Хроматографический анализ аминокислот

Хроматографический анализ аминокислот [c.20]

Хроматографический анализ аминокислот, выделяемых с мочей [250]. [c.219]

Для колоночной хроматографии аминокислот на крахмале, являющейся количественным методом анализа, необходимо было разработать новое лабораторное оборудование. При переходе к хроматографии на ионитах эта аппаратура претерпела дальнейшую модификацию и в настоящее время стала обычной принадлежностью биохимических лабораторий. Хроматографический анализ аминокислот проводят обычно в тех же условиях, что и на аминокислотном анализаторе. Единственное отличие состоит в том, что элюат собирают по фракциям при помощи хроматографического коллектора, а полученные фракции обрабатывают вручную. Если все операции должным образом механизировать, то анализ будет занимать столько же времени, что и на аминокислотном анализаторе. В целом эта процедура является все же более трудоемкой, но в отличие от аминокислотного анализатора здесь нет необходимости добиваться стабильности и согласованности работы всех систем, поскольку весь процесс стандартизован по лейцину. Наконец, что не менее важно, в случае выполнения небольшой серии анализов стоимость одного анализа здесь намного ниже. [c.307]

Существует два основных метода, пригодных для хроматографического анализа аминокислот. Один метод предназначен для анализа аминокислот белковых гидролизатов, другой — для анализа физиологических жидкостей. Описание этих методов приведено ниже. [c.33]

Эта цветная реакция с успехом применяется при хроматографическом анализе аминокислот на бумаге (стр. 247). [c.241]

Газо-хроматографический анализ аминокислот..............257 [c.240]

Очевидно, что для проведения газо-хроматографического анализа аминокислот в форме их летучих производных необходима количественная конверсия аминокислот. Среди аминокислот имеются [c.253]

Следует отметить, что введение в анализируемую смесь аминокислот точного количества какой-либо известной аминокислоты в качестве внутреннего стандарта приводит к значительному снижению ошибки количественных определений, связанной с несколько различной реакционной способностью аминокислот разных классов при их конверсии в летучие производные, и лишь в некоторых случаях ошибка газо-хроматографического анализа аминокислот превышает 10% [48]. [c.267]

Состав цитратных буферных растворов и типы ионитов, применяемые в хроматографических анализах аминокислот, [c.307]

Газо-хроматографический анализ аминокислот.....<. . 257 [c.240]

Специфика хроматографического анализа аминокислот определяется особенностями этой группы сорбатов, в которую входят представители, сильно различающиеся по кислотно-основным свойствам и УФ-спектрам. Работы этого класса можно выполнять различными методами, используя либо стандартную аппаратуру для ВЭЖХ, либо специализированные приборы — аминокислотные анализаторы. Выбор оптимального варианта диктуется характером аналитической задачи необходимой чувствительностью, наличием в образце веществ других классов, присутствием лишь нескольких аминокислот, либо всего набора белковых аминокислот. [c.328]

Пептиды, подобно аминокислотам, как правило, гидрофильны. Поэтому методика хроматографического анализа аминокислот в тонком слое в принципе применима также к пептидам. Эта аналогия справедлива в определенных пределах. Б случае высших пептидов на растворимость и адсорбцию оказывает влияние число, природа и последовательность аминокислотных остатков и поэтому в данном случае следует работать при других условиях опыта или даже перейти к другим методам разделения. Пептиды с защищенными функциональнцми группами (синтез промежуточных продуктов) менее гидрофильны, чем пептиды без защитных групп. [c.408]

Несколькими исследователями разработаны ускоренные методы хроматографического анализа аминокислот не только для обнаружения многих врожденных дефектов метаболизма, о которых упоминалось выше, но и для быстрого анализа многих аминокислот физиологических жидкостей. Так, Льюис [79] использовал короткую ионообменную колонку для определения метионина и цистина. Для разделения при комнатной температуре была использована колонка размером 40X1.5 см, заполненная смолой зеокарб-225 (>200 меш) пробу предварительно окисляли. При скорости течения буферного раствора 200 мл/ч цистеиновая кислота элюируется при объеме элюата 36—40 мл. [c.13]

При хроматографическом анализе аминокислот (см. стр. 35) большое применение нашла реакция с нингидрином. Нингидрин дает окрашивание (обычно сине-фиолетовое) со всеми аминокислотами. На основе нингидриновой реакции разработаны методы количественного определения аминокислот, входящих в состав белков. [c.32]

Рис. 4. Хроматографический анализ аминокислот по Спекману, Штейну и Муру [5].

Предпринимались также попытки проведения полного анализа аминокислот на одной колонке, что сокращало время анализа и, кроме того, уменьшало количество анализируемого продукта. В этом направлении наибольших успехов достиг Гамильтон с сотрудниками [2, 22], которому удалось на основе теоретического исследования процесса элютивной хроматографии аминокислот предложить разделительные колонки высокого разрешения. Ниже мы кратко из.иагаем работу Гамильтона, Богю и Андерсона [31], посвященную теории элютивного хроматографического анализа аминокислот. Вводится понятие коэффициента разделения Кл соседних пиков аминокислот а и и, поскольку форма пиков при элютивной хроматографии имеет гауссову форму, этот коэффициент может быть записан следующим образом [c.152]

Микрохарактеристики колонки практически не зависят от ее макрохарактеристик. Поэтому подбор оптимальных условий хроматографического анализа аминокислот следует начинать с подбора микрохарактеристик. Варьируя ионную силу, pH раствора, [c.155]

При выборе условий хроматографического разделения эфиров К-ТФА-аминокислот следует иметь в виду, что ТФА-аминокислоты обладают кислыми свойствами и ведут себя подобно обычным карбоновым кислотам. В связи с этим, как правило, хроматографический анализ аминокислот в виде К-ТФА-эфиров проводят на колонках с стационарными фазами полярного типа или значительно реже с малополярными силиконовыми или аниезоновыми [c.264]

Бенсон и Паттерсон [15] описали методику быстрого хроматографического анализа аминокислот, входящих в состав физиологических жидкостей. Они использовали гранулированные иониты и иониты со сферическими зернами и вели анализ по слегка модифицированному варианту двухколоночной методики Спакмана и сотр. [186] с применением аминокислотного анализатора Be kman Spin o Model 120 С (см. гл. 8). Позднее Бенсон и сотр. [14] приспособили эту методику для анализа соединений нейтрального и кислотного характера в присутствии литиевых буферных растворов, которые обеспечивают хорошее разделение глутамина и аспарагина. Авторы работы [15] применили эту методику для разделения соединений основного характера, а авторы [14]—для разделения соединений с нейтральными и кислотными свойствами. В обоих случаях применялись иониты со сферическими частицами и нингидриновый реагент [186]. [c.306]

Дальнейшее усовершенствование методики газо-хроматографического анализа аминокислот связано с нримепением в качестве летучих производных К-трифторацетилированных эфиров (М-ТФА). Перспективность их использования и преимущество по сравнению с соответствующими эфирами К-ацетиламинокислот в значительной мере определяется высокой летучестью трифторацетилированных соединений и более полной количественной конверсией в них аминокислот. [c.264]

Исследование строения белков — работа крайне трудоемкая, поэтому в этой области необходимо ввести элементы автоматизации. Автоматическая самопишущая установка для хроматографического анализа аминокислот была сконструирована в 1956. г. Спекманом [c.82]

Хроматографический анализ аминокислот, входящих в состав белка, занимает всего два-три дня, и поэтому в течение 10—15 лет, прошедших с того времени, как такой анализ стал производиться, накоплено довольно много сведений об аминокислотном составе самых разнообразных белков. Конечно, как и следовало ожидать, количество аминокислот в них оказалось разным. Некоторые белки состоят всего из нескольких аминокислот. Поэтому их с большим правом называют не белками, а пептидами. Большинство же белков содержат несколько сот аминокислот. Причем пропорция содержания каждой амп1юкнслоты в разных белках, как выяснилось, разная. Таким образом, удалось сделать полный анализ аминокислотного состава белковой молекулы, то есть произвести ее полную разборку. [c.43]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология