Белки алкилирование по растворимости

В этой статье особое внимание уделяется физико-химическим характеристикам производных белков. Ожидаемое распределение вокруг некоторого среднего значения физико-химической гомогенности осуществляется во всех тех случаях, когда в реакции участвует довольно значительное количество групп.. Однако имеются и явные исключения, например в случае восстановления и алкилирования связей —S—S— лизоцима в растворе мочевины (736]. В отличие от большинства химических модификаций белков этот процесс представляет собой в основном явление типа все или ничего . Частично восстановленная реакционная смесь состоит из двух вполне определенных фракций, которые можно отделить друг от друга, пользуясь их различной растворимостью. Одна из фракций состоит из непрореагировавшего белка, а вторая представляет собой почти полностью восстановленный или проалкилированный продукт реакции, неактивный и плохо растворимый. Другие кратко описываемые ниже примеры физико-химической гетерогенности являются в основном результатом агрегации или вторичных реакций. [c.338]

Алкилирование с помощью 4 винилпиридина [25, 60]. Реакция идет согласно уравнению (2.6). С помощью 4-винилпиридина в полипептидную цепь вводят полярную группировку, которая повышает растворимость белка и способствует его последующей очистке. Модифицированный остаток цистеина устойчив в условиях кислотного гидролиза, имеет характерное [c.87]

Следует привести еще несколько примеров успешного применения гель-фильтрации в тонком слое. Линк [36] показал, что фракционирование в тонком слое можно проводить в присутствии 8М мочевины или 6,5 М хлоргидрата гуанидина. В этих условиях он сопоставил скорости миграции нативного и модифицированного (восстановленного и алкилированного) р-белка из спинномозговой жидкости. Совпадение скорост-ей миграции обоих образцов указывало на отсутствие в белке субъединиц с различным молекулярным весом. В сочетании с электрофорезом тонкослойную гель-фильтрацию применяли как удоб1у>1й метод контроля при выделении аминоацил-т-РНК-синтетаз [37]. При сопоставлении результатов анализа путем тонкослойной гель-фильтрации на G-200 двух фракций с валил-т-РНК-синтетазной активностью, но несколько различавшихся в функциональном отношении, оказалось, что обе фракции довольно близки по размерам молекул [38]. Радола [67] использовал тонкослойную гель-фильтрацию для решения ряда задач к ним относится анализ сывороточных белков животных и человека, растворимых белков культуры клеток млекопитающих in vitro, растворимых белков из листьев шпината. [c.266]

ИОДУКСУСНАЯ КИСЛОТА J H2 OOH, мол. в. 185,96 — бесцветные ромбич. формы кристаллы (из воды или петролейного эфира), т. пл. 83°, 2,2694, 2,1893 константа диссоциации в воде К = = 7,0 10 (18°) и 7,4 10 (26°) поверхностное натяжение 38,63 дин1см (85°), 33,41 дип/см (130°) растворима в воде и спирте, слабо растворима в эфире. И. к. сильно раздражает слизистые оболочки, на коже вызывает сильные ожоги. И. к. легко реагирует с 8Н-гр нпами тиогликолевой к-ты, цистеина, глутатиона и белков, образуя алкилированные производные этих веществ [c.147]

Это значит, что такие денатурирующие агенты взаимодействуют в растворе с тетрапептидом, моделирующим амидные группы полипептидной цепи, понижая его энергию. Следовательно, можно ожидать, что они будут способствовать денатурации белка, аналогичным образом взаимодействуя с его амидными группами. Этот эффект уменьшается при замощении атомов водорода денатурирующего агента алкильными группами, и тетралкилмочевина и гидрохлорид тетраметилгуанидина вызывают уже уменьшение растворимости ЭЭАТГ. Так как алкилирование приводит к возрастанию солюбилизирующей способности мочевины и гидрохлорида гуанидина по отношению к неполярным молекулам [33], то их взаимодействие с пептидом не может быть по своей природе гидрофобным. Денатурация бычьего сывороточного альбумина денатурирующими агентами этого типа также требует наличия незамещенных атомов водорода [32], Проще всего это можно объяснить тем, что денатурирующий агент взаимодействует с пептидными группами с образованиел водородных связей. [c.262]

Значение изменения растворимости можно иногда установить путем сравнения свойств производных белка. Например при алкилировании сульфгидрильных групп иодацетатом функциональные группы остаются заряженными, а при алкилировании иодацетамидом заряд исчезает. Это приводит к значительному различию в способности коагулировать при нагревании. Подобным же образом, при малонилировании в белок вводится новая полярная карбоксильная группа, обеспечивающая возможность димеризации малонильного производного. [c.339]

В реакции с шерстью вводили множество различных полифункциональных алкилируюш,их средств, в том числе упоминавшиеся выше в разделе, посвященном дисульфидному расширению. Во всех случаях шерсть перед сшиванием не восстанавливали. Некоторые типичные полифункцио-нальные реагенты, применявшиеся для этой цели, а также свойства шерсти, модифицированной действием этих веществ, приведены в табл. У1-38 [243]. Все полученные производные характеризовались пониженной растворимостью в щелочи и меньшей склонностью к усадке. Этерификация шерсти до сшивания [243] не препятствовала протеканию реакций образования поперечных связей с другой стороны, ацетилированная шерсть не реагировала с указанными сшивающими агентами. Эти данные показывают, что в реакции образования поперечных связей при действии полифункциональных алкилирующих средств участвуют аминогруппы белка это, однако, не исключает возможности частичного участия в обсуждаемой реакции карбоксильных или гидроксильных групп, если они не были защищены до проведения алкилирования. [c.416]

Обработка надмуравьиной кислотой приводит к окислению кроме остатков цистеина также остатков метионина и триптофана и обычно дает более растворимые продукты, чем восстановительное алкилирование. Для создания в белке дополнительных связей, подвергающихся гидролизу трипсином или протеазой А. mellea, применяют аминоэтилирование остатков цистеина. [c.349]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология