Выбор системы экспрессии

Какими критериями руководствуются при выборе системы экспрессии генов гетерологичных белков (дрожжи, система экспрессии на основе бакуловирусов, клетки млекопитающих) [c.157]

Система автономного автоматического управления смесительным отделением вьшолняет следующие функции выбор требуемых типов и подготовку каучуков, порошкообразных и жидких компонентов по заданному рецепту распределение материалов по автоматическим весам и контроль получения навесок с допустимой точностью путем переключения или предварительного отключения питателей дозировочных устройств управление устройствами дистанционной индикации веса корректировку уставок в случае частых отклонений навесок от заданных значений разрешение на автоматическую загрузку смесителей навесками компонентов после проверки состояния машин и установок разрешение на загрузку навесок в резиносмеситель и управление последовательностью операций согласно заданному режиму управление длительностью смешения, задание и контроль числа оборотов двигателя и давления поршня в процессе смешения прекращение процесса смешения или воздействие на него при нарушении или отклонении отдельных параметров от заданных значений задание числа оборотов рабочих органов для машин последующей обработки управление складом вращающихся барабанов для гранул маточных резиновых смесей по заданным критериям хранения, а также контроль выбора трасс транспортировки с учетом результатов проверок образцов смесей в лаборатории экспресс-контроля. [c.121]

Экспрессия прокариотических генов преимущественно зависит от выбора промотора в клонируемых генах тех же или близкородственных видов Чем отдаленнее геномы прокариотических клеток друг от друга, тем система "транскрипции-трансляции" генов срабатывает хуже или вообще не срабатывает Вот почему здесь важными оказались векторы [c.208]

Методы усиления генетической изменчивости многообразны для этой цели используют культуру тканей, слияние протопластов, перенос одиночных генов, гаплоиды, опыление облученной пыльцой, химический мутагенез, замену митохондриальных и хлоропластных геномов и т. д. Направленный перенос распознаваемых признаков может быть осуществлен методами генетической инженерии. Здесь стоят проблемы выбора вектора, -включение гена в геном и экспрессии нового признака в условиях сложной системы регуляции у растений как на генетическом, так и на метаболическом уровне. [c.50]

Реализация прогрессивных решений по энергосбережению в системах транспорта и распределения тепловой энергии связана с рядом проблем, которые можно разделить на три отдельные группы — технические, информационные и организационно-экономические. Выбор тех или иных мероприятий рационализации теплоэнергетических систем коммунального комплекса определяется конкретным состоянием сетей и потребителей, и в каждом конкретном случае определяется после проведения экспресс-аудита комплекса с составлением предварительного энергетического баланса. [c.46]

С помощью перорального введения аттенуированных штаммов Salmonella можно осуществлять доставку в организм хозяина многих бактериальных, вирусных и паразитарных антигенов. Большую роль при этом играет выбор промотора, контролирующего транскрипцию чужеродного гена. Если используется слишком сильный промотор, может возникнуть метаболическая перегрузка , сдерживающая пролиферацию бактерий. В отличие от ферментера, организм жи-вотного-хозяина не является замкнутой системой, и экспрессию чужеродного гена нельзя регулировать изменением температуры или добавлением специфических метаболитов. Регуля- [c.243]

Ген, экспрессирующийся во всех трех клонах, должен быть локализован на хромосоме 1 экспрессия другого гена только в клонах В и С будет означать, что он локализован в хромосоме 2, и т. д. Для создания оптимальной системы тестирования хромосомной локализации генов, выбирают клоны, содержащие только половину от общего количества тестируемых хромосом. При этом выбор клонов осуществляется таким образом, чтобы лишь половина хромосом второго клона совпадала с хромосомами первого и т. д. При таком принципе подбора клонов их минимальное количество (с), необходимое для локализации генов на той или иной из п хромосом, будет определяться из соотношения 2 > п. В рассмотренном примере 2 = 8. [c.291]

Приборное оснащение. Схема оснащения цикла измельчения приборами контроля и регулирования приведена на рис. 13.10. В 1971 г. на обогатительной фабрике НБХК была установлена ЭВМ РОР-11/20 фирмы Диджител эквнп.мент корпорейшен для работы в качестве специализированного. процессора при обработке данных экспресс-анализа на потоке и для машинного управления технологическим процессом. Используется язык высокого уровня ФОКАЛ. ЭВМ имеет память 12 К, 32 аналого-цифровых канала для опроса технологических измерений, 12 цифро-аналоговых каналов для осуществления функций управления и 48 цифровых каналов ввода/вывода, которые используются для считывания результирующих данных экспресс-анализа на потоке и сигнализации. При выборе. первоочередного объекта в целях создания комплексной системы управления обогатительной фабрикой предпочтение было отдано циклу измельчения. Разработанная стратегия управления использовала имеющиеся анало- [c.282]

В целом, введение аффинных меток в виде обсуждавшихся выше пептидных и полипептидных последовательностей существенно облегчает очистку меченых таким образом рекомбинантных белков, а также предоставляет дополнительные возможности наблюдать за эффективностью экспрессии рекомбинантных генов. Выбор для этих целей системы очистки зависит от конкретного белка, который предстоит получать в очищенном состоянии, а также от целей его дальнейшего использования. В ряде современных систем в рекомбинантные белки вводится двойная аффинная метка, одна из которых служит для очистки белка, а другая - для мониторинга за его биосинтезом. Также с помощью двойной метки может быть достигнута большая степень очистки рекомбинантных белков. Разработаны множественные аффинные аминокислотные последовательности, которые включают в себя кальмодулин-связывающий пептид, специфический сайт расщепления протеиназой и белок А для иммобилизации всей рекомбинантной конструкции. С помощью этих систем удается изучать белок-белковые взаимодействия путем выделения соответствующих белковых комплексов при исследованиях протеома [183, 184]. Методы иммобилизации белков с помощью аффинных последовательностей используются при создании пептидных и белковых микрочипов, клонотек на их основе, для адресной доставки белков и во многих других приложениях. О некоторых из них будет дополнительно рассказано в разделе П.3.2. [c.132]

Однако не всегда при успешной экспрессии чужеродного гена можно получить функционально активный продукт. Дело в том, что многие эукариотические белки активируются только после их модификации (например, после протеолиза, гликозилирования, фосфорилирования и т. п.), происходящей в результате действия специфических клеточных ферментов. Но чужеродные белки могут неправильно модифицироваться или не модифицироваться вообще. Это ограничивает выбор реципиентных клеток, когда нужно получить активные модифицированные белки. В таких случаях для клонирования генов приходится использовать клетки орга низмов, родственных тем, откуда были взяты гены. С этой целью разрабатываются системы клонирования и экспрессии генов в различных семействах бактерий и низших грибов, в растительных и животных клетках ( Транскрипция и трансляция. Методы , 1987 Maximizing gene expression , 1986). [c.314]

Реакцию синтеза ДНК с участием ДНК-полимеразы (например в ПЦР) часто называют самовоспроизведением ДНК, а молекулу ДНК — единственной самовос-производящейся молекулой. В действительности самовоспроизведение — свойство гораздо более сложных систем. В самом деле, в репликации ДНК обязательно участие ДНК-полимеразы, причем этот фермент не только катализирует образование 3, 5 -фосфодиэфирной связи, но и определяет, наряду с ДНК-матрицей, правильный выбор очередного нуклеотида. Иначе говоря, ДНК не сама воспроизводится, а синтезируется аппаратом, содержащим ДНК-матрицу и белок ДНК-полимеразу. И эта двухкомпонетная система не самовоспроизводится, поскольку количество ДНК-полимеразы не увеличивается (наоборот — уменьшается в результате денатурации соответственно убывает скорость репликации). Для того, чтобы эта система самовоспроизводилась, ьгужен механизм синтеза ДНК-полимеразы. А для этого требуется наличие гена ДНК-полимеразы в ДНК-матрице, и еще множества генов, кодирующих белки, необходимые для экспрессии (транскрипции и трансляции) всех этих генов. Колоссальное усложнение системы Однако и это далеко не все. Многие вещества, необходимые для самовоспроизведения, нестабильны, и в пище практически отсутствуют, например ьгуклеозидтрифосфаты), следовательно должны быть механизмы их образования в самой системе, т. е. нужен метаболизм. А это значит, что требуется еще много генов и соответствующих белков. [c.188]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология