения в нем позволит точно оценить содержание глицина в смеси. [c.114]

В течение первой половины иашего столетия были открыты все аминокислоты, входящие в состав растительных белков, изучены возможные пути их превращений, определено содержание белков и небелковых соединений азота в различных растениях, а также влияние условий выращивания растений на количество белков в них. Были выделены и изучены многие ферменты, катализирующие обмен азотистых соединений, и выявлены некоторые факторы, оказывающие влияние на синтез белков. Однако до начала пятидесятых годов оставались невыясненными многие важнейшие процессы белкового обмена. К этому времени имелись скуднтме данные по аминокислотно1му составу растительных белков, не было надежных методов выделения индивидуальных белков, были получены лишь очень приближенные, зачастую противоречивые данные о скоростях синтеза, распада и обновления белков в растениях и оставалась невыясненной важнейшая проблема биохимии и биологии в целом— механизм синтеза белков. [c.286]

Исследование первичной структуры включает целый ряд этапов 1) определение числа отдельных полипентидных ценей, входящих в молекулу белка 2) расщепление связей между этими полипептидными цепями и выделение индивидуальных цепей 3) специфическое расщепление каждой из поли-нептидных цепей нативной молекулы на меньшие цепи (фрагменты) удобной величины 4) определение аминокислотной последовательности в каждом из фрагментов 5) выяснение порядка расположения фрагментов в цепи и установление таким путем уникальной последовательности аминокислот в каждой из цепей нативного белка 6) идентификация мест, в которых индивидуальные пептидные цепи соединены друг с другом. Таким образом, молекулу белка расщепляют, затем определяют структуру продуктов расщепления [c.86]

ИСКУССТВЕННАЯ ПИЩА, пищ. продукты, к-рые олуча -ют из разл. пищ. в-в (белков, аминокислот, липидов, углеводов), предварительно выделенных из прир. сырья или полученных направленны.м синтезом из минер, сырья, с добавлением пищевых добавок, а также витаминов, минер, к-т, микроэлементов и т. д. В качестве прир. сырья используют вторичное сырье мясной и молочной пром-сти, семена зерновых, зернобобовых и масличных культур и продукты их переработки, зеленую массу растений, гидро-бионты, биомассу микроорганизмов и низших растений прн этом выделяют высокомол. в-ва (белки, полисахариды) и иизкомолекулярные (липиды, сахара, аминокислоты и др ) Низкомол. пищ. в-ва м. б. получены также микробиол. синтезом из глюкозы, сахарозы, уксусной к-ты, метанола, углеводородов, ферментативным синтезом из предшественников и орг. синтезом (вкл очая асимметрич. синтез для оптически активных соед ). Высокомол. в-ва должны обладать определенными функциональными св-вамн, такими, как р-римость, набухание, вязкость, поверхностная активность, способность к прядению (образованию волокон) и гелеобразованию, а также необходимым составом и способностью перевариваться в желудочно-кишечном тракте. Низкомол. в-ва химически индивидуальны или являются смесями в-в одного класса в чистом состоянии их св-ва не зависят от метода получения. [c.273]

Предосторожности при выделении. Критерии индивидуальности и нативности полисахарида. Сложность подбора условий для выделения полисахарида обусловлена главным образом тем, что строение его в момент выделения обычно не бывает известно. Нужно всегда учитывать, что полисахарид может содержать группировки, лабильные к кислотам, например гликозидные связи фураноз или 3,6-ангидрогексоз, а также группировки, лабильные к щелочам, например сложные эфиры, гликозиды р-окси-а-аминокислот, восстанавливающие концевые моносахариды с заместителем в положении 3 и др. В щелочной среде происходит заметная деструкция вследствие окисления кислородом воздуха. Поэтому применение жестких химических воздействий ведет часто к снижению среднего молекулярного веса, падению вязкости и т. д. Расщепление химических связей может происходить и при некоторых методах очистки, связанных с превращением полисахаридов в производные. Так, при регенерировании полисахарида из его ацетата будут неизбежно разрушены и другие сложноэфирные группировки, довольно часто присутствующие в полисахаридах. [c.488]

В гл. 1П указывалось, что первичная структура некоторых полипептид-ных гормонов (в частности, вазопрессина и меланоцитстимулирующего гормона) у разных биологических видов не вполне одинакова. Такая же видовая специфичность наблюдается и у белков. Сэнгер и его сотрудники, работая с препаратами инсулина, выделенными от разных видов млекопитающих, во всех случаях обнаружили те или иные вариации либо в А-цепи (на участке, ограниченном дисульфидным мостиком), либо в В-цепи (на ее карбоксильном конце). В препаратах цитохрома с, выделенных от разных видов, также были обнаружены индивидуальные различия, определяющиеся природой аминокислот в ключевом пептидном сегменте. Помимо этих вариаций, обусловленных видовой специфичностью, встречаются также и различия в белках одного и того же вида, возникшие в результате мутаций. Большинство сведений о влиянии мутаций на структуру белка почерпнуто нами из прекрасных работ Ингрэма. Ингрэм и его сотрудники показали, что нормальный гемоглобин взрослого человека и гемоглобин больных таким наследственным заболеванием, как серповидноклеточная анемия, отличаются только тем, что в определенном положении р-цепи остаток глутаминовой кислоты в аномальном гемоглобине заменен валином. (Напомним, что молекула гемоглобина состоит из двух пар идентичных цепей а- и Р-цепей в гемоглобине взрослого человека или а- и у-цепей в гемоглобине плода.) [c.96]

Новые исследования в биохимии, медицине, биологии и в дрз гих областях науки и техники требуют индивидуальных хроматографически чистых -аминокислот. Между тем практически не существует комплексных методов выделения аминокислот требуемого качества из белкового сырья. Ранее нами показана возможность электродиализного разделения гидролизата желатина на аминокислотные фракции и установлен ряд закономерностей про.хождения аминокислот через ио]юобмеиные мембраны [1, 2]. [c.63]

Целью настоящей работы и явилось создание ращюналь-ных электродиализных методов разделения гидролизатов на аминокислотные фракции и выделения из них некоторых индивидуальных аминокислот. [c.69]

Органич. К. а. резко отличается от неорганич. анализа. Подавляющее большинство органич. соединений имеет ковалентный характер и потому каждое из них должно идентифицироваться индивидуально. Для этого сначала проводят реакции, определяющие принадлежность соединения к к.-л. классу органич. соединений, а затем — реакции, характерные для данного соединения. В органич, К. а. смесь веществ первоначально разделяют, основываясь на их разной летучести, растворимости или сорбции. К легколетучим относят вещества с т. кин. ниже 160°, к труднолетучим — ст. кип. выше 160°. Затем вещества разделяют по классам согласно их растворимости, преим. в воде и эфире. Наконец, применяют групповые реакции, с помощью которых устанавливают присутствие классов химич. соединений (спирты, фенолы, кислоты, амины и проч.). Некоторые химич. реакции позволяют перевести малоразличимую смесь веществ в вещества с достаточно различными физич. свойствами, что дает возможность отделять их далее посредством дистилляции или растворением. Напр., можно превратить смесь поликарбоновых к-т и аминокислот в летучие сложные эфиры, сравнительно легко разделяемые. При идентификации выделенного чистого вещества большое значение имеет элементарный К. а., проводимый обычными методами для открытия углерода, водорода, азота, серы, галогенов, фосфора, мышьяка и металлов, а также испытание основных физич. свойств (темп-р плавления и кипения, растворимости и определение молекулярного веса). См. также Элементарный анализ, Функциональный анализ. [c.252]

Для получения соответствующего пептида эфир карбонил-аминокислоты и N-защищенную аминокислоту обычно нагревают в толуоле при 110° до прекращения выделения двуокиси углерода [823]. Если реакцию проводить в пиридине, она начинается уже при комнатной температуре и для ее завершения достаточно нагревания до 50—60° [815, 823]. По-видимому, реакция протекает через смешанный ангидрид карбоновой и карбаминовой кислот в случае обычных эфиров изоциановой кислоты такие промежуточно образующиеся смешанные ангидриды (110) выделены в индивидуальном состоянии. [c.182]

Белки, их химические и физико-химические свойства. Методы выделения и очистки белков классические — диализ, высаживание из растворов современные — распределительное и ионообменное хроматографирование, хроматографирование на молекулярных ситах, электрофорез. Индивидуальность белков.. Цветные реакции белков биуретовая, ксантопротеиновая, сульфгидрильная, Милона, нингидринная. Первичная, вторичная и третичная структуры белков, факторы, определяющие эту структуризацию. Проблема установления первичной структуры белка. Вторичная структура а-спираль и Р-структура, третичная структура. Классификация белков простые и сложные. Простые белки альбумины, глобулины, проламины, прот амины, гистоны и склеропротеины. Сложные белки (протеиды) нуклеопротеиды, глюкопротеиды, липопротеиды, фосфопротеиды, хромопротеиды, металлопротеиды. Заменимые инезаменимые аминокислоты. Проблема синтеза искусственной пищи. [c.189]

Изучение водорастворенных органических веществ почв и подстилок проводилось как в лабораторных, так и в природных условиях. В. Р. Вильямсом [57] были получены дренажные воды лизиметров, в которых определены креновая, ульминовая и гумино-вая кислоты. Тем самым была доказана специфическая природа перегнойных веществ, не искаженных химическими методами их выделения. Впоследствии Н. Г. Моор [123] и А. С. Фатьянов [194] подтвердили положение о преобладании в почвенных растворах фульвокислот. А. С. Фатьянов в природных водных растворах почв определил фульвокислоты (2,8 г/л) и гуминовые кислоты (1,8 г/л). Преобладание фульвокислот в растворах объясняется значительно более трудным закреплением их в почве по сравнению с гуминовы-ми кислотами. Исследованиями В. В. Пономаревой [145] показано, что фульвокислоты осаждаются гидроокисями оснований (бария и кальция) только в щелочной среде при pH = 8. При более низком pH соли этих кислот будут переходить из почвы в водный раствор. Е. И. Александрова [2] в природных растворах, выделенных из торфяных и подзолистых почв путем отжимания прессом, при помощи распределительной хроматографии на бумаге установила присутствие разнообразных органических соединений индивидуальной природы. Это низкомолекулярные органические кислоты (щавелевая, винная, лимонная, яблочная, молочная, янтарная, глутаровая, адипиновая) аминокислоты (аспарагиновая, глутаминовая кислоты, лизин, глицин, аланин, фенилаланин, треонин, пролин, валин) вещества ароматической природы типа полифенолов (пирогаллол, пирокатехин, салициловая и протокатеховая кислоты). [c.28]

Устранение такого несоответствия между возможностями изучения индивидуального соединения и возможностями выделения его из сложной смеси связано с развитием хроматографических методов. В первую очередь это касается трех разновидностей метода хроматографии — бумажной, тонкослойной и газо-жидкостной,— которые появились почти через полвека после первых успешных опытов Цвета [1] в 1901—1904 гг. Открытие и развитие метода бумажной хроматографии [2] создало прочную базу для анализа и разделения сложных смесей аминокислот, пептидов, липидов и нуклеотидов, что значительно расширило возможности биохимических исследований. В известной мере аналогичная техника тонкослойной хроматографии [3, 4] на закрепленных и незакрепленных с.лоях сорбентов ускорила исследования в области синтетической органической химии и в ряде прикладных областей химии и химической технологии. [c.5]

Хорошо известно, что молекулы белка построены из аминокислот. Спрашивается являются ли белки химически индивидуальными веществами, состоящими из математически идентичных молекул, или же это сложные смеси полимеров, в которых выдерживается только средний состав и наблюдаются статистические флюктуации между макромолекулами Вопрос этот не праздный и весьма важный. Мы знаем, что белки — высокомолекулярные соединения, состоящие из многих сотен, а то и тысяч аминокислотных звеньев. В случае обычных линейных полимеров мы всегда имеем дело со статистическими ансамблями макромолекул. Понятие молекулярного веса у полимеров чисто статистическое. Правильнее говорить о функции распределения по молекулярным весам и о разных статистических средних молекулярных весах (среднечисленном, средневесовом и т. п.). Даже химическое строение макромолекул не вполне идентично. Так, например, существуют разветвления полимерных цепей, или альтернативные способы присоединения мономерных единиц, и распределяются они по законам теории вероятностей. О белках можно было думать, что и этим веществам присуща такая же статистическая природа. А экспериментальные методы выделения [c.9]

В настоящее время одним из лучших в этом отношении объектов являются культуры животных клеток. Эти в некоторой степени искусственные системы представляют собой отдельные клетки, выделенные из тканей какого-либо животного, которые в процессе адаптации к условиям существования in vitro претерпевают дедифференцировку с потерей специфических функций. Вместе с тем такие микрообъекты приобретают способность к стабильному самостоятельному росту, характер которого определен общими законами роста и развития популяции. Существует большое число таких перевиваемых клеточных линий, достаточно полно охарактеризованных и сохраняющих на протяжении многолетних наблюдений свои свойства. Что касается питательных сред, то, являясь в большинстве своем полусинтетическими, они компонуются на основе индивидуальных аминокислот и витаминов, растворяемых в глюкозо-солевом растворе при добавлении некоторого количества сыворотки крови (чаще всего крупного рогатого скота). Прописи используемых в настоящее время питательных сред созданы путем исключения тех компонентов в исходных, достаточно сложных питательных средах, которые не принимают участия в процессе роста популяции. Широко используемая в подобного рода исследованиях так называемая минимальная среда Игла или ее модификация—среда ПС [144] представляет собой минимальный набор компонентов, действительно необходимых для роста и размножения животных клеток. [c.230]

При нрименении Адамсом и Холмсом [17] синтетических ионообменных СМОЛ, сиособных связывать катионы, стало возможным отделение аминокислот от неа штистых колшонентов нротеино-иых гидролизатов и выделение из смеси индивидуальных амино-] ,ислот. [c.305]

Для выделения аспарагина и отдельных аминокислот был использован метод многослойной восходящей ли круговой хроматограммы. Идентификацию отдельных аминокислот производили нингидринной реакцией на нескольких листах многослойной хроматограммы. По этим проявленным листам устанавливали локализацию аминокислот на необработанных нингидри-ном листах хроматограммы. Участки бумаги с локализованными иа них аминокислотами вырезали, аминокислоты из этих участков выщелачивали дистиллированной водой и подвергали повторной хроматографической очистке. В процессе очистки отдельных амино1 и(Слот происходили з1начительные их потери, поэтому абсолютный выход большинства индивидуальных аминокислот был мал, кроме аспарагина, содержащегося в исходном материале в весьма больших количествасх. Чтобы иметь достаточные количества исследуемого материала, обеспечивающие высокую точность эксперимента, оказалось необходимым выделять отдельно только аспарагин, а все индивидуальные аминокислоты объединить в две группы — дикарбоновые амино- [c.205]

Несмотря на тот огромный интерес, который всегда вызывала как проблема белка в целом, так и отдельные направления исследований, в научной литературе почти не затрагивались самые кардинальные вопросы истории белковой химии. Более двухсот лет прошло с тех пор, когда белок был выделен как таковой и им начали интересоваться как индивидуальным веществом, но история учения о белке стала темой лишь только одной обзорной статьи Г. Виккери и Т. Осборна, напечатанной в 1928 г. [449]. Во-первых, эта единственная работа значительно устарела, во-вторых, авторы обзора лишь кратко и без глубоких оценок касались многих важных работ в области структурной химии белка, сосредоточив основное внимание на тех гипотезах, которые тесно связаны с достижениями близкой их интересам препаративной и аналитической химии белков. Позднее общих вопросов истории химии белка очень кратко касались А. Р. Кизель в докладе на белковой конференции в Москве в 1932 г. [24] и К- Шмидт во вступительной главе к сборнику Химия аминокислот и белков , изданному в 1945 г. [392]. Оба эти автора пытались, правда лишь в самых общих чертах, наметить основные периоды развития химии белка. [c.9]

Количественное хроматографическое разделение смесей, являющееся целью хроматографического опыта, сближает аналитическое и препаративное применение хроматографии это дало основание М. М. Сепявипу кратко затронуть в статье вопрос получения ряда редких металлов методом ионного обмена и ионообменной хроматографии. Однако в последние годы области применения ионообменных процессов значительно расширились и, в частности, захватили область органических соединений. В настоящее время хроматографически разделяют смеси не только простейших, способных к диссоциации органических соединений, например, карбоновых кислот, но и главным образом сложные смеси алкалоидов, аминокислот и пр. В сборнике этому вопросу посвящена статья Г. В. Самсонова, содержащая обширный материал по специфике иоипого обмена больших молекул органических веществ и в значительной степени освещающая современные, во многом принадлежащие самому автору, исследования в области ионообменного выделения различных индивидуальных антибиотиков в чистом виде. [c.8]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология