анализ аминокислот автоматизация

В хроматографии пептидов, как и в хроматографии кислот, наблюдается тенденция к автоматизации анализа. Лишь в редких случаях такой анализ ведут с целью полного разделения смеси пептидов и их идентификации. В принципе подобный анализ можно вести так же, как и анализ аминокислот, т. е. путем повышения эффективности колонки и чувствительности обнаружения. Окрашенные продукты, образующиеся в результате обработки элюата нингидрином, характеризуются малым по- [c.312]

По разделению и определению производных аминокислот методом ГЖХ проведено сравнительно мало работ, несмотря на очевидные преимущества этого метода. В настоящее время широко применяют методы хроматографии на бумаге и ионного обмена, но они не имеют достоинств, присущих методу ГЖХ, таких, как быстрота, доступность автоматизации процесса или возможность разделения близких по свойствам компонентов. Так, для разделения лейцинов методом хроматографии на бумаге необходимы специальные растворители, а полный анализ гидролизата белка. методом ионного обмена, по Муру и Штейну, занимает 22 час и требует специального оборудования, применяемого в основном только для данного метода. Тех же результатов [c.528]

Способы получения требуемых последовательностей нуклеотидов из клонотек генов можно разделить на три группы. При использовании первой группы методов рекомбинантные бактерии или фаговые частицы исследуют на присутствие в них искомых последовательностей нуклеотидов путем последовательного перебора случайных клонов. При таком подходе, получившем название скрининга, творческие усилия исследователя направлены только на облегчение самого процесса анализа клонов, например, на его автоматизацию. Во втором случае, присутствие нужных последовательностей обнаруживают косвенно, по появлению в бактериальных клетках или фаговых лизатах бляшек продуктов экспрессии искомых генов - РНК, белков или ферментативной активности, т.е. определенного фенотипа, который отличает такие клоны от соседних, не содержащих соответствующих последовательностей. В этом случае исследователь среди большого количества суммарных клонов осуществляет выбор тех, которые резко отличаются от соседних по своему фенотипу, например, цвету колоний. При таком подходе производится выбор требуемого фенотипа среди большого числа других фенотипов. Реализация третьего подхода требует создания селективных условий, при которых преимущество в размножении получают те клоны, которые отвечают требованиям отбора, например, приобрели способность к росту на селективных питательных средах в присутствии антибиотика или в отсутствие аминокислоты в случае исходно ауксотрофного штамма. Последний подход, кроме своего необыкновенного изящества в замысле, демонстрирует самую высокую эффективность, так как позволяет в одно касание освободиться от всех нежелательных примесей в виде ненужных клонов. [c.162]

При современных скоростных методах анализа аминокислот и большом числе проб, в которых нуждаются многие исследователи, для сокращения времени, затрачиваемого на ввод пробы и расчет результатов анализа, необходима автоматизация или по крайней мере упрощение некоторых из этих операций. Гибкость хроматографических систем допускает различную автоматизацию. По некоторым методикам анализ проводят при одной температуре и с использованием только одного буфера в этом случае анализ может быть заверщен за 18 мин (например, анализ тирозина и фенилаланина см. разд. 1.6.7). Для таких анализов многие автоматические операции не требуются однако для облегчения работы удобно иметь автоматический ввод проб. [c.31]

С введением газожидкостной хроматографии (ГЖХ) в качестве метода анализа аминокислот, пептидов и родственных соединений значительно возросли возможности новых достижений в области пептидной химии. Значительные усилия были направлены на развитие аминокислотного анализа методом ГЖХ, для чего исследовались различные типы производных. Однако в количественном анализе всем ГЖХ методам приходилось конкурировать с хорошо разработанными методами ионнообменной хроматографии, отличающимися высокой степенью автоматизации, точности и даже скорости анализа (например, метод ли-гандного анализа). По этой причине ГЖХ аминокислот в последние годы нашла практическое применение в большей мере для некоторых специальных задач, где она могла даже превосходить другие хроматографические методы, а не для количественного определения аминокислот в сложных смесях. Однако теперь ГЖХ можно использовать в качестве дополнительного метода и для этой цели благодаря аналитическому подходу, разработанному главным образом Герке и сотр. [1]. [c.142]

Хотя автоматизация ионообменного разделения и колориметри- ческих измерений сильно уменьшила затраты труда при анализе аминокислот и увеличила производительность аналитической аппаратуры по сравнению с ручными методами, обработка результатов долгое время все еще выполнялась вручную. Измерялась площадь каждого аминокислотного пика, и с помощью стандартных добавок рассчитывался коэффициент пересчета для определения концентрации каждого компонента. В случае многокомпонентного анализа эта операция становится длительной и трудоемкой. Поэтому автоматические методы обработки данных привлекли внимание нескольких групп исследователей. [c.297]

Исследование строения белков — работа крайне трудоемкая, поэтому в этой области необходимо ввести элементы автоматизации. Автоматическая самопишущая установка для хроматографического анализа аминокислот была сконструирована в 1956. г. Спекманом [c.82]

Интерес к ВЭЖХ обусловлен такими достоинствами метода, как универсальность, возможность автоматизации разделения и анализа сложных смесей органических и неорганических веществ, экспрессность, эффективность и высокая чувствительность. Интенсивно развиваются все варианты ВЭЖХ, области применения их разнообразны (табл. 8.4). Метод адсорбционной ВЭЖХ, как и газовая хроматофафия, — это серийный метод определения органических соединений многих классов, его широко используют при анализе смесей аминокислот, бежов, лекарственных препаратов. [c.326]

По скорости и эффективности хроматография аминокислот уже начала превосходить классические системы детектирования, и дальнейшее усовершенствование анализаторов продолжалось на основе более глубокого изучения кинетики реакции аминокислот с нингидрином и отработки конструкции реактора и колориметра [7, 16, 17]. В результате удалось еще более повысить разрешение и чувствительность анализа. Время одного анализа составляло уже менее 8 ч, и, следовательно, появилась возможность увеличить эффективность за счет круглосуточной работы прибора. Большинство операций уже осуществлялось в автоматическом режиме, однако для полной автоматизации необходимо было иметь блок ввода образцов (автосамплер). Первая модель устройства с одной петлей для ручного ввода образца уже была разработана [18], поэтому не составляло труда преобразовать ее в блок для автоматического ввода большого числа образцов. В дальнейшем для этих целей были созданы специальные патроны [19]. Теперь рабочая программа, заложенная в программирующее устройство, стала включать и управление автосамплером. Высокая эффективность прибора потребовала включения в систему интегратора или ЭВМ для автоматического обсчета результатов анализа. В последующих разделах дано описание неавтоматического базового анализатора и анализатора Te hni on, а затем совсем коротко приведены основные характеристики современных аминокислотных анализаторов. [c.316]

Хотя приведенные выше рассуждения по поводу относительных достоинств и ограничений дискретного и непрерывного методов носят общий характер, все же они будут иметь значение при определении подхода к решению новой проблемьи Два рассмотренных метода автоматического анализа не являются взаимно исключающими. Например, в некоторых промышленных автоматических анализаторах аминокислот используют непрерывное ионообменное разделение с последующим раздельным анализом фракций элюата колонки. Как подчеркнуто ранее, именно химия метода анализа определяет его инструментальное оформление при автоматизации. Только в относительно немногих случаях, в частности в клиническом анализе, выбор аппаратуры оптимизирован. Во многих других случаях, хотя проблеме автоматического анализа и посвящено множество статей, эта проблема находится еще в зачаточном состоянии. Вот почему всесторонний подход к автоматизации с привлечением различных областей науки и техники рассматривается как наиболее верный способ нахождения ответа на первостепенный жизненно важный вопрос как следует подходить к новой проблеме автоматического анализа [c.23]

Автоматизация анализа флуорогенных соединений предъявляет повышенные требования к их устойчивости, которым uq удовлетворяют аддукты ОФА-меркаптоэтаноламинокислоты. Более длинный период полупревращения имеют ОФА-этантиоль-ные производные. Хотя падение интенсивности флуоресценции на 20—50%) за 6—8 ч наблюдается и у этих соединений [342], процесс их синтеза и последующего разделения в автоматическом варианте был опробован при исследовании аминокислот плазмы [111]. [c.280]