Пятна на хроматограмме двойные

Существенный недостаток количественных методов анализа тонкослойных хроматограмм, основанных на измерении пропускания света, был связан с нелинейной зависимостью сигнала оптического детектора от количества вещества в хроматографическом пятне. Эта нелинейность обусловлена специфическим законом прохождения света в рассеивающей среде, описываемым уравнением Кубелки — Мунка, и неоднородностью пластины по толщине слоя адсорбента. Последнюю можно учесть, измеряя оптические свойства подложки непосредственно в хроматографическом пятне. Использование двухволнового метода спектрофотометрического детектирования, когда излучение одной волны Л поглощается и веществом, и адсорбентом, а другой волны Лг — только адсорбентом, позволяет выделить сигнал, связанный с поглощением излучения только анализируемым веществом. Дальнейшая обработка сигнала детектора в соответствии с уравнением Кубелки — Мунка позволяет линеаризовать зависимость оптического сигнала от количества вещества в ТСХ. Поглощение света адсорбентом может быть учтено также при спектрофотометрическом сканировании пластины на просвет и отражение. Эти принципы реализованы в лучших современных зарубежных денситометрах — флуориметрах. Менее точным, но более простым решением является линеаризация зависимости сигнал — вещество с помощью двойного логарифмирования (с использованием ЭВМ). В результате этих усовершенствований воспроизводимость результатов в современной количественной ВЭТСХ приближается к 1%. Использование двухкоординатного сканирования в случае эллипсовидных пятен (двумерное размывание зон в ТСХ) и многошагового сканирования пятен неправильной формы (дву- [c.370]

Наиболее часто используют реагент Карра-Прайса (ОР-5), т. е. насыщенный раствор хлорида сурьмы(III) или сурьмы(V) в хлороформе. Этот реагент дает хорошие результаты, особенно при обнаружении А -стероидов, образующих окрашенные пятна, в основном красно-оранжевые. Распространен следующий метод обнаружения хроматограмму выдерживают в атмосфере паров иода или опрыскивают раствором иода в петролейном эфире или водным раствором иодида калия. В последнем случае некоторые стероиды, например холевая кислота, кортизон и др., образуют синие пятна. Соединения с карбонильными группами, особенно сопряженными с двойной связью, можно обнаружить с помощью динитрофенилгидразина (ОР-27). А -З-Кетостероиды можно обнаружить по их флуоресценции после опрыскивания раствором гидроксида натрия и нагревания или, еще лучше, по [c.117]

Очень важна также и техника нанесения вещества на хроматограмму. Меченые соединения следует наносить на пластинку в виде пятна возможно меньших размеров, чтобы избежать получения двойных пиков. На рис. 4.25 приведены примеры результатов, полученных при неправильном выборе условий хроматографирования. [c.122]

Для получения точных результатов нужно иметь на хроматограмме пятна с четко очерченными границами при строго определенной концентрации исследуемого вещества с . Для этого используют двойную последовательную контактную печать в проходящем [c.12]

При. хроматографировании в системе метанол—вода (1 1 по объему) на бумаге марки медленная фабрики им. Володарского вещество дает двойное красно-фиолетовое пятно с R/, 0,75—0,85, флуоресцирующее оранжево-красным светом при УФ-облучении с длиной волны 365 нм. ВеШество не содержит примесей, имеющихся в препаратах 4(5)-нитрородамина, полученных по методу ] 2-(2 -окси-4 -ди-диэтил-аминобензоил)-4(5)-нргтробензойной кислоты, дающей на хроматограмме желтое пятно с R/ 0,9 красителя, дающего фиолетовое пятно с 0,1—0,3 веществ, дающпх черное или фиолетовое пятно на старте. [c.141]

Двойной пик на кривой элюирования галлия, очевидно, прямо связан с двойным пятном, наблюдаемым на бумаге при элюировании концентрированной соляной кислотой. Хроматография на бумаге, обработанной Д2 ЭГФК, позволила объяснить причину появления двойных пятен. Использование для нанесения исходного пятна галлия растворов этого элемента в соляной кислоте различной концентрации и элюирование 5,5—6,5 М кислотой сразу после нанесения пятна показало, что пятно галлия на хроматограмме с Rp близким к 1, отсутствует, если исходный раствор [c.479]

Из динамической теории ТСХ вытекают два достаточно точных метода количественного анализа тонкослойных хроматограмм без извлечения веш,ества из пластинки по размерам хроматографических пятен и с помош.ью денситометрии (флюориметрии) точечным световым зондом. Для количественного анализа тонкослойных хроматограмм по размерам хроматографического пятна [23] необходимо иметь четкие границы исследуемых пятен, что достигается путем двойной последовательной контактной фотографии в проходящем свете на рефлексной фотобумаге с сверхкон-трастной характеристической кривой. Интегрируя уравнение (8 ) в пределах + оо, получаем количество вещества, содержащегося в хроматографическом пятне [c.143]

При анализе блок- и привитых сополимеров или разветвленных гомополимеров возникают две задачи диагностика сополимера или разветвленного гомополимера и исследование их полидисперсности, а также определение присутствующих в составе сополимера соответствующих линейных гомополимеров. Эти задачи решают сравнением хроматографич. подвижности анализируемых фракций полимера с хроматографич. подвижностями соответствующих линейных гомополимеров в разных растворителях. Окончательная диагностика осуществляется либо обработкой хроматограммы двумя проявителями, специфически окрашивающими гомополимеры разного типа (двойное окрашивание хроматографич. пятна указывает на наличие сополимера), либо анализом состава полимера путем спектрофото-метрии непосредственно на пластинке или после элюирования зоны полимера с хроматографич. пластинки, напр, с помощью пиролитич. газовой X. [c.423]

Если вещество в пятне не окрашено и не флуоресцирует, то для его выявления хроматограмму обрабатывают (например, обрызгивают) соответствующим реактивом, и пятна начинают люминесцировать, или при другом варианте реактив вызывает свечение бумаги, и пятна выделяются на ней, как темные места па ярко флуоресцирующем фоне [10]. Для выявления терпенов с реакционноспособными двойными связями применен следующий метод готовую хроматограмму опрыскива.ли 0,05%-ным раствором флуоресцеина и затем держали в парах брома. Пятна терпенов связывают бром быстрее флуоресцеина светятся они желтым светом и отчетливо выявляются на фоне розовой флуоресценции эозина, образовавшегося из флуоресцеина [11]. [c.64]

Кетоны (XX), (XXI) и (ХХП) и получающиеся при их гидрировании над палладием на угле предельные кетоны, по данным газо-жидкостной хроматографии, однородны. Кетоны (XIX) дают яри хроматографировании в тонком слое окиси алюминия одно пятно, но на газо-жидкостной хроматограмме — два пика. По-видимому, эти два пика соответствуют двум изомерным кетонам, различающимся лишь положением двойной связи в цикле, так как получаемые при гидрировании кетонов предельные кетоны —2-метил-5-алкилциклопентаноны (XXIII) — хроматографически однородны. [c.263]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология