Бензидин гемоглобина

Добавляют равный объем раствора бензидина и несколько капель перекиси водорода. При положительной реакции наблюдают появление синего или зеленого окрашивания продуктов окисления бензидина с помощью кровяного пигмента за счет кислорода перекиси водорода (стр. 236). При продолжительном стоянии мочи гемоглобин переходит в метгемоглобин и обнаружить кровь бензидиновой реакцией не удается. [c.295]

Выполнение анализа. На фильтровальную бумагу (или капельную пластинку) наносят каплю мочи, а на полученное пятно — каплю перекиси водорода и каплю раствора бензидина. В присутствии крови появляется синее окрашивание (гемоглобин, гемин), устойчивое в течение примерно 1 часа. При малом содержании крови окрашивание появляется только через 30— 60 сек. В контрольном опыте (дестиллированная вода) появляется бурое окрашивание. При очень малом содержании крови для повышения чувствительности реакции перед нанесением капли мочи наносят каплю раствора щелочи. [c.493]

Гемоглобин крови обладает активностью пероксидазы и каталитически ускоряет окисление бензидина перекисью водорода в бензидиновую синь. [c.597]

Гемоглобин обладает способностью катализировать окисление бензидина перекисью водорода. Образующиеся при этом продукты окисления бензидина имеют синюю или зеленую окраску. Реакция очень чувствительна и служит для обнаружения небольших количеств крови в биологических жидкостях. [c.444]

Принцип. Метод основан на способности гемоглобина окислять бензидин в присутствии перекиси водорода. [c.62]

Ряд методов позволяет проводить специфическое окрашивание гемоглобина, трансферрина и других железосодержащих белков. Кларк [236] использовал с этой целью реагент, содержавший 0,2 г бензидина и 0,5 мл уксусной кислоты в 100 мл воды. Непосредственно перед употреблением к этому раствору добавляли 0,2 мл 30%-ной перекиси водорода. Через 30 мин появлялись синие полосы, которые при хранении постепенно -бледнели. [c.276]

Для проявления гемоглобиновых зон бензидином полосы после электрофореза помещают в бензидиновый реактив. Перекись водорода добавляют в реактив непосредственно перед проявлением. Окраска развивается в течение 30 Мин. Гемоглобины дают голубую окраску, которая затем переходит в коричневую. Полосы переносят- в воду и затем высушивают между листами фильтровальной бумаги под прессом. Белки, не содержащие гема, бензидиновый реактив не проявляет. [c.244]

НИТРОБЕНЗОЛ СбН. КОг, зеленовато-желтая жидк. пл 5,8°с, 210,8°С ы 1,2082, п° 1,3526 р-римость в воде 0,19%, смешивается с орг. р-рителями ниж. КПВ 1,8%, т-ра самовоспламенения 482°С, 1всп 83°С. Получ. нитрованием бензола смесью НКОз с Н2304. Примен. в произ-ве анилина, аром, азотсодержащих соед. (напр., бензидина, хинолина, азобензола) р-ритель компонент полировальных составов для металлов. Окисляет гемоглобин в метгемоглобин. ПДК 3 мг/м . [c.384]

А. Бах и С. Зубкова выработали методику, которая дает возможность определять содержание пероксидазы в минимальных (0.001 см ) количествах крови. Оксигемоглобин крови, 1 ак известно, обладает способностью окислять в присутствии перекиси водорода целый ряд веществ (гваякол, бензидин, пирогаллол и т. п.). Бах и Зубкова в своем методе исходили, и соответствии с данными литературы, из положения, чтов крови наряду с оксигемоглобином существует также фермеит пероксидаза и что оксигемоглобин в отличие от последней термостабилен. Против этого положения было сделано возражение со стороны Вильштеттера и Нолингера , которые указали, что, согласно их наблюдениям, пероксидазное действие растворов оксигемоглобина после непродолжительного кипячения значительно понижается (приблизительно на /д). Так как это возражение казалось нам веским, мы и решили подробнее изучить вопрос о существовании в крови независимой от гемоглобина пероксидазы. [c.579]

Построение калибровочной кривой. Кровь содержит, например, 16,5 г,% гемоглобина. После тщательного перемешивания берут 0,1 мл крови микропи-петкой и добавляют 16,4 мл дистиллированной воды. Таким образом, получают основной стандартный раствор, который содержит 1 мг гемоглобина в 1 мл (100 мг % раствор). Из основного стандартного раствора последовательно готовят по мере надобности растворы более слабой концентрации (0,5 1 2,5 5 10 20 30 мг%) путем соответствующих разведений дистиллированной водой. Из каждого рабочего раствора берут по 0,04 мл, переносят в пробирки, в которые последовательно добавляют 4 мл ацетатного буфера, 2 мл перекиси водорода и 2 мл бензидина. Состав компенсационного раствора тот же, что и в опытных пробах. [c.63]

Электрофорез на ацетате целлюлозы служит простым и вместе с тем чувствительным способом обнаружения аномальных видов гемоглобина. Наиболее подходящей буферной системой является смесь трис-борная кислота-ЭДТА (pH 8,4) [816, 1141, 1224]. Для качественных анализов можно использовать микрометоды. Электрофореграммы анализируют либо без применения красителей, либо после их окрашивания общими белковыми красителями или с помощью пероксидазы. Последний метод, очевидно, более специфичен, так как выявляет только те белки, которые содержат гем. Шнейдер [1141] рекомендует двукратное окрашивание сначала пунцовым S, а затем раствором бензидина, содержащим нитропруссид натрия (дает синюю окраску). Если при электрофорезе необходимо определить содержание минорного (т. е. имеющегося в незначительном количестве) компонента, например гемоглобина Аг, то наиболее надежный метод состоит в том, что на пленку наносят относительно большое (точно определенное) количество образца, элюируют соответствующие зоны электрофореграммы без ее предварительного окрашивания и проводят фотометрическое измерение [1141]. При денситометрическом сканировании окра- [c.321]

Для локализации комплексов гаптоглобин — гемоглобин in situ по пероксидазной реакции используют бензидин, гваякол. [c.342]

Энгл ер и др. [341] подвергали сыворотки электрофорезу в полиакриламидном геле в системе Орнштейна — Дэвиса [281, 942]. Затем столбики геля помещали на 18 ч в свежеприготовленный 12,5 мкМ раствор гемоглобина лошади. Избыток гемоглобина удаляли промыванием в солевом растворе, а комплексы гантоглобин-гемоглобин окрашивали раствором бензидин-НгОг. [c.343]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология