Самотушение флуоресценции хлорофилла

Это уменьшение могло быть вызвано, например, полимеризацией хлорофилла с последуюш,им ускоренным рассеянием энергии. Другая, возможность состоит в рассеянии энергии в результате столкновений возбужденных и нормальных молекул хлорофилла СЫ -j- СЫ -> 2СЫ. Самотушение флуоресценции хлорофилла [115] указывает, что имеют место либо один, либо оба указанных цроцесса. [c.526]

Самотушение. Флуоресценция хлорофилла в коллоидах и адсорбатах [c.182]

Из всех этих наблюдений становится ясным, что липофильные молекулы могут предохранять флуоресценцию хлорофилла от самотушения даже без разбавления пигмента и без нарушения связи хлорофилла с белком или хлорофилла с целлюлозой. [c.187]

Самотушение флуоресценции в растворах хлорофилла исследовалось Вейль-Мальербом и Вейссом [69]. Они нашли, что при постоянной интенсивности освещения интенсивность флуоресценции в растворе этилхлорофиллида в этаноле возрастает при увеличении концентрации от 1 10 до 1 10-5 моль л, это происходит вследствие возрастания поглощения. Последнее становится практически полным при концентрациях, превышающих 1 10- моль/л. При дальнейшем увеличении концентрации интенсивность флуоресценции не остается постоянной, а быстро спадает, уменьшаясь при 1 10 моль/л до 7б своего максимального значения. Между [СЫ] = 2-10-6 и [c.182]

Справедливость диффузионного уравнения Дебая [231] (в форме Бэкст-рема — Сандроса [232], разд. 6-7А-6) была подтверждена экспериментально для самотушения флуоресценции растворов углеводородов [229, 230 . Относительно переноса энергии авторы этих работ делают существенное замечание о том, что опытные значения констант скорости самотушения не превышают вычисленные по уравнению Дебая, тогда как наблюдаемые константы скорости сенсибилизации флуоресценции путем переноса энергии превышают рассчитанные максимальные значения в 15—30 раз (в зависимости от растворителя и конкретной пары донор — акцептор). Таким образом, обмен энергией между разными ароматическими углеводородами не является диффузионным процессом, хотя Самотушение растворов этих углеводородов, по-видимому, есть результат лимитируемых диффузией бимолекулярных реакций . Однако, как отмечают авторы, последнюю точку зрения нельзя обобщать, так как самотушение в растворах хлорофилла подчиняется скорее квадратично , чем линейной, зависимости от концентрации и не зависит от вязкости растворителя 1230]. [c.271]

Если мы отнесем отсутствие флуоресценции твердого, коллоидного и адсорбированного хлорофилла за счет самотушения и будем считать его следствием плотной упаковки, то восстановление флуоресценции под действием некоторых защитных веществ может быть приписано или простому разбавлению пигмента, или нарушению взаимодействия между соседними молекулами пигмента. Среди соединений, которые, по имеющимся сведениям, обладают такой защитной способностью, мы встречаемся прежде всего со всеми липоидами и липофильными растворителями. Штерн [6], например, нашел, что все хлорофилл-липоидные эмульсии в воде флуоресцируют, тогда как чистый водный хлорофилловый золь не флуоресцирует. Флуоресценция коллоидов хлорофилла в присутствии лецитина описана Бэке-ром [24]. Это может быть связано либо с истинным проявлением защитного действия, либо просто с эффектом разбавления, так как концентрация молекул хлорофилла в каплях липоида может быть ниже, чем в частицах гидрозоля. [c.186]

Как уже отмечалось в данной главе, два наиболее распространенных механизма химического тушения представляют собой окислительновосстановительные процессы [см. уравнение (23.1)] и образование комплексов [ем. уравнение (23.2)]. Последнее особенно вероятно в тех случаях, когда тушителем является другой краситель с перекрывающейся полосой поглощения, так что условия близки к самотушению. При этом постоянная связь тушителя с флуоресцирующей молекулой также, повидимому, может иметь место (аналогично постоянной димеризации, рассмотренной на стр. 170). Изучение влияния тушителя на спектр поглощения флуоресцирующего вещества и зависимости тушения от концентрации тушителя может помочь отличить тушение вследствие комплексообразования от тушения, происходящего при кинетических встречах однако в настоящее время для растворов хлорофилла таких данных очень мало. Наконец, по аналогии с вышеописанным механизмом самотушения (стр. 168), должна существовать еще одна возможность тушения, когда тушитель находится в резонансе с флуоресцирующей молекулой — слзгчай тушения без образования комплекса и без кинетических соударений. Тушение будет происходить путем передачи энергии возбуждения на расстояния, значительно большие, чем диаметры соударения. Если молекулы тушителя не флуоресцируют, то они будут служить ловушками так же, как это было постулировано Фёрстером для димеров. Вавилов и его сотрудники [75, 87, 88] нашли соответствующие примеры этого типа тушения флуоресценции красителей другими нефлуоресцирующими веществами, способными к резонансу с ними. Однако сильные тушители, перечисленные в табл. 30, обязаны своей эффективностью, конечно, не резонансному механизму передачи. Все они являются окислителями, и это указывает скорее на химическое взаимодействие, нежели на физический перенос энергии. Кроме того, они не имеют полос поглощения в красной области спектра и поэтому не могут находиться в резонансе с возбужденными молекулами хлорофилла. Их самые низкие возбужденные уровни должны лежать значительно выше флуоресцентного уровня А хлорофилла. [c.188]

Вейль-Мальерб и Вейсс [69] предположили, что отсутствие тушащего действия у изоамиламина можно объяснить самотушением, без допущения длительных активных состояний. Выше мы отмечали, что большая эффективность самотушения, найденная этими исследователями, оказалась ошибочной и была обусловлена реабсорбцией. Однако если бы она даже и была так высока, как они предполагали, то это не должно было бы мешать сенсибилизаций конкурировать с флуоресценцией. Если в отсутствие субстрата сенсибилизации 90°/о возбужденных молекул хлорофилла испытывают самотушение при встречах с невозбужденными молекулами хлорофилла ( hP-j- hl) и 10% испускают флуоресценцию, то добавление субстрата, который окисляется с квантовым выходом в 50%, должно понизить и самотушение и флуоресценцию в одной и той же пропорции, т. е. до 45 и 5% соответственно. [c.201]

Количественный анализ. Флуориметрия широко применяется Б биохимических исследованиях благодаря своей высокой точности, чувствительности и воспроизводимости получаемых результатов. Это особенно важно при работе с малыми количествами вещества, когда спектрофотометрия не дает надежных результатов. В качестве примера можно привести количественное исследование витамина Bi в пищевых продуктах, НАД-Н в митохондриях и микроорганизмах при различных метаболических условиях, АТФ, хлорофилла и кортикостероидов. Использование внутренних стандартов, т. е. H3iiiepeHHe флуоресценции неизвестных количеств чистого вещества до и после добавления определенного количества стандартного образца, позволяет исследовать как самотушение, так и тушение флуоресценции примесями. [c.161]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология