Вирус-помощник

Рис. 21.9. Вектор на основе HSV-ампликон-плазмиды. Точка инициации репликации HSV (ori HSV), сигнал упаковки HSV и терапевтический ) ген (ТГ) встраивают в плазмиду Е. соН (HSV-ампликон-плазмида). Проводят трансфекцию клетки-хозяина, инфицированной вирусом-помощником HSV, полученной плазмидой. ДНК ампли-кон-плазмиды реплицируется по типу катящегося кольца . 10 амп-ликонов, соответствующих полноразмерному геному HSV, упаковываются в HSV-капсид, который поставляет вирус-помощник HSV. Геном этого вируса не упаковывается. HSV-частицы, несущие множество копий терапевтического гена, высвобождаются при лизисе клетки и используются для трансдукции нейронов.

Использование ретровирусных векторов имеет и еще один большой недостаток. Хотя эти векторы создаются так, чтобы они были дефектными по репликации, геном штамма ретровируса (вируса-помощника), который необходим для получения большого количества векторной ДНК, может попасть в то же ядро, что и трансген. Несмотря на все принимаемые меры, ретровирусы-помощники могут реплицироваться в организме трансгенного животного, что совершенно недопустимо, если этих животных предполагается использовать в пищу или как инструмент для получения коммерческого продукта. И поскольку существуют альтернативные методы трансгеноза, ретровирусные векторы редко используются для создания трансгенных животных, имеющих коммерческую ценность. [c.419]

Аденоассоциированные вирусы (ЛАВ) - это небольшие непатогенные вирусы человека с одноцепочечным ДНК-геномом (4,7 т. п. п.), который может интегрировать в специфический сайт 19-й хромосомы. Такое название они получили потому, что для продуктивной инфекции им необходимы белки другого вируса (вируса-помощника), например аденовируса. После того как ААВ попадает в ядро, его геном с помощью полимераз клетки-хозяина преобразуется в двухцепочечную ДНК и транскрибируется. [c.496]

Обнаружение трансдуцирующих вирусов, геномы которых приобрели клеточные последовательности, позволило взглянуть на жизненный цикл вируса с несколько другой точки зрения. На рис. 38.4 показан геном одного из таких вирусов. Часть вирусной последовательности-в данном случае ген епи-замещена геном v-on . Образовавшийся вирус дефектен по репликации и не способен поддерживать самостоятельно инфекционный цикл. Такой вирус может сохраняться вместе с вирусом-помощником, который восполняет утраченные вирусные функции. [c.492]

ВИРУС-ПОМОЩНИК. Обладает функциями, отсутствующими у дефектного вируса, компенсирует их при смешанной инфекции. [c.520]

Вирусные векторы не получили широкого распространения. Характерной чертой эукариотических вирусов является компактное строение их генома и практически полное отсутствие генов, несущественных для их развития. По тому клонирование с их помощью чужеродной ДНК вызывает их дефектность и требует использования вирусов-помощников. [c.379]

Казалось бы, нет причин, исключающих использование вирусам и-сате.п-литами структурного белка вируса-помощника. Такая система будет отличаться от многокомпонентного вируса тем, что репликация каждого компонента системы протекает совершенно независимо. Не исключена также возможность существования многокомпонентных вирусов-сателлитов. Такой многокомпонентный вирус-сателлит, способный использовать тот ке, структурный белок, что и вирус-помощник, следует попытаться обнаружить в препаратах вирусов с дефектными частицами неизвестной функции. [c.202]

Внедрение экзогенных фрагментов в состав ДНК вирусов обычно приводит к повреждению определенных вирусных генов, а часто (в силу ограничений, налагаемых на размер вирусного генома) возможно лишь при выщеплении сегмента вирусной ДНК. Поэтому гибридные вирусы, как правило, являются мутантными. Обьгано используют такие варианты клонирования, при которых формируемый мутантный вирус жизнеспособен (в противном случае приходится использовать вирус-помощник, что усложняет работу). Мутантные вирусы часто удается отличить от исходного векторного, и это позволяет достаточно просто выявлять гибридные вирусы (см. 2.2.2). [c.34]

При серийном пассировании вируса в культуре ткани появляются делеционные мутанты [209, 251, 284а]. Обычно делеции затрагивают один, реже — несколько сегментов геномной РНК реовируса. Чаще всего затрагивается сегмент Ы. Нередки и делеции сегментов ЬЗ и М1. Для размножения делеционных мутантов необходим вирус-помощник. Разработана техника выделения относительно чистых фракций делеционных мутантов из препаратов вируса, основанная на центрифугировании в градиенте плотности [5]. [c.324]

Парвовирусы — мелкие ДНК-содержащие вирусы животных — имеют в качестве генома однонитевую молекулу ДНК, оба кониа которой способны формировать шпилечные структуры благодаря наличию самокомпле.ментарных последовательностей, В качестве примера рассмотрим схему репликации ДНК аденоассоциирован-ного вируса (репродукция этого вируса требует, чтобы в той же клетке размножался вирус-помощник, каковым может быть, в частности, аденовирус) (рис. 139). [c.268]

В вирусной РНК записана информация для синтеза по крайней мере трех групп вирус-специфических белков структурных белков сердцевины вириона (Qag-белков), ферментативных белков, принимающих участие в обратной транскрипции вирусного генома и в интеграции вирус-специфической ДНК и клеточной хромосомы (продуктов гена pol), и белков, входящих в состав наружной липо-протеидной оболочки вириона (Env-белков). У некоторых ретровирусов есть дополнительные гены нередко наблюдаются также всякого рода перестройки генома, что обычно ведет к дефектности вируса, т. е. к его неспособности размножаться без вируса-помощника. [c.309]

Отсутствие патогенности делает ААВ весьма перспективным вектором для доставки в организм человека терапевтических генов. Рекомбинантный ААВ получают с помощью котрансфекции клетки-хозяина, инфицированной каким-нибудь аденовирусом (вирусом-помощником), двумя плазмидами (рис. 21.8). Одна из них несет терапевтический ген, фланкированный инвертированными концевыми повторами (длиной от 125 п. н.) ААВ, а вторая - два его гена, гер и ap, ответственные за репликацию генома и синтез капсида соответственно. После [c.496]

Большинство систем доставки генов на основе HSV предполагает использование вируса-по-мощника, который поставляет белки, необходимые для репликации и сборки вируса, но не образует инфекционные вирусные частицы, поскольку его геном модифицирован и не способен упаковываться. Для получения рекомбинантного HSV осуществляют трансфекцию ампликон-плазмиды в инфицированную вирусом-помощником клетку-хозяина. ДНК ампли- [c.498]

Вирус-помощник (Helper virus) Вирулентный штамм вируса, в присутствии которого дефектный вирус может размножаться в клетке-хозяине. [c.545]

Инфекционная ДНК — биологически активная ДНК вирусов и фагов. ДНК с инфекционными свойствами были выделены из вируса полиомы и бактериофагов ФХ174 и А.. Животные в растительные клетки реагируют на непосредственное воздействие вирусной нуклеиновой кислота, тогда как клетки бактерий к такому воздействию зачастую не чувствительны. Но они становятся чувствительными при частичном удалении клеточной оболочки, образуя сферопласты. Заражение клетки происходит при условии введения в нее целой молекулы нуклеиновой кислоты. Эго условие нарушается, если клетка одновременно заражается вирусом-помощником, генотип которого отличается от инфицирукяцей ДНК- Заражение клеток чистой инфекционной [c.54]

Символами Р, Л и М обозначены три цистрона (гена), которые, как известно, имеются у РНК-еодершащих фагов. Р (ген оболочечного белка) и К (ген репликазы) имеются почти наверняка также у вирусов растений и животных М (фактор созревания) может обозначать вообще любой другой ген. На схеме показано, что ген Е у ковирусов может быть распределен между двумя типами частиц или, будучи полностью отделен от гена Р, может находиться в одном каком-либо типе частиц. Наконец, вирус-сателлит вируса некроза табака содержит только свой собственный ген Рд, отличающийся от Ру/у полного вируса-помощника. В вирусе гриппа и других сходных вирусах геном распределен между многими молекулами РНК, содержащимися в одной и той же [c.167]

ДНК может происходить только в присутствии репродуцирующихся аденовирусов [207, 208, 463]. В этом случае также не существует никаких серологических связей между паразитом и его помощником. В обоих случаях паразит подавляет репликацию вируса-помощника. [c.169]

Совсем по-иному складываются отношения между дефектным вирусом, например вирусом саркомы Рауса, и вирусом-помощником. В этом случае неспособность вируса кодировать синтез какого-либо (функционального) белка компенсируется образованием этого белка вирусом-помощником (см. гл. ХИ, разд. В) [396]. Также отличается по своему характеру роль вируса-помощника в процессе инфицирования клеток Е. oli с помощью ДНК фага "К. В обоих этих случаях нуклеиновая кислота сохраняет способность синтезировать свою репликазу в отличие от нуклеиновой кислоты вируса-сателлита вируса некроза табака. [c.169]

Только малая часть культивируемых клеток млекопитающих способна в любой момент времени так поглощать ДНК, что очень немного клеток из популяции оказываются первоначально инфицированными. Однако в течение нескольких следующих дней каждая из этих клеток поддерживает литическую инфекцию и продуцирует более 1 млн. вирусных частиц, которые способны внедряться в соседние клетки и инфицировать их с высокой эффективностью. Обычно лизат, полученный из одного набора инфицированных клеток, должен быть пассирован 1 или 2 раза для получения вирусного материала в высоком титре. В случае рекомбинантов ранней замены этот вирусный материал состоял исключительно из рекомбинантных геномов, инкапсидированных в белки оболочки SV40 в случае рекомбинантов поздней замены он включает приблизительно равные количества частиц вируса-помощника и рекомбинантов. Оба типа вирусного материала могут быть использованы для инфицирования пермиссивных клеток с высокой эффективностью и для индуцирования литических циклов размножения вируса. Во время таких инфекций вирусные геномы транспортируются к ядру, где они высвобождаются из капсидов. Ранний промотор вскоре становится активным и под его контролем экспрессируются гены. К 12 ч после инфекции происходит репликация вирусной ДНК и начинают экспрессироваться с высокой эффективностью гены позднего промотора. К 36—48 ч инфекции вновь синтезированные вирусные геномы начинают собираться в потомство вирусных частиц — процесс, который продолжается в течение следующих 24 ч, когда клетки отделяются от своего субстрата и погибают. [c.171]

У многих ретровирусов часть вирусных последовательностей дад, pol или env заменена большим функционирующим онкогенным фрагментом. Такие ретровирусы являются дефектными-они не могут размножаться сами по себе и нуждаются в присутствии неонкогенного вируса-помощника , доставляющего продукт утраченного гена. Недефектные онкогенные ретровирусы вроде вируса саркомы Рауса встречаются даже реже, чем многочисленные дефектные (как, например, вирус саркомы Харви или вирус Абельсона), у которых нет сегмента дад или env. Онкогенные белки таких дефектных вирусов часто представляют собой продукты слияния N-концевая часть у них содержит последовательность дад, а карбоксильный конец-последовательность онкогена. [c.154]

Этот метод подробно описали Роу и сотр. (Rowe et al., 1970). Для титрования вируса-помощника в комплексе Эбелсона мож- [c.385]

Векторы с замещением поздних генов 8 40ДНК. Первые попытки конструирования вирусных векторов были осуществлены с вирусом SV40, в ДНК которого нет протяженных спейсеров. В вирусном геноме замещали на чужДНК поздние или ранние гены. Полученные конструкции являлись векторами замещения с емкостью не более 2,5 т.п.н., причем для работы с ними требовался вирус-помощник. [c.398]

Участок ori является единственным районом генома SV40, который необходим в цис-ио-ложении для репликации вирусной ДНК. Остальные генетические элементы вируса могут находиться в /иранс-положении, т. е. любые мутанты вируса SV40 с неповрежденным репликатором могут образовывать потомство в присутствии в клетке вируса-помощника. [c.357]

В большей части выполненных исследований гибридные вирусы SV40 получены замещением участка ДНК из области поздних генов вируса фрагментом чужеродной ДНК. Гибриды данного типа содержат полностью область ранних генов и репликатор вируса SV40 и могут размножаться в виде вирусных частиц при совместной инфекции пермиссивных клеток с вирусом-помощником дикого типа или термочувствительным мутантом по ранним генам (обычно teA). [c.358]

Смотреть страницы где упоминается термин Вирус-помощник: [c.331] [c.126] [c.331] [c.499] [c.221] [c.441] [c.275] [c.167] [c.171] [c.176] [c.198] [c.199] [c.340] [c.167] [c.171] [c.176] [c.394] [c.398] [c.400] [c.403] [c.429]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология