Культивирование меристем

Достаточно хорошо разработана технология клонального микроразмножения земляники, основанная на культивировании апикальных меристем (рис. 3.12). Меристематические верхушки изолируют из молодых, свободных от вирусных болезней, растений и выращивают на модифицированной питательной среде Мурасига и Скуга, содержащей БАП в концентрации 0,1—0,5 мг/л. Через Ъ—А недели культивирования меристема развивается в проросток, в основании которого формируются адвентивные почки, которые быстро растут и дают начало новым почкам. В течение 6—8 недель образуется конгломерат почек, связанных между собой соединительной тканью и находящихся на разной стадии развития. Появляются листья на коротких черешках, в нижней части которых формируются новые адвентивные почки. Эти почки разделяют и пересаживают на [c.112]

Обычно в основе вегетативного размножения растений лежит способность эмбриональной ткани меристемы (гл. 1, разд. Д. 4) дифференцироваться в корни и побеги. С другой стороны, при культивировании изолированных клеток флоемы или других дифференцированных тканей, как правило, формируется так называемый каллус, т. е. масса претерпевших дифференцировку клеток, напоминающих эмбриональные. При создании благоприятных условий, в частности при культивировании в среде, содержащей кокосовое молоко, а также при соблюдении соответствующего соотношения концентраций ауксина и цитокинина удавалось индуцировать реверсию, т. е. превращение клеток флоемы корня моркови в эмбриональные клетки, из которых затем развивалось целое растение [136]. Этот опыт имеет принципиальное значение, так как определенно доказывает, что дифференцированные клетки флоемы моркови содержат полный набор генов, необходимых для развития растения. Вместе с тем существенно и то, что с большинством растений такого рода опыт воспроизвести довольно трудно и процесс дедифференцировки далеко не всегда происходит автоматически. Все же это происходит в достаточном числе случаев, чтобы установить факт тотипотентности ядра дифференцированных клеток. [c.354]

III э т а п (1922—1932 гг.). В этот период независимо друг от друга американский ученый В. Робинс и немецкий ученый Котте показали возможность культивирования на твердых питательных средах меристемы кончиков корня томатов и кукурузы. Однако через определенное время 78 [c.78]

Структурной основой используемого на практике явления служит специфика строения точки роста растений дистальная ее часть, представленная апикальной меристемой, у разных растений имеет средний диаметр до 200 мкм и высоту от 20 до 150 мкм. В более нижних слоях дифференцирующиеся клетки меристемы образуют прокамбий, дающий начало пучкам проводящей системы. Известно, что успех клонального микроразмножения зависит от размера меристематического экспланта, чем больше листовых зачатков и тканей стебля, тем легче идет процесс морфогенеза, заканчивающийся получением целого, нормального пробирочного растения. Вместе с тем зона, свободная от вирусных частиц, очень различна для разных вирусов. Это зависит также от вида и сорта растения. В колеоптиле злаков, например, размеры участка верхушки, не содержащей сосуды, могут достигать до 250 мкм. Такая особенность строения апикальной меристемы исключает проникновение в нее вируса путем быстрого транспортирования по проводящей системе, но допускает возможность медленного распространения через плазмодезмы, соединяющие меристематические клетки. При культивировании апикальной меристемы картофеля величиной 200 мкм на питательной среде и дальнейшее получение из нее растений-регенерантов показали, что среди полученных растений только 10% были свободны от Х-вируса, но 70% — от Y-вируса. [c.116]

Одним из результатов проведенных исследований явилось наблюдение, что в растениях из семейства пасленовых тропановые алкалоиды образуются главным образом в корнях . Объектами исследования обычно служили белладонна, дурман и виды дубоизии Duboisia), причем опыты по культивированию были аналогичны опытам, вкратце изложенным при описании алкалоидов табака. Однако проблема селекции в действительности сложнее, чем может казаться, судя по результатам этих специальных наблюдений так, Джемс в отчете по исследованию биосинтеза алкалоидов белладонны констатирует, что алкалоиды сначала образуются в меристеме корешка и могут быть обнаружены, когда корешки достигнут длины 3 мм, но наряду с этим показывает, что можно добиться увеличения содержания алкалоидов даже в отрезанных листьях белладонны. Из этого он делает вывод, что нахождение алкалоидов в листьях может вызываться двумя причинами синтезом в самих листьях или перемещением алкалоидов из корня. [c.15]

В 1922 г. Роббинс и независимо от него Котте показали возможность культивирования на синтетической питательной среде меристемы кончика корня томатов и кукурузы. Эти опыты можно считать началом применения метода культуры изолированных органов растений. [c.11]

Органы, ткани, суспензии растительных клеток, протопластов культивируют на питательных средах (твердых агаровых или жидких), включающих макро- и микроэлементы минерального питания, сахара (чаще сахароза или глюкоза), витамины, аминокислоты или гидролизат казеина, фитогормоны (цитокииины, ауксины, гиббереллины и биологически активные вещества). Все живые, изолированные клетки и ткани разных органов растений (стебля, корня, листа, стеблевой меристемы, частей цветка покрытосемянных, гаметофитов голосемянных и споровых растений) при определенных условиях культивирования образуют каллусную ткань, состоящую из дедифферен-цированных клеток. Изменяя условия культивирования кал-лусной ткани, можно вызвать дифференциацию клеток, образование регенерационных меристем и восстановление целого-растения (рис. 70). [c.408]

Торпедовидная фаза (торпедо) развития зародыша (см. рис. П.З) связана с делением клеток преимущественно поперек продольной оси и с более интенсивным ростом клеток в зачатках семядолей и в зоне гипокотиля. Отчетливее выделяются по вытянутой в длину форме клетки прокамбия в гинокотиле. Формируется про меристема корня. На этой фазе, кроме все более возрастающей концентрации ИУК и присутствия цитокинина. необходим гиббереллин (для роста гипокотиля). Изолированные зародыши в фазе торпедо удается выращивать на сахарозно-минеральной среде с добавлением витаминов и гиббереллина, в то время как для культивирования сердцевидных зародышей необходимо кокосовое молоко (эндосперм), в состав которого входят ауксин, цитокинины, неидентифициро-ванные факторы углеводной природы и соединения, содержащие азот. [c.338]

Четвертый способ предварительного культивирования осуществляется в условиях искусственного закаливания к холоду, он применим к зимующим растениям умеренного климата. Для клеточных, тканевых и органных культур незимующих растений он непригоден. В случае культур меристем целесообразно предварительно закаливать сами растения, из которых затем стерильно вырезают меристемы и культивируют их на среде с ДМСО. Суть закаливания сводится к имитации естественного осеннего процесса подготовки растений к периоду зимнего покоя. У разных групп растений конкретные цитофизиологические механизмы такой подготовки различны. При работе с клеточными суспензионными или каллусными культурами обычно щ (так же как и растения) или сразу помещают в условия с температурой от 2 до 5 °С на срок от 1 до 6 нед, или сначала в течение нескольких суток выдерживают при температуре 8—10 °С. Остальные условия культивирования сохраняют прежними. Более эффективно закаливание в присутствии сахарозы. Для каллусных культур ее добавляют до 12—15% [1, 23]. Для суспензионных культур женьшеня мы получили наилучшие результаты, если после выращивания в обычных условиях в течение недели (примерно до конца экспоненциальной фазы роста) переносили их в условия с температурой 10 °С на 5—7 сут, добавляя сахарозу до 7 %, а затем выдерживали 2 нед при 2 °С, увеличивая концентрацию сахарозы сначала до 15, а через неделю до 20 % [24]. [c.72]

В культуре каллуса клеточное деление происходит беспорядочно во всех направлениях, и возникает неорганизованная масса ткани следовательно, в каллусе нет вполне определенных осей полярности. В меристеме побега илн корня, напротив, мы наблюдаем высокоорганизованное строение ткани, и характер деления строго упорядочен. Было обнарулеено, что при некоторых условиях культивирования в каллусе образуются стеблевые или корневые меристемы и в результате регенерируют новые целые растения. [c.240]

Очень трудно доказать отсутствие вируса в апикальной меристеме. Необходимо дать изолированной ткани расти в течение какого-то периода времени, с тем чтобы, если в ней присутствует хоть малое количество вируса, этот вирус мог бы размножиться и его удалось бы выявить. С другой стороны, в отношении пекоторых вирусов отмечено, что культивирование зараженных верхушек стебля на синтетических средах приводит к потере вируса. [c.178]

Известно, что кинетии угнетает репликацию ряда вирусов. Некоторые исследователи вводили это вещество или сходные с ним соединения в среду для культивирования ткани. В какой степени подобные вещества влияют на количество вируса, обнаруншваемого в апикальной меристеме, выращиваемой в культуре ткани, пока неизвестно. [c.178]

Разные исследователи используют для культивирования апикальной меристемы самые различные питательные среды. Основные ингредиенты такой сред1.1 — соответствующие минеральные соли (макро- и микроэлементы), сахароза и один или несколько стимуляторов роста (например, индо-лилуксуспая или гибберелловая кислота) иногда культуру выращивают па агаре. [c.451]

Химиотерапия. Результаты многочисленных опытов, в которых с целью освобождения растеиий от вируса использовались антивирусные препараты, принесли разочарование. Имеется несколько сообщений об излечении растений с помощью таких препаратов однако часто при этом выводы авторов основываются на экспериментах с очень небольшим числом растений или же сами результаты экспериментов могут быть интерпретированы иначе (см., нанример, [825]). Ни один из способов химической обработки растений сам по себе еще не нашел иримеиения в пра1<тике. Пайн [1332] обнаружил, что инъекции диметилсульфоксида персиковым деревьям могут в течегп1е одпого сезона задерживать появление симптомов вируса мозаики персика и вируса некротической кольцевой пятнистости, одиако в следующем году эти Симптомы появляются вновь. Как уже отмечалось выше, в некоторых случаях можно использовать химическую обработку в сочетании с тепловой или с таким методом, как культивирование апикальной меристемы. [c.452]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология