Феназинметасульфат

Медиаторный механизм транспорта электрона достаточно широко используется для проведения электрохимических ферментативных реакций. В работе 45] описан электрохимический процесс с участием лактатдегидрогеназы, флавинмононуклео-тида и феназинметасульфата в качестве медиаторов в работе i[12] проанализирована электрохимическая ионизация водорода на угольных электродах, катализируемая гидрогеназой в работе 47] исследованы эффекты ускорения ионизации кислорода в системе пероксидаза — ионы металла — гидрохинон — пи-рографитовый электрод. [c.76]

Синтетический краситель феназинметасульфат представляет собой наиболее активный акцептор водорода для растворимого фермента. Недавно осуществленная очистка фермента в значительной степени удалась потому, что для определения его активности выбрали именно этот краситель. [c.191]

Неоднократно было обнаружено, что феназинметасульфат служит наиболее эффективным акцептором водорода для флавопротеид-ных дегидрогеназ. Сукцинатдегидрогеназа тесно связана с митохондриальными мембранами, но она была переведена в растворимое состояние и получена в чистом виде из митохондрий сердца быка. Очищенные препараты содержали двухвалентное железо и 1 моль флавина на 1 моль белка. По-видимому, флавин связан с белком ковалентными связями. Сравнительно недавно из митохондрий растений были получены препараты растворимой сукцииатдегидро-геназы [14]. [c.191]

Кроме ФМН и витамина Кз, существует ряд других переносчиков водорода, катализирующих циклическое фотосинтетическое фосфорилирование. Наибольшая скорость фосфорилирования наблюдалась при использовании искусственного переносчика водорода — феназинметасульфата (ФМС). Активность ФМС, возможно, обусловлена его фотохимическим превращением в пиоцианин в присутствии кислорода. Высокая скорость циклического фотосинтетического фосфорилирования в присутствии ФМС является, вероятно, след- [c.265]

Для растворенного фермента лишь феназинметасульфат (N-метилфена-зинийметасульфат) и феррицианид калия представляют практический интерес как акцепторы электронов. Реакция (XIV.6) легко обратима и обеспечивает полное восстановление фумарата до сукцината, если используемый краситель обладает достаточно низким окислительно-восстановительным потенциалом (восстановленный ФМН, виологеновые красители и т. п.), даюш им возможность реакциям (XIV.66) и (XIV.6b) протекать справа налево. [c.356]

LDH-коллагеновую мембрану (LDH — лактатдегидрогеназа) получали по методу Карубе [484] из коллагеновой волокнистой суспензии. Эту суспензию обрабатывают пепсином, чтобы разрущить ( разварить ) волокна и получить почти прозрачную жидкость, и после этого добавляют LDH. Анод, покрытый коллагеновой мембраной с LDH, погружают в раствор глутарового альдегида, а затем промывают дистиллированной водой. В качестве электроактивного вещества был выбран флавинмононуклеотид (FMN), который окисляет NADH в NAD (были испытаны и другие электроактивные вещества, например тиогликолевая кислота, метилвиологен, феназинметасульфат, однако FMN оказался наиболее удобным). Восстановленный FMN (FMN/H ) окисляется на аноде, так что ток окисления измерить легко. [c.167]

Наличие двух участков сопряжения у бактерий доказывается тем, что при использовании в качестве разобщителя валиномицина наблюдается снижение интенсивности образования АТФ в два раза. В то же время добавление в этих условиях феназинметасульфата (ФМС) предотвращает снижение интенсивности фотофосфорилирования. В последнем случае число участков сопряжения уменьшается, так как ФМС накоротко замыкает электронтранспортную цепь, но скорость оборота элект ронов по циклу повышается, так как обходятся наиболее медленные участки электронтранспортной [c.188]

При изучении циклического фосфорилирования используют, как правило, различные добавки — доноры и акцепторы электронов (феназинметасульфат, витамин Кз, 2,6-дихлорфенолиндофенол), которые могут включаться в цикл и облегчать движение электрона. Циклическое фосфорилирование не нарушается моноуроном и диуроном — ингибиторами электронного транспорта фотосистемы I. Спектр его действия имеет максимум при 710 нм. Это еще раз указывает на непосредственную связь циклического фосфорилирования с фотосистемой I. [c.84]

С электронными потоками в пределах фотосистемы I связан еще один тип фотофосфорилирования — псевдо-циклический. Псевдоциклическое фотофосфорилирование можно рассматривать как химический зашунтированный нециклический процесс. Он активируется такими катализаторами, как феназинметасульфат, флавинмононукле-отид, витамин Кз- В противоположность циклическому псевдоциклическое фосфорилирование подавляется диуроном и требует присутствия кислорода, который вовлекается, по-видимому, в цепь окислительно-восстановительных превращений. [c.84]

В основе тетразолиевого метода выявления локализации ферментов в гелях лежит образование нерастворимых хромогенных веществ — формазанов. Схематически их образование может быть представлено последовательностью реакций NADH + феназинметасульфат (ФМС) ФМС [c.272]

В пробы (конечный объем 4 мл) вносят 0,3 мл буферного раствора, а затем последовательно по 0,2 мл растворов сукцината натрия, феназинметасульфата, цианида калия и 2,6-дихлорфенолиндофенола. Последний вносят в пробы примерно за 10 мин до определения активности фермента. Не следует заблаговременно смешивать растворы сукцината, феназинметасульфата и 2,6-дихлорфенолиндофенола, так как может произойти. неферментативное восстановление последнего. Содержимое пробирки перемешивают и инкубируют в водяной баНе [c.45]

Быстродействующий рН-электрод. Для определения быстродействия рН-электродов используется фотохимический метод, предложенный С. Фаулером и Б. Коком (1976). В нем применяется индуцируемая светом реакция подкисления, протекающая в инкубационной среде, содержащей 200 мкМ феназинметасульфата (ФМС) и 1 мМ окисленного цитохрома с, [c.182]

Метод I. Ход работы. Один из методов определения сук-цинатдегйдрогеназной активности основан на измерении снижения оптической плотности (при % = 600 нм) 2,6-дих-лорфенолиндофенола (ДХФИФ), восстанавливающегося в присутствии феназинметасульфата (ФМС) при ферментативном окислении сукцината (рис. 91). [c.250]

В пробирки (конечный объем — 4 мл) вносят определенные объемы растворов буфера, ЭДТА, сукцината натрия, цианида калия или азида натрия, ДХФИФ, 0,1—0,2 мг белка в 0,1—0,2 мл и перемещивают. Не следует заблаговременно смешивать растворы сукцината, феназинметасульфата и ДХФИФ, так как может произойти неферментативное восстановление последнего. Инкубационная среда должна содержать такие компоненты 10 мМ фосфатного буфера (рН=7,4) 10 мМ раствор сукцината калия 0,1 мМ раствор ЭДТА 1 мМ азида натрия 0,05 мМ раствор 2,6-дихлорфенолиндофенола 0,1—0,2 мг белка (рекомендуется к раствору белка добавить тритон Х-100 до концентрации 1 % для разрушения митохондрий и доступности субстрата для фермента). [c.250]

Разработка методов иммобилизации клеток этой бактерии в полиакриламидный гель (ПААГ), в мембраны из поливинилового спирта и адсорбция ее на целлюлозе позволила повысить эффективность метода трансформации стероидов. Для иммобилизации в ПААГ культуру выращивали описанным выше способом, отделяли центрифугированием, отмывали фосфатным буфером. Система для полимеризации состояла из 10 %-ного полиакриламидного геля с 0,5 %-ным относительным содержанием сшивающего агента метиленбисакриламида и катализаторов тетраметил-этилендиамина (ТЕМЕД) и персульфата аммония. Акриламид перекристаллизовывали перед употреблением из хлороформа. В сосуд для полимеризации помещали 6 мл клеточной суспензии, содержащей 0,1—0,6 г биомассы, смесь 1,90 г акриламида с 0,10 г метиленбисакриламида в 11 мл воды, 3 капли ТЕМЕД а и 15 мг персульфата в 3 мл воды. Общий объем 20 мл. Полимеризацию мономера проводили при температуре 10—12 °С в атмосфере азота в течение 2—15 мин. Полученный блок геля механически фрагментировали, продавливая через сито 20—30 меш, промывали физиологическим раствором до исчезновения невключившихся клеток (4—5 л). Полученные гранулы помещали в термостатируемую колонку (1X28 см). Реакционная смесь, пропускаемая через колонку, содержала 0,1 г/л гидрокортизона в фосфатном буфере (pH 7,0), скорость потока через колонку 1,3 мл/ч на 1 мл геля (ЗУ), акцептор водорода — феназинметасульфат--добавляли в концентрации 0,1 г/л с момента трансформации, температура 20—22 °С. Выделение стероидов и определение активности проводили по методике, описанной выше. При таких условиях [c.545]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология