Мутанты супрессорные sus

Дикий тип фага w размножается на штаммах В и К12 (X) Е. соН. Мутантные фаги г размножаются только на -штаммах, образуя резко ограниченные бляшки. Мутанты F O, индуцируемые профлавином, относятся к типу г. Они обладают способностью спонтанно ревертировать, возвращаться к дикому типу W. Генетический анализ показал, что такие ревертанты возникают не в результате обратной мутации r- w, но вследствие появления второй супрессорной мутации вблизи первой мутации 14) -> г. Супрессоры относятся к тому же фенотипу г, что и супрессируемые ими мутации. Каждая из двух мутаций порознь приводит к утрате способности синтезировать соответствующий белок, по сочетание двух мутаций в одном цистроне эту способность восстанавливает. Всего было изучено около 80 г-мутантов, в том числе двойные и тройные их комбинации — супрессоры супрессоров и супрессоры супрессоров супрессоров. Все супрессоры оказались относящимися к двум классам + (добавление нуклеотида) и — (делеция). Если исходная мутация г есть +. то ее супрессор — и наоборот. Дикий фенотип дает [c.556]

Теперь мы можем отыскать спонтанные или индуцированные акридинами ревертанты к дикому типу, исходя из супрессорных мутантов. Снова путем генетической рекомбинации с диким фагом убеждаемся в том, что возврат к дикому тину произошел благодаря образованию второй мутации (супрессора к супрессору, на этот раз со знаком +) недалеко от первой. Разделив обе точечные мутации в рекомбинационном эксперименте, мы можем изучить их в отдельности, убедиться в том, что они отличны от дикого типа, и найти их локализацию на генетической карте фага Т4. Процесс можно продолжать как угодно долго, все время отыскивая супрессорные мутанты все более высокого порядка. В итоге получается путем отбора спонтанных ревертантов и под действием акридинов около 80 точечных мутантов. Все они по фенотипу были г, но их можно было разбить однозначно на две группы, приписав одной знак -1-, другой —, в соответствии с числом этапов при их получении. [c.414]

Если нужно получить мутант, генетический дефект которого нельзя компенсировать добавками питательных веществ (например, дефекты ферментов, участвующих в репликации ДНК и РНК, дефекты в каком-либо элементе белоксинтезирующего аппарата), его следует искать среди условно летальных мутантов, которые жизнеспособны лишь при определенных условиях. Примерами таких мутантов могут служить температурочувствительные мутанты и штаммы, несущие супрессорные нонсенс-мутации. В табл. 13.1 приведены свойства мутаций различных типов она может служить ключом для выбора наиболее подходящего типа мутанта в соответствии с определенной целью. [c.10]

Кодовое отношение было найдено экспериментально в результате генетического исследования, проведенного Криком с сотрудниками (1961), изучавшими область гИ генома фага Т4, размножающегося в культурах Е. oli. Было установлено, что мутации в этой области, вызываемые акридиновыми красителями, состоят в выпадении, делеции, нуклеотидов и в их добавлении. Дикий тип W размножается на штаммах В и Ki2 Е. oli. Мутанты г размножаются только на -штаммах, образуя резко очерченные бляшки. Некоторые из мутантов этого типа способны спонтанно возвращаться к дикому типу w. Генетический анализ показал, что такие ревертанты возникают не в результате обратной мутации г W, но вследствие появления второй супрессорной мутации и>- г вблизи первой. Каждая из двух мутаций порознь приводит к утрате способности синтезировать соответствующий белок, но сочетание двух мутаций в одном гене эту способность восстанавливает. Всего было изучено около 80 г-мутантов, в том числе двойные и тройные их комбинации — супрессоры супрессоров и супрессоры супрессоров супрессоров. Все супрессоры оказались относящимися к двум классам + (добавление нуклеотида) и — (де-леция). Если исходная мутация г есть +, то ее супрессор —, и наоборот. Дикий фенотип дают комбинации +—, —+, +++, ---, но не ++,--, ++++,----. [c.259]

Некоторые мутанты, содержащие супрессорные гены, синтезируют тРНК с единственной заменой основания в антикодоне. Такая-тРНК считывает кодон УАГ как тирозин. [c.44]

Бензер и Фриз не исключали возможности того, что наличие супрессорных мутаций может привести к неоднозначности тех выводов, которые они надеялись сделать на основании результатов, подобных приведенным в табл. 20. Поэтому они пытались разными способами выяснить, действительно ли обнаруживаемые в их исследованиях по мутагенезу ревертанты г являются результатом истинных реверсий, а не супрессорных мутаций. По-видимому, большинство ревертантов г+, образуемых мутантами первого типа (т. е. мутантами с транзициями и трансверсиями), действительно возникают за счет изменения в самой мутантной точке. [c.328]

В основу опытов Крика и Бреннера по генетическому коду легло наблюдение, что большинство спонтанных ревертантов дикого типа, образуемых мутантом F O T4rII, возникает не в результате истинных реверсий Б мутантном участке (расположенном в гене г1 IB), а в результате появления второй, супрессорной мутации поблизости от исходной мутации гП. Следовательно, эти ревертанты обладают не диким генотипом г+, а всего лишь псевдодиким фенотипом, когда за счет появления по соседству с исходной мутацией F O прямого внутригенного супрессора фаг приобретает способность расти на ограничивающем хозяине штамма К- Наличие супрессорных мутаций может быть доказано путем скрещивания псевдо-дикого ревертанта с аутентичным фагом дикого типа Т4 - [c.329]

Каждая из таких супрессорных мутаций является вместе с тем и мутацией гП, а поэтому можно изучить их реверсию к дикому типу г так же, как это делалось для мутации F O. Обнаружилось, что эти супрессорные мутанты, подобно мутантам F O, обычно не ревертируют к истинному дикому типу г. Вместо этого вновь образуются двойные супрессированные мутанты, способные размножаться на штамме К- Линии III я IV на фиг. 161 показывают расположение ряда мутаций г11, выделенных в качестве супрессора к двум супрессорам F 9 и F 7. Видно, что эти вторичные супрессорные мутации также происходят вблизи исходного мутантного участка F O в гене rllB. Точно таким же образом можно выделить и супрессоры к супрессорам супрессоров. Так было выделено в общей сложности около 80 независимых мутаций rll (включая мутацию F O), каждая из которых является супрессором некоторых других мутаций в том же наборе и располагается на сравнительно небольшом участке гена гПВ. Следует, однако, иметь в виду, что двойные мутанты, несущие мутацию и ее супрессор (и, следовательно, способные образовывать стерильные пятна па штамме К), образуют на обычном штамме Е. oli стерильные пятиа различных типов. Часть этих стерильных пятен почти или совершенно не отличается от пятен истинного дикого типа, тогда как мутантный характер других распознается легко и они довольно сильно напоминают стерильные пятна типа г. [c.330]

Первоначально Бензер объяснил поведение амбивалентных мутантов на основании механизма генетической супрессии, предложенного незадолго до этого Яновским и Сент-Лоуренсом (см. гл. XVH). Он предположил, что у амбивалентных гП-мутантов произошли missens-мутации и что три пермиссивных штамма К, каждый из которых выявляет один класс амбивалентных мутантов, содержит различные супрессорные мутации, подав- [c.450]

Биохимические исследования жизненного цикла бактериофагов семейства 2 были в значительной степени дополнены работами по выделению и исследованию фаговых мутантов. Эти мутанты относились в основном к тем же двум условно-летальным типам, которые были использованы при построении кольцевой генетической карты Т-четных фагов а) чувствительные к температуре ( т ззеп5е ) мутанты, неспособные размножаться при повышенной температуре, при которой происходит развитие фага дикого типа, и б) ат6ег(нонсенс)-мутанты, способные размножаться только в клетках штаммов, несущих супрессорную мутацию, обеспечивающую-включение приемлемой аминокислоты в растущую полипептидную цепь под влиянием мутантного бессмысленного кодона УАГ (УАА или УГА). [c.474]

Из числа умеренных колифагов наиболее подробно изучен фаг "к. Путем изучения развития вируса в ходе лизиса клетки (использовали целый ряд мутантов с супрессорно-чувствительными, условнолетальными, бессмысленными мутациями, выделенными Кэмпбеллом [60]) в геноме фага X удалось идентифицировать пе менее 18 генов. Этими методами было показано, что гены от Л до F ответственны за функции, связанные с синтезом белка фагового отростка, а гены от G до / отвечают за формирование головки. Ген i кодирует фаговый лизоцим [62]. Все эти гены, таким образом, попадают в категорию поздних генов в отличие от ранних генов , таких, как ген N, детерминирующий репликацию ДНК. Была проделана большая работа по выяснению роли этих различных генов и последовательности их транскрипции. Установлено, что разные гены транскрибируются с одного или с другого конца цепи и транскрипция таким образом идет в противоположных направлениях (фиг. 72) [496]. [c.278]

На основании этих опытов можно заключить, что псевдоревертанты являются не истинными ревертантами, а двойными мутантами типа F O F 1, имеюищми дикий фенотип, т.е. способными формировать негативные колонии на Е. соН К(Х,). Мутация F 1 картируется в В-цистроне очень близко к F O. Эти две мутации являются внутри-генными и взаимно-супрессорными. [c.71]

Появление максимума может быть обусловлено большей вероятностью гибели мутированных клеток или увеличением вероятности реверсии мутированных клеток к дикому состоянию. Согласно второй гипотезе, в основе реверсии мутантов к дикому состоянию может лежать, например, усиление репарационных процессов вследствие задержки деления или снятия генетического дефекта супрессорными мутациями. Если бы появление максимума бьхло обусловлено увеличением вероят [c.307]

Реверсия влияет на урожай вируса после заражения при непермиссивной температуре, но в этом случае потомство имеет фенотип дикого типа. Дополнительно к обратной мутации в исходном сайте (реверсионная мутация) мутация в другом сайте генома может случайно привести к утрате ts-фенотипа (супрессорная мутация . Супрессорная мутация может происходить в том же самом, что несет ts-повреждение, или в ином гене. Скорость реверсии колеблется, но обычные частоты для мутантов вируса гриппа составляют 10 —10 4, что значительно превышает те меры предосторожности, которые необходимы при пассировании пулов мутантов без частых проверок сохранения ts-фенотипа. С. S holtissek и S. Spring [234] изучали скорость реверсии ts-мутантов с повреждениями в различных сегментах РНК. Авторы обнаружили, что скорости реверсии для сегментов 1, 2, 3 и 5 (гены, кодирующие три белка Р и NP) превышают скорости реверсии для сегментов 4 и 6, кодирующих гликопротеиды НА и NA соответственно. Сравнительное изучение других групп ts-мутантов не проводилось. [c.193]

Дополнительная трудность комплементационного анализа возникает из-за супрессии ts-фенотипа другим сегментом, предположительно кодирующим белок, который дополняет функциональный деф зкт в сегменте, несущем ts-повреждение. Подобная экстраген-ная супрессия впервые была замечена у ts-мутантов реовируса [201] сейчас имеется несколько примеров и с мутантами вируса гриппа. М. Tolpin и соавт. [267] обнаружили, что мутация в гене РА рекомбинантного штамма вируса гриппа человека подавляет экспрессию 18 фенотина гена РВ2. Этот пример супрессорной [c.195]

Последовательное применение генетического анализа и рас-щрфровка первичной структуры генов вскрыли неожиданный факт перекрывания генов у некоторых вирусов. Так, у ряда РНК-содержащих бактериофагов Е. соИ (R17, f2, MS2, Q ) были известны всего три гена репликазы, белка оболочки и созревания вирусной частицы. Мутации каждого гена, например у фага MS2, некомплементарны между собой, но комплементарны мутациям остальных двух генов. После расшифровки полной нуклеотидной последовательности РНК этих фагов на ней были локализованы все три гена. Однако обнаружена и четвертая группа мутаций, блокирующих лизис зараженной клетки. Эти мутации образовали самостоятельную группу комплементации, т. е. на основе функционального критерия аллелизма они были отнесены к самостоятельному гену, для которого уже не оставалось места на РНК бактериофага. Тем не менее путем исследования белкового синтеза in vitro с использованием РНК фага в качестве и РНК было выявлено реальное существование белка L размером в 75 аминокислотных остатков, кодируемого этим новым геном. Локализовать его удалось благодаря тому, что один из мутантов по гену лизиса нес нонсенс UGA, идентифицированный по взаимодействию с соответствующими супрессорными тРНК. У этого мутанта была расшифрована первичная структура РНК. Оказалось, что UGA возник в результате замены С на U в кодоне GA (Apr). Таким образом была установлена фаза считывания триплетов в гене ли- [c.404]

Смотреть страницы где упоминается термин Мутанты супрессорные sus : [c.89] [c.89] [c.256] [c.50] [c.155] [c.155] [c.330] [c.431] [c.432] [c.432] [c.457] [c.213] [c.99] [c.319] [c.91] [c.32] [c.187] [c.196] [c.232] [c.89] [c.187] [c.196] [c.232] [c.46] [c.88] [c.158] [c.96]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология