Дрожжи мутанты d

Дается сводка современного состояния вопроса относительно процессов, протекающих в митотическом цикле дрожжевых клеток. Приводятся схемы циклов для почкующихся и делящихся дрожжей с указанием сроков синтеза ДНК, деления ядер и почкования (или деления) клеток. Показаны различия в структуре циклов у почкующихся и делящихся дрожжей, которые заключаются в сроках синтеза ДНК. Описываются картины разного типа клеточного деления у дрожжей. Приводятся также данные по репродуктивному возрасту клеток, синтезу ферментов в митотическом цикле, а так/ке данные о получении мутантов с нарушениями различных процессов митотического цикла. [c.223]

ПЕТИТ-ШТАММЫ. Мутанты дрожжей с нарушенной функцией митохондрий. [c.524]

На заключительной стадии репликации кольцевых молекул часто остается одно или несколько зацеплений цепей исходной молекулы друг за друга. Это приводит к тому, что двуцепочечные кольца дочерних молекул также оказываются зацепленными, образуют катенан (рис. 35). ДНК-гираза может расцепить зацепленные кольца, используя свою способность вносить временный двуцепочечный разрыв. Такая активность гиразы действительно существенна для репликации ДНК, поскольку в мутантах по гиразе на непермиссив-ной температуре наблюдается нерасхождение дочерних молекул кольцевых ДНК после репликации. Важно отметить, что топоизомеразы необходимы для завершения репликации не только кольцевых молекул, но и очень длинных линейных эукариотических хромосом две очень длинные дочерние молекулы не могут разойтись достаточно быстро, поскольку после репликации оказываются запутанными подобно катенанам, образующимся на заключительной стадии репликации кольцевых ДНК. Действительно, мутанты эукариот (дрожжей) с нарушенной топоизомеразой II дефектны по расхождению дочерних хромосом в митозе. [c.60]

Под влиянием у-лучей у винных дрожжей повышается бродильная, у хлебопекарных— мальтазная активность. Если дрожжи облучать УФ-лучами, то они теряют способность синтезировать лейцин, изолейцин и валин. Таким образом, были получены мутанты, не образующие изоамилового и изобутилового спирта. При обработке хлебопекарных дрожжей УФ-лучами и этнленимииом селекционированы мутанты, превышающие в 2—5 раз контрольные дрожжи по мальтазной активности. [c.202]

Процедура вьщеления ДНК в клетки дрожжей довольно проста. Обычно целлюлозную клеточную стенку удаляют обработкой ферментами, получая так называемые сферопласты. Их инкубируют с ДНК в присутствии СаС и полиэтиленгликоля. Мембрана при этом становится проницаемой для ДНК. Дальнейшая ин( а-ция сферопластов в среде с агаром восстанавливает клеточную стенку. Селекция дрожжевых клонов, трансформированных рекомбинантными плазмидами, основана на применении в качестве клеток-хозяев определенных мутантов, не способных расти на среде, в которой отсутствует тот или иной питательный компонент. Векторная плазмида содержит гены, которые при попадании в клетку-хозяина придают ей этот недостаюший признак. Трансформанты легко отбираются по их способности давать колонии на обедненной среде. Применяя приемы, аналогичные использовавшимся при клонировании в бактериях, удается достичь синтеза чужеродных белков в дрожжевых клетках. Эти клетки подобно В. subtilis секретируют большое количество белка во внеклеточную среду, что используется также для секреции чужеродных белков, например интерферона человека (с. 43). [c.125]

Изучение изменчивости патогенных бактерий привело к открытию вакцин и созданию современных методов диагностики инфекционных заболеваний. Использование экспериментального мутагенеза позволило соз гать высокоактивные расы и мутанты продуцентов антибиотиков. Литература по изменчивости кишечных бактерий (Г. П. Калина [116] и Д. Г. Кудлай [152]), дрожжей (В. И. Кудрявцев [154, 155]), анаэробных целлюлозных бактерий (М. Н. Ротмистров [220]) позволяет считать исследования в этой области очень важными. Нельзя сомневаться, что исследования по изменчивости и селекции микробов, разрушающих синтетические загрязнители промышленных стоков, окажутся не менее плодотворными. [c.99]

Из сыворотки получают не толко белковые продукты, но и — путем ферментации — сырье для химической промышленности (например, этанол). Путем химического гидролиза лактозы с последующим удалением глюкозы из раствора с помощью ферментации можно получать галактозу. Альтернатив ный биологический путь — использование мутантных дрожжей, лишенных i -галактозидазы. Такие мутанты сохраняют способность к гидролизу лактозы и используют образующуюся глюкозу в качестве источника углерода, В результате гидролиза лактозы фильтрат становится более сладким на опытных установках такой гидролиз осуществляют с помощью иммобилизованной i -галактозидазы (гл. 4). Гидролизованный фильтрат не только находит применение в пищевой промышленности, но [c.277]

Межвидовые и внутривидовые тетраплоидные гибриды, синтезированные йй основе ауксотрофных мутантов рас винных дрожжей - Ленинградский S.oviformis и С-23 S.vini - выгодно отличаются от исходных [c.51]

В процессе приготовления питательной среды для культивирования производственных штаммов ауксотрофных мутантов, обладающих способностью к сверхсинтезу аминокислоты лизина, в качестве источника углерода обычно используют смеси, включающие уксусную кислоту и свекловичную мелассу, в качестве источника азота — соли аммония, мочевину, кукурузный экстракт, гидролизаты дрожжей. Кроме дефицитных аминокислот, которые не синтезируются клетками мутантов, в питательную среду также добавляют необходимые для жизнедеятельности микроорганизмов макро- и микроэлементы (Р, Mg, Ре, Са, Мп и др.) и витамины (витамины группы В, биотин и др.). В процессе культивирования микроорганизмов обеспечивается подача стерильного воздуха с помощью специальных турбинных мешалок, для предотвращения вспенивания субстрата и клеточной суспензии в среду культивирования добавляется пе-ногаснтель. Схема технологической линии по производству лизина показана на рис. 7.4. [c.277]

Путем сегрегации получены повью типы мутаптов Sa h. erevisia , проявляющие признаки недостатка дыхания. Только некоторые из них являлись аллельными по отношению к ранее известным мутантам. Было отмечено пять новых генов, ответственных за фенотип с недостаточностью цитохромов а+аз и 6, а также четыре новых гена, мутации которых вызывают недостаток только цитохромов а+аз [320]. Способность дрожжей к пигментации коррелирует с присутствием дыхательных процессов, в то время как повреждение окислительного фосфорилирования, отсутствие цитохрома а+аз) и отсутствие дыхательной активности не препятствуют образованию спор [244]. [c.50]

Хорошо известно, что дрожжи, культивируемые в условиях ферментации, имеют некоторые отличия от дрожжей, культивируемых в аэробных условиях. Эти различия касаются и цитохромной системы. Следовательно, казалось целесообразным определить способность к реактивации большого числа видов дрожжей, различающихся в преобладании того или другого типа энергетического обмена, т. е. дыхания или ферментации. Одновременно исследовали у этих видов дрожжей цитохром-ные спектры. Получили следующие результаты. Все виды с хорошей способностью к реактивации обладали выраженным дыханием и ферментацией. Дрожжи со сниженной дыхательной активностью не реактивировались. Реактивация оказалась невозможной у видов дрожжей с недостаточностью цитохромной системы независимо от того, наблюдалась ли она от природы (штаммы, относящиеся к группе Sa haromy es arlsbergensis) или же у искусственно полученных мутантов, лишенных цитохром оксидазы. [c.222]

Все рассмотренные случаи супрессии были исследованы на примере Е. соИ. У других бактерий (преимущественно у S. typhimurium) также были выделены похожие мутанты, и это свидетельствует о сходстве ситуаций во всех изученных случаях. Значительно меньше известно о распространенности и возможности супрессии нонсенс-и миссенс-мутаций у эукариот. Супрессоры охра- и ам-бер-мутаций, включающие тирозин, серин или лейцин, были выделены у дрожжей, причем каждый супрессор узнает только свой кодон. Возможно, это достигается благодаря использованию модифицированных оснований в антикодонах охра-супрессоров. [c.100]

Эксперименты с делеционными мутантами гена тимидин-киназы (ТК) вируса герпеса показали, что область между положениями — 100 и — 60 контролирует частоту инициации. В отсутствие этого участка частота инитшя-ции в обычной стартовой точке Псшает до 2% от первона-чального уровня. Если делетируется блок ТАТА, инициация продолжает происходить, но при этом снижается точность узнавания первоначальной стартовой точки. Аналогично в случае глобиновых генов млекопитающих делеция области размером 20-30 п. н. с центром примерно около положения — 70 вызывает значительное снижение транскрипции. Для некоторых генов дрожжей также показано, что последовательность, расположенная влево от стартовой точки, играет важную роль. В случае гистоновых генов морского ежа рассматриваемая последовательность расположена еще дальше от стартовой точки — между положениями — 139 и —111. Данные последовательности не активны, если область, предшествующая стартовой точке, делетирована, но, как правило, они значительно увеличивают частоту инициации. [c.152]

Удобный объект для изучения сплайсинга-температурочувствительные мутанты дрожжей, у которых не удаляются интроны, и в ядре накапливаются предшественники тРНК, имеющие прерывистое строение. Процессинг фланкирующих последовательностей может происходить обычным способом. Молекулярный механизм возникновения этого дефекта неясен, но известно, что он специфичен для прерывистых генов, поскольку тРНК, кодируемые непрерывными генами, могут созревать и транспортироваться в цитоплазму. [c.318]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология