Типы мутантов

Таблица 2. Результаты дисперсионного анализа (двухфакторного) значения гене типа мутантов и стадии развития растений для содержания хлорофилла и каротиноидов (выращивание в поле 1973 г. и лаборатории искусственного климата 1974 г.)

Таблица 15.2. Методы отбора и идентификации разных типов мутантов

Для того чтобы использовать мутагенез в генетических экспериментах с бактериями, необходимо согласованно провести ряд последовательных этапов работы, а именно 1) определить, какой тип мутанта соответствует цели исследования 2) выбрать наиболее подходящий мутаген для индукции желаемой мутации 3) создать условия для выражения новой мутации 4) произвести обогащение по желаемому мутанту для повышения вероятности его выделения 5) обнаружить новый мутант соответствующими прямыми и непрямыми методами отбора 6) изучить свойства мутанта и 7) картировать локус новой мутации, т. е. определить ее расположение в бактериальном геноме. [c.8]

Дайте определение следующих типов мутантов [c.308]

С помощью подобных приемов удается накапливать и выделять мутантов с разного рода дефектами с нарушениями процессов транспорта или использования субстрата, с дефектами промежуточного обмена, с повышенной чувствительностью к температуре ( условно летальные мутанты). Позднее мы опишем технику выделения других мутантов с измененной регуляцией метаболизма. В табл. 15.2 приводятся краткие сведения о методах отбора и идентификации различных типов мутантов, в том числе и мутантов с дефектами регуляции. [c.451]

Для сорта Белоцерковская 198 характерен довольно узкий размах изменчивости (в контроле, буфер нри pH 5,7 — два типа мутантов). Однако в отдельные годы в некоторых вариантах воздействия мутагенами удается выделить до 11 типов [6]. В данном эксперименте спектры изменчивости, индуцированной НАМ, растворенными в буфере, ограничивались 4—5 типами мутантов. При использовании растворителей в ряде случаев наблюдали расширение спектра (до 6—7 типов). Так, из И вариантов с примене- [c.67]

При анализирующем скрещивании в этом случае результаты также будут другими, а именно 1 Wdt wdt (неувядающее нормальное растение с оранжевой окраской тычинок и мякоти плода) и 1 wdT wdt (увядающее карликовое растение с нормальной окраской). Получится всего 2 генотипа и 2 фенотипа, такие, как исходные родительские формы (типа мутанта-мар-кера и мутанта с изучаемым геном). Эти данные будут говорить [c.134]

Частота различных типов мутантов (в % к общему числу мутантов) у гороха сорта Ползунок [c.133]

Типы мутантов с ценными хозяйственными признаками, полученные при воздействии химических мутагенов [c.214]

У мутантов, имеющих более одной аминокислотной замены, замененные аминокислоты никогда не бывают соседними. Правда, известен особый тип мутантов фага Т4, для которых ситуация прямо противоположна, но это специальный случай, и речь о нем пойдет дальше. [c.206]

Если нужно получить мутант, генетический дефект которого нельзя компенсировать добавками питательных веществ (например, дефекты ферментов, участвующих в репликации ДНК и РНК, дефекты в каком-либо элементе белоксинтезирующего аппарата), его следует искать среди условно летальных мутантов, которые жизнеспособны лишь при определенных условиях. Примерами таких мутантов могут служить температурочувствительные мутанты и штаммы, несущие супрессорные нонсенс-мутации. В табл. 13.1 приведены свойства мутаций различных типов она может служить ключом для выбора наиболее подходящего типа мутанта в соответствии с определенной целью. [c.10]

После центрифугирования суспензии при 5000 в течение 5 мин осадок ресуспендируют в среде, пригодной для дальнейшего выращивания и выявления желаемого типа мутантов. Поскольку обработка азотистой кислотой вызывает гибель значительного числа клеток, следует определить степени выживания клеток путем посева приблизительных разведений на питательный агар (разд. 13.9.12) до и после обработки. Оптимальная степень выживания находится в пределах между 0,1 и [c.23]

При обработке НАМ в нейтральной среде статистически значимое увеличение генетического эффекта при использовапии растворителей наблюдали также далеко не во всех случаях (в 15 вариантах из 58) [5]. Однако нри сравнении различных pH на генетическую активность НАМ можно заметить ряд отличий. Во-первых, при pH 7,0 наиболее часто превышение мутагенной активности НАМ в сравнении с обработкой в буфере отмечали при использовании в качестве растворителей ДО и ДМФА. В данном исследовании при обработке НАМ в кислой среде статически значимое увеличение генетического эффекта наблюдали также в присутствии ДО. По сравнению с нейтральной средой нри pH 5,7 СЭ более часто усиливал мутагенную активность НАМ, хотя различия только приближались к достоверным. Во-первых, при pH 7,0 и применении растворителей спектры изменчивости были значительно шире (до 11 типов мутантов), чем при pH 5,7 (не более 7 типов), что, по-видимому, связано не только с разными внешними условиями, дифференцирующ,ими потенциальные изменения, индуцированные мутагенами, но и с более высокой аберрационной способностью НАМ при pH 5,7 [2], приводящей к гибели некоторых типов мутантов. [c.69]

Из рис. 5—7 видно, что, во-первых, есть четкие различия но динамике потери воды между мутантами и исходными сортами. Во-вторых, тип мутанта в большей степени определяет, по-видимому, степень водоудерживающей силы, чем сортовые особенности. У мутантов — компактум № 25 и № 12— несмотря на то что они получены у разных сортов, наблюдали сходную динамику потери воды срезанными листьями по срокам вегетации, и они теряли значительно быстрее воду, чем исходные сорта. [c.113]

Для того чтобы осуществить скрещивание двух мутантов фага, применяется одновременная адсорбция двух гнтаммов фагов на бактериях. Необходимо создать такие условия, чтобы различные частицы фага произвели инъекцию своей ДНК в одну и ту же клетку. С этой целью берут значительный избыток числа частиц фагов над числом клеток в миллилитре и, кроме того, в среду, в которой происходит заражение, добавляется агент, тормозящий синтетические процессы в клетках (K N). Это делается для того, чтобы инъекция ДНК первой частицей фага не помешала вторичной инъекции следующим фагом. Когда метаболические процессы в клетке не остановлены, подобное взаимное влияние имеет место. Когда стадия заражения прошла, культура бактерий осво--бождается от избытка фагов с помощью центрифугирования или с помощью имунной антисыворотки и переносится на нормальную питательную среду, на которой идет созревание и лизис клеток. Последний этап — нанесение культуры на чашки Петри, специально приготовленные для отыскания рекомбинантов. Вся процедура достаточно проста. В процессе созревания одного поколения фагов рекомбинационному процессу подвергается практически каждая хромосома фага, а часто происходят и тройные рекомбинации (Херши),которые обнаружатся, если провести заражение клеток тремя типами мутантов, отличающимися по трем разным локусам. Последний факт показал не только, что в процессе генетической рекомбинации участвуют все молекулы ДНК фага, но более того, — что рекомбинация повторяется многократно с каждой молекулой в течение одного цикла созревания. [c.368]

Теория лизогении была подтверждена генетическими экспериментами, т. е. нахождением особого типа мутантов и их локализацией на генетической карте. Область хромосомы X содержит центральный сегмент С, управляющий лизогенизацией вируса и рядом цистронов, являющихся структурными генами, управляющими синтезом белков фага. Способность к лизогенизации полностью утрачивается в результате точечных мутаций С+ Ср. Исследование рекомбинантов показывает, что все эти мутации расположены в маленьком сегменте внутри С. Этот сегмент обозначается символом ira (иммунитет). Локус im и есть ген-регулятор, управляющий синтезом специфического репрессора белков фага. Изучая гетерозиготы, содержащие обе аллели С+ и j, мы убеждаемся в том, что мутант j рецессивен.. [c.500]

Биосинтез лизина и гомосерина различными типами мутантов [c.160]

В нашем опыте химические мутагены по числу индуцированных морфологических мутантов не имели преимущества перед -л тгами. Аналогичные результаты получены В. И. Молиным 17] на яровой пшенице при использовании -лучей и ЭИ, Частичное снятие повреждающего действия высоких доз облучения в сравнении с дозой 6 кр не оказало влияния на изменение спектра летальных и жизнеспособных хлорофильных мутантов. Число типов мутантов было одинаковым — 12, [c.133]

Оценивая данные, полученные по спектру мутантов, надо отметить, что в вариантах с облучением, особенно при дозах 20 и 40 кр с дополнительной температурной обработкой, мутантов было значительно меньше, чем при воздействии химическими мутантами. В вариантах с облучением совсем не обнаружены такие типы мутантов, как тонкостебельные, чечевицеобразные, с серой пятнистостью на листочках очень редко встречались толстостебельные, узколистные, с воронкообразными листочками и деформированными цветками формы. Под действием НММ и ЭМС вышеупомянутые типы мутантов возникали чаще, но не намного. [c.134]

При реципрокных скрещиваниях обоих типов мутантов гибридные семена во всех случаях имели желтую окраску семядолей и гладкую поверхность, причем доминантный признак отцовской формы проявлялся на материнских растениях в год скрещивания. [c.179]

Сорт Число изученных семей Гастота семей Число типов мутантов [c.233]

Демерец исследовал также механизм приобретения мутантами бактерий устойчивости к стрептомицину (фиг. 69). С помощью флуктуационного теста ему удалось показать, что устойчивые к стрептомицину мутанты Str Е. соН возникают спонтанно. Однако в отличие от пенициллина стрептомицин не дает ступенчатого обучения . Если на чашку с агаром, содержащим 100 мкг/мл стрептомицина, высеять чувствительную к стрептомицину культуру Е. oli Str , то на такой чашке могут образоваться колонии лишь около 1 бактерии из 10 высеянных. Если затем выделить клетки из некоторых из этих немногих выживших колоний, размножить их и высеять бактерии таких изолятов первой ступени на ряд чашек, содержащих возрастающие концентрации стрептомицина, то среди этих бактерий выявится по крайней мере три разных класса мутантов Str. Это будут а) мутанты с низкой устойчивостью, способные выдержать лишь 100 мкг/мл стрептомицина, т. е. ту концентрацию антибиотика, при которой они отбирались, и погибающие при более высоких концентрациях стрептомицина б) мутанты с промежуточной устойчивостью, которые могут выдержать до 500 мкг/мл стрептомицина в) мутанты с высокой устойчивостью, которые могут выдержать еще более высокие концентрации стрептомицина на чашке. При одной ступени отбора на 100 мкг/мл стрептомицина все эти три типа мутантов появляются примерно с одинаковой частотой. Поэтому Демерец сделал вывод, что признак Str контролируется тремя или большим количеством бактериальных генов sir, обладающих разной силой действия, причем частоты мутирования каждого из этих генов примерно одинаковы и составляют 10 мутаций на одну клетку на генерацию. Мутация в любом из этн х генов приводит [c.150]

Другой тип мутантов, сыгравших большую роль в развитии генетики фагов, был открыт Лурия, который еще в период зарождения генетики бактерий как науки изучал мутации Е. соН Топ - Ton т. е. от чувствительности к устойчивости по отношению к фагу Т1 (гл. VI). Аналогичные спонтанные мутации приводят к тому, что из чувствительных к фагу Т2 клеток Е. соН (Tto ) дикого типа образуются мутанты Tio ". Устойчивость этих бактериальных мутантов обусловлена структурной модификацией их клеточной оболочки, в результате которой не происходит стерео-специфической фиксации органов адсорбции отростка фага Т2 на соответствующих рецепторах клетки. В результате фаг уже не может присоединиться к клетке, и, следовательно, ДНК фага не может быть инъецирована внутрь клетки хозяина. Почему же тогда, несмотря на то что бактерии могут мутировать в устойчивую к фагу форму, в природе до сих пор существуют чувствительные к бактериофагу штаммы Почему в результате естественного отбора чувствительные формы не заменились устойчивыми Почему бактериальные вирусы до сих пор не лишились всех подходящих хозяев и не вымерли в результате этого Ответить на эти вопросы, как и на многие другие вопросы, касающиеся проблем эволюции, не так просто, однако одной из причин сохранения в природе бактериальных штаммов, чувствительных к фагу, могут быть открытые Лурия в 1945 г. мутанты с измененным спектром литического действия. Такие мутантные фаги с измененным спектром литического действия способны преодолеть устойчивость нечувствительных к фагу мутантов бактерий благодаря небольшим изменениям структуры органа адсорбции (по сравнению с фагом дикого типа). Эти структурные изменения позволяют мутантным органам адсорбции осуществлять стереоспецифическую реакцию с рецепторами мутантной фагоустойчивой бактерии, несмотря на модификацию клеточной оболочки, препятствующей присоединению фага дикого типа. Однако появление мутантов с измененным спектром литического действия ни в коей мере не может положить конец борьбе за существование, так как бактериальный штамм, устойчивый к фагу дикого типа и чувствительный к мутантному фагу с измененным спектром литического действия, может образовывать сверхустойчивый бактериальный мутант, устойчивый к обоим фагам. На появление сверхустойчивого бактериального штамма фаг, чтобы не оказаться побежденным, может ответить образованием мутанта со сверхизмененным спектром литического действия. Таким образом, сосуществование в природе бактерий и бактериальных вирусов поддерживается за счет тонкого мутационного равновесия, спасающего обоих антагонистов от полного вымирания. [c.280]

В последние годы были проведены обширные исследования по изучению процесса сборки крупных фагов и фагов среднего размера, и особенно генетических основ формирования разнообразных фаговых компонентов. Для этих исследований в основном были использованы два типа мутантов фага Т4 и другие фаги тегдпературочув-ствительные мутанты (ts), которые размножаются при 25° С, но не могут размножаться при 42° С, и мутанты, специфичные по хозяину (am) (см. гл. IX, разд. В), которые размножаются в клетках Е. oli R 63, но не способны размножаться в клетках Е. oli В [110, 111, 238, 267,545, [c.260]

С культивируемыми клеточными линиями млекопитающих можно проводить генетические эксперименты, используя подходы, аналогичные тем, которые применяются при генетическом исследовании микроорганизмов. Например, можно отобрать температурочувствительные мутанты, растущие при 34° С, но не при 40°С. При обработке мутагенами культуры клеток яичника китайского хомячка удалось получить целый ряд мутантных линий с фенотипом чувствительности к температуре. Клетки некоторых из этих линий не растут при 40°С из-за нарушения способности к синтезу белков. Этот же дефект проявляется и в опытах in vitro при 40°С. Однако мутантные клетки приобретают способность к росту при 40°С на среде с 10-100-кратным превышением концентрации одной из 20 содержащихся в обычной среде аминокислот. Для каждого типа мутантов спасительным оказывается избыток только одной определенной аминокислоты. На основании ваших знаний о механизме биосинтеза и об особенностях функционирования белков ответьте на вопрос [c.64]

Таким образом, рассмотренные выше подходы надежно свидетельствуют о существовании в хроматине гиперчувствительных областей ДНК. Они позволяют также выявить корреляцию между транскрипцией и возникновением гиперчувствительных участков вблизи точки инициации транскрипции. В то же время следует помнить, что обнаружение корреляции еще не означает установления точной причинно-следствен-ной связи событий. Лишь в некоторых случаях с помощью генетического анализа удалось показать, что последовательности гиперчувствительных участков ДНК действительно необходимы для инициации транскрипции. Наиболее интересен пример транскрипции гена Sgs4 Drosophila, о котором упоминалось в гл. 9. В 5 -фланкирующей и структурной областях этого гена было выявлено пять гиперчувствительных участков (рис. 16.12). Эти участки обнаруживаются только в ДНК, выделенной из ядер клеток слюнной железы в стадии развития, сопровождающейся активной экспрессией гена Sgs4. Известны мутанты, которым не свойственна экспрессия этого гена. Соответствующие мутации картируются в 5 -фланкирующей области гена. У двух типов мутантов делетированы наиболее удаленные гиперчувствительные участки ДНК (рис. 16.12). В случае наиболее отдаленной делеции (Вег) налицо практически полное отсутствие транскрипции гена Sgs 4. В хроматине клеток слюнной железы у мутантов Вег обычными методами в районе гена [c.222]

Начиная поиски необходимого мутанта, прежде всего следует четко представлять, какой именно тип мутанта соответствует поставленной задаче. Например, если нужно получить мутант с устойчивым генетическим маркером, позволяющим идентифицировать мутантный щтамм на всех этапах эксперимента, следует искать щтамм с неревертирующей мутацией, захватывающей группу смежных генов, такой, как делеция. Вместе с тем, если стоит задача выявить взаимосвязь между структурой какого-то белка и его функцией, наилучщими окажутся точковые мутации с заменой оснований, позволяющие отбирать ревертанты. Мутации с заменой оснований ча- [c.9]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология