Тонкослойная хроматография проявление хроматограмм

Как и в бумажной хроматографии, положение пятна на тонкослойной хроматограмме характеризуется фактором замедления Бесцветные вещества на хроматограмме с закрепленным слоем могут быть обнаружены при опрыскивании хроматограммы растворами реагентов, образующих с исследуемыми веществами окрашенные продукты. Для этой цели может быть использована концентрированная серная кислота, под влиянием которой на хроматограмме в местах нахождения органических веществ образуются темные пятна. Применять опрыскивание для проявления хроматограмм с незакрепленным слоем нельзя. [c.48]

В тонкослойной хроматографии большое значение для получения надежных и воспроизводимых результатов имеет овладение техникой эксперимента (приготовление сорбента, его нанесение, установление толщины слоя, подготовка пластинок, нанесение пробы вещества, подача растворителя, проявление хроматограмм и другие операции). [c.134]

В бумажной и тонкослойной хроматографии по проявленной хроматограмме находят значения R . Для веществ 81 и 82 (рис. 58, б) этот показатель вычисляют как отношение соответствующих отрезков [c.253]

Наиболее ценные результаты дает применение тонкослойной хроматографии в качестве метода оценки низких уровней примесей в медицинских веществах. Для этой цели вещество наносят на хроматографическую пластинку и после хроматографирования любые вторичные пятна, которые могут быть видны на хроматограмме после соответствующего проявления, сравнивают по размеру и интенсивности с пятнами, которые дают небольшие количества ожидаемых примесей при одновременном хроматографировании на той же пластинке. Для этой методики нужно иметь в наличии ожидаемые примеси, поэтому в некоторых статьях предписывается использование аутентичных образцов примесей. Часто бывает, что в лабораториях этих примесей нет в таких случаях можно сравнивать вторичные пятна, образующиеся от следовых количеств примесей, с пятном, полученным при хроматографировании на той же пластинке соответствующего небольшого количества испытуемого вещества. Этот прием не всегда возможно применить, так как примеси и испытуемое вещество могут по-разному реагировать на метод обнаружения, однако с его помощью можно получить приемлемый критерий, по которому можно судить об уровне примеси в веществе. Третья, иногда рекомендуемая методика состоит в нанесении такого количества испытуемого вещества, при котором после хроматографирования не появляется никаких вторичных пятен, если образец приемлемо чист. Это наименее удовлетворительный из всех трех методов, так как возможность увидеть вторичное пятно зависит от субъективных особенностей наблюдающего, а интенсивность пятен на хроматограмме может значительно варьировать в зависимости от конкретных условий хроматографирования. [c.94]

Тонкослойная и газовая хроматография. Следует проработать разд. 3.2 и 3.4. Тонкослойная хроматография — очень легкий и прямой способ оценки чистоты вещества. Для твердых проб тонкослойную хроматографию можно дополнить определением температуры плавления (см. ниже) и газовой хроматографией. Наличие одного пятна на тонкослойных хроматограммах (проявленных в растворителях с различной полярностью), одного пика на газовых хроматограммах, полученных на колонках с различной полярностью, и четкая температура плавления являются вескими свидетельствами в пользу высокой чистоты исследуемого вещества. Если проба представляет собой жидкость или твердое вещество, то применение тонкослойной хроматографии вполне целесообразно. Если проба находится в жидком состоянии, то следует попытаться использовать газовую хроматографию. В ряде случаев возможно газохроматографическое исследование и достаточно летучих твердых веществ. [c.30]

Исследуемый продукт оксиэтилирования разделяют методом тонкослойной хроматографии на силикагеле на компоненты (пятна) с различным числом присоединенных оксиэтильных групп. Чём выше концентрация определяемых компонентов в исходной смеси, тем интенсивней окраска проявленных реактивом пятен, что дает возможность по внешнему виду хроматограммы примерно оценить положение максимума на кривой молекулярно-массового распределения компонентов. [c.218]

Методы тонкослойной и бумажной хроматографии рассматриваются совместно оба метода широко используются в рядовой и исследовательской работе и очень важны для аналитика. В своей основе каждый из методов прост, но для получения хороших результатов методическим тонкостям следует уделять должное внимание. Полная автоматизация хроматографических процессов от нанесения пробы до обработки полученной хроматограммы с точки зрения изготовителей приборов не является экономически выгодной. В литературе проблемы автоматизации тонкослойной и бумажной хроматографии отражены недостаточно. Обычно рассматриваемые процессы хроматографирования можно разделить на три отдельные стадии а) нанесение пробы, б) разделение пробы 4 проявление хроматограммы и в) количественная обработка результатов. Для каждой из этих стадий описан ряд автоматических и механических средств, обсуждаемых в соответствующих разделах главы. В конце главы рассматриваются полностью автоматические системы, предназначенные в первую очередь для препаративных целей. [c.272]

В развитии хроматографии вслед за периодом, когда основные ее достижения, были связаны в первую очередь с созданием и совершенствованием аппаратуры, наступило время, когда столь же серьезные усилия стали направлять и на создание высокоэффективных материалов — сорбентов, носителей, неподвижных жидких фаз и т. д. — которые, собственно, и определяют качество хроматографического разделения веществ. Совершенствуются, порой весьма значительно, традиционные хроматографические материалы повышается их химическая однородность, чистота, улучшаются механические свойства. Выдающиеся результаты достигаются при использовании в колоночной жидкостной хроматографии микро-зернистых сорбентов. Наряду с этим появляются и классы совершенно новых хроматографических материалов с особыми свойствами, идеально соответствующими их назначению. Примерами таких материалов являются биоспецифические и поверхностно-пористые сорбенты для жидкостной хроматографии. Промышленность выпускает все больше материалов в максимально удобной для непосредственного применения форме, например готовые к применению пластины со слоем сорбента для тонкослойной хроматографии, растворы и смеси реактивов для предварительной обработки проб перед анализом или для проявления хроматограмм и т. д. [c.4]

Таким образом, 8 линейно зависит от lg q. Однако для тонкослойной хроматографии это правило, по-видимому из-за несовершенного детектирования границ пятна, не всегда выполняется. Поэтому количественная оценка может быть проведена только прямым сравнением с серией стандартных растворов. Для этого Зеер [18] предложил следующий метод стандартный объем определяемой смеси веществ наносится в виде точек через определенные интервалы на слой силикагеля. Между этими точками наносятся стандартные объемы ряда эталонных растворов различной концентрации. После развития и проявления хроматограмм приготовляют контактную фотографию пластинок. На ней измеряют площади соответствующих пятен и строят по эталонным растворам графическую зависимость измеренных площадей от количеств вещества. Из полученного графика находят содержание вещества в определяемой смеси. [c.303]

Сущность тонкослойной хроматографии заключается в разделении в токе растворителя смеси веществ в тонком слое сорбента, нанесенного на пластинку. Согласно принятой терминологии, процесс разделения смеси растворителем называется проявлением, а растворитель проявителем. Распознавание вещества на проявленной хроматограмме называется обнаружением или идентификацией. Наиболее распространенным способом идентификации является окрашивание проявленных пятен индивидуальных веществ специфическими реагентами или элюирование пятен соответствующими растворителям.и. Другой характеристикой для идентификации окрашенных пятен является коэффициент или величина Rf, которая вычисляется по формуле [c.117]

Методика определения фозалона в молоке, тканях животных, траве, свекле, картофеле, комбикорме тонкослойной хроматографией. Основные положения. Принцип метода. Метод основан на экстрагировании фозалона из исследуемых проб, очистке экстрактов и хроматографическом разделении в тонком слое на пластинках Силуфол . Для проявления хроматограмм используют раствор азотнокислого серебра и 2-феноксиэтанола в ацетоне. [c.107]

Большие возможности в органическом анализе представляет сочетание полярографии с хроматографией — х р о м а т о п о л я-р о г р а ф и я — где полярографические датчики анализируют последовательно выходящие из хроматографической колонки вещества. В приложении к бумажной н тонкослойной жидкостной хроматографии этим методом можно определять вещества с близкими значениями i f, избегать проявления хроматограмм, заменяя его полярографированием вдоль линии подъема раствора. [c.279]

Для оценки чистоты этих сополимеров использовали [558] тонкослойную хроматографию. Привитые сополимеры были получены путем радиационной прививки. Перед проявлением хроматограммы необходимо с максимально возможной тщательностью удалять гомополимеры путем экстракции или селективного осаждения. Полное ацетилирование гидроксильных групп позволяет получить сополимер триацетата целлюлозы со стиролом. Полученные результаты свидетельствуют о том, что во всех привитых сополимерах в среднем содержится одно разветвление на молекулу, причем среднечисловая молекулярная масса разветвлений составляет 10 . Условия тонкослойной хроматографии приведены ниже. [c.539]

Тонкослойная хроматография. Отделение лития методом тонкослойной хроматографии от щелочных металлов проводят на слое силикагеля, содержащем в качестве связующего вещества 5% растворимого крахмала. Элюентами являются смеси этанол— уксусная кислота (100 1) [1263—1265], метанол — н-бу-танол — конц. НС1 (8 1 1) [477, 478] или метанол — соляная кислота [1055]. При тонкослойной хроматографии на целлюлозе лучшее отделение лития получается при использовании в качестве элюента метанола [811] или смеси метанол—соляная кислота (17 3). После проявления хроматограммы раствором цинкуранилацетата содержание лития может быть определено по интенсивности люминесценции. [c.73]

Для проявления тонкослойных хроматограмм употребляют все растворители, применяемые при хроматографии на колонках. По данным Прохазки [211, при использовании окиси алюминия необходимо, чтобы растворитель был несколько полярнее, чем в аналогичном случае при проведении колоночной проточной хроматографии. [c.368]

Для тонкослойного хроматографирования аминокислот рекомендуется пользоваться пластинками с силикагелем и гипсом, которые после нанесения слоя достаточно просушить на воздухе. Проявление ведут в системе к-бутанол — уксусная кислота — вода, взятая Б соотношении 60 20 20. Окрашивают хроматограмму раствором нингидрина и азотнокислой меди. Указывают, что такой способ в 10 раз чувствительнее, чем хроматография на бумаге. [c.297]

Очень полезным является использование тонкослойной хроматографии на сорбентах разных типов и с разными системами растворителей, особенно когда новых или неизвестных образцов несколько. Их можно наносить одновременно на пластинки с разными сорбентами и системами растворителей и получить большой объем информации по примерному подбору условий разделения за короткий отрезок времени. Большим преимуществом ТСХ для этой работы является то, что при проявлении пластин можно видеть положение пятен всех компонентов образца, в том числе и оставшихся на старте, и таким образом иметь полную картину разделения. Это зачастую позволяет избежать грубых ошибок при ВЭЖХ, так как не элюирующиеся компоненты не покидают начала колонки или двигаются слишком медленно и могут быть потеряны (не достигают детектора, поэтому не детектируются и отсутствуют на полученной хроматограмме). [c.192]

Анализ органических примесей, содержащихся в бисфеноле А, проводят методом тонкослойной хроматографии [6, с. 71]. Для этого пробу бисфенола А растворяют в трихлорэтилене при нагревании, а затем каплю полученного раствора помещают на пластинку, покрытую слоем специально приготовленного силикагеля. На пластинку наносят также капли эталонных растворов. Пластинку помещают в камеру, содержащую смесь этилаце-тата (10%) и хлороформа, и выдерживают в определенных условиях. Затем пластинку вынимают из камеры и обрабатывают раствором диазопиевой соли сульфани-ловой кислоты при этом происходит проявление хроматограммы. Этот метод — полуколичествеппый. Однако он дает возможность проконтролировать наличие нежелательных примесей. [c.46]

По сравнению с вариантами линейного элюирования, центробежная ТСХ дает возможность (при той же длине разделяющего участка) добиться лучшей разрешающей способности (особенно при низких значениях Кг, если старт оказывается близким к точке подачи растворителя). Однако при переходе к более высоким значениям Кг разрешающая способность снижается. Это наглядно иллюстрируют рис. 56-58 (на которых значения Кг, получаемые при линейном проявлении и при работе в режиме круговой хроматографии, сравниваются схематически), рис. 110 (случаи 6 и 8) и рис. 113 (на этих двух последних рисунках приведены реальные хроматограммы). Такая зависимость объясняется просто после завершения элюирования в случае круговой тонкослойной хроматографии большее количество растворителя проходит через любую точку слоя (чем чфез пятна, удаленные на то же расстояние от старта в случае линейного элюирования), поскольку каждая точка хроматограммы вынуждена "питать" растворптеле.м гораздо большую плошадь. находяшуюся впереди (по сравнению с площадью, находящейся [c.286]

Метод тонкослойной хроматографии применен для количественного определения конденсированных фосфатов [1051—1053]. При погружении проявленной хроматограммы в раствор коллодия в смеси спирта и эфира [1 i 2], содержащей глицерин, сорбционный слой покрывается пленкой и легко снимается с пластинки. Для количественного определения отдельных конденсированных фосфатов из снятого слоя вырезают зоны, содержащие пятна этих фосфатов," органическую фазу окисляют мокрым путем и содержаниеТфосфатов в отдельных фракциях находят фотометрическим методом. В качестве элюента применяют смесь GH3OH с диоксаном. [c.102]

Проявление тонкослойных или бумажных хроматограмм может осуществляться путем восходящего, нисходящего, горизонтального или радиального движения растворителя. При восходящей хроматографии ослол непия, связанные с образованием каналов при движении растворителя, сводятся к минимуму. При непрерывном проявлении растворитель продвигается до конца бумаги или тонкого слоя в одном опыте. При многократном проявлении после того, как фронт растворителя достигает края листа, растворителю дают испариться и повторяют проявление при том же направлении движения растворителя. Ступенчатое проявление включает проявление на пластинке в неполярном растворителе, испарение растворителя и второе проявление в более полярном растворителе. При двухмерном проявлении также последовательно применяют два растворителя сначала проводят хроматографирование в одном направлении, затем высушивают пластинку для испарения первого растворителя, поворачивают пластинку на 90° и проводят проявление вторым растворителем. При градиентном элюировании состав растворителя меняется в ходе проявления [94]. Эта методика, однако, сложна, в ней теряется простота тонкослойной или бумажной хроматографии. [c.553]

Вещества для проявления хроматограмм. Если осадки или пятна на хроматограмме, полученной методами бумажной или тонкослойной хроматографии, бесцветны, то для их проявления пользуются специальными реактивами, образующими с адсорбированными веществами окрашенные соединения. Число таких реактивов, применяемых в тонкослойной и бумажной хроматографии, более 300. Это, как правило, специфические реактивы на катионы, анионы и функциональные группы органических соединений, обычно применяемые в аналитической практике (см. 7 настоящей главы). Для удобства обработки хроматограмм некоторые реактивы выпускаются в аэрозольной упаковке (анилинфталат, нингидрин, бромкрезоловый зеленый и др.). [c.68]

Более полное исследование продуктов реакции диэтилфосфористого натрия (III, R = С2Н5) с II методом тонкослойной хроматографии привело к открытию в этой смеси соединений, содержащих тиофосфорильную группировку P=S в молекуле. В хроматограмме этого типа соединений после проявления азотнокислым серебром появляются характерные темные пя на. На основании этого наблюдения можно было предположить, что выделяющаяся в реакции (III, R = gHg) с II двуокись серы пе является инертным реактивом по отношению к I. Это предположение нашло также подтверждение в литературных данных, касающихся реакции соединений трехвалентного фосфэра с двуокисью серы [10] [c.123]

Реактивы для тонкослойной хроматографии. Силикагель марки КСК, раздробленный и просеянный через сито 100 меш. Кальций сернокислый (Са504-2Нг0), прокаленный в течение 6 ч при 160°С. Гексан х.ч. Ацетон ч. Хлороформ ч. Соляная кислота 0,01 н. Реагенты для проявления хроматограмм [c.60]

Методика определения дифенамида в томатах тонкослойной хроматографией. Основные положения. Принцип мето-д а. Метод основан на экстракции пестицида из анализируемых проб хлороформом, очистке экстракта активированным углем и двумерном хроматографировании в микротонком слое силикагеля (размер зерен 3—10 мк) либо на пластинках Силуфол . Подвижными растворителями служат смеси 1) бензола и этилацетата (14 1) 2) гексана, ацетона и аммиака (10 5 0,8). Проявление хроматограмм осуществляют 1%-ным раствором фосфорно-молибденовой кислоты с последующим облучением ультрафиолетовым светом. [c.174]

После того как фронт растворителя прошел заданное расстояние, пластинку вынимают из хроматографической камеры, подсушивают и обрабатывают проявляющими растворами для обнаружения разделенных веществ. В настоящее время при определении остатков хлорорганических пестицидов методом тонкослойной хроматографии используют два способа проявления хроматограмм окрашивапие пятен хромогенным реактивом внесение хромогенного реактива в сорбент. [c.258]

Пятна хлорорганических инсектицидов проявляются обычно под действием ультрафиолетового света. В СССР выпускается бактерицидная лампа БУФ-15, пригодная для проявления хроматограмм. Эта лампа дает излучения, 80% которых имеют Я=253,7 нм. Кром е того, в комплект оборудования для тонкослойной хроматографии АТХ входят два ультрафиолетовых облучателя. ( БИО-1 п Хроматоскоп ). Однако лучшие результаты достигаются при применении ламп ПРК-2 ил и ПРК-4 с широким спектром ультрафиолетового излучения. [c.259]

Для качественного и количественного анализа фосфолипидов в настоящее время широко используют тонкослойную хроматографию на силикагеле [3]. При этом применение специфических реагентов, дающих характерное окрашивание для отдельных классов фосфолипидов, помогает осуществить их идентификацию. С помощью ТСХ может быть достигнут количественный анализ фосфолипидов при проведении ден-ситометрических измерений пятен после проявления хроматограммы или путем анализа элюированных веществ на содержание фосфора. [c.270]

Внутренние и внешние хроматограммы. Вопрос получения внутренних или внешних хроматограмм при разделении веществ имеет важное значение для последующего качественного и количественного определения веществ. Внутренние хроматограммы получают в случае разделения или идентификации веществ непосредственно на стационарной фазе. В этом случае проявление хроматограммы заканчивается прежде, чем подвижная фаза доходит до конца слоя сорбента. Если же элюирование продолжают до тех пор, пока вещество вместе с подвижной фазой не достигнет конца стационарной фазы, и исследуют затем небольшие порции элюата, то получают внеиш/ёю хроматограмму при построении зависимости концентрации элюата от его объема (мл). В случае окрашенных компонентов или при отличии свойств компонентов (различной радиоактивности, способности абсорбировать УФ- или ИК-излучение) от свойств стационарной фазы внутреннюю хроматограмму можно определить визуально или зарегистрировать на стационарной фазе. Хроматограммы такого типа получают в бумажной и тонкослойной хроматографии, отчасти и в колоночной. Бесцветные соединения можно проявлять химическим путем. Качественный анализ веществ проводят, оценивая замедление передвижения анализируемого вещества относительно движения фронта растворителя. Для этого сравнивают путь, пройденный веществом, с путем, пройденным фронтом растворителя, и отношение между ними обозначают через [c.345]

Для проявления и идентификации аминокислот, производных аминокислот и пептидов хроматограммы опрыскивают специальными реактивами. Опрыскивание реактивом Сакагучи нельзя применять при ТСХ на пластинках с силикагелем, остальные реактивы можно использовать как в случае бумажной, так и тонкослойной хроматографии. (Подробнее о реактивах для опрыскивания см. работы [96, 123, 126, 146].) Опрыскивание некоторыми реактивами можно проводить последовательно и, таким образом, получать максимальную информацию из одного опыта (см. работу [24]). Величины проявляемых пятен должны соответствовать обшепринятым для хроматографии и электрофореза. Если применять слишком много проявляющего реактива, особенно в тех случаях, когда нанесенные вещества в нем растворимы, то пятна на хроматограммах и фореграммах будут получаться расплывчатыми. При опрыскивании хроматограмм, содержащих аминокислоты и пептиды, водными растворами последние следует тщательно распылять и наносить в весьма умеренных количествах. Использование того или иного проявляющего реактива с погружением в него допустимо лишь в том случае, если [c.142]

Тонкослойная хроматография. Пурины разделяются на пластинках с силикагелем G в следующих смесях растворителей—I бензол — ацетон (3 7 в атмосфере, насыщенной аммиаком) [71] П ацетон — хлорофор м — бутиловый спирт — 25% водный аммиак (3 3 4 1) [72]. Для проявления пятен хроматограмму опрыскивают реактивом Драгендорфа и раствором нитрата серебра (1г в 100 мл 5%-ной серной кислоты) или раствором 2% иода и 5% гбксагидрата хлорида железа (П1) в смеси равных частей 20%-ного раствора винной кислоты и ацетона, [c.321]

С этой целью в случае колоночной хроматографии вытекающую из колонки жидкость разделяют на малые фракции и определяют концентрацию содержащегося в них вещества. Детектирование можно осуществлять с помощью цветных реакций, проточных рефрактометров, фотометров, поляриметров и т.д. Для проявления бумажных или тонкослойных хроматограмм бумагу или пластинку опрыскивают какими-либо проявляющими реагентами, образующими с веществами окрашенные соединения. В ряде случаев пятна веществ на хроматограмме можно увидеть в УФ-свете. Хроматографической характеристикой вещества служит величина постоянная для каждого вещества в определенной системе растворителей и представляющая собой отношение длины пробега пятна веи ества на хроматограмме к длине пробега фронта растворителя. Вещество можно выделить из хроматограммы в индивидуальном виде, экстрагируя из пятна. В газовой хроматографии для обнаружения выходящего из колонки вещества применяются иламенно-ионизационные детекторы или детекторы теплопроводности (катаро-метры). Хроматографической характеристикой вещества в этом методе является время задержки его на неподвижной фазе (время удерживания), а также задерживаемый на ней объем, отнесенный к объему подвижной фазы (удерживаемый объем), и иногда — путь, пройденный на неподвижной фазе, также отнесенный к пути, пройденному подвижной фазой (значение / /). Выделение получаемых в процессе газовой хроматографии индивидуальных компонентов возможно вымораживанием их из соответствующих газообразных фракций. [c.30]