Элюирование в жидкостной градиент растворителей

В обращенно-фазовой жидкостной хроматографии удерживание изменяется экспоненциально в зависимости от состава подвижной фазы, т. е. график зависимости 1п от ф представляет практически прямую линию (см. разд. 3.2.2). Если же мы рассмотрим удерживание каждого индивидуального компонента, то увидим, что оптимальные условия элюирования соответствуют линейному градиенту (линейный градиент силы растворителя, рис. 6.2,6, см. разд. 5.4). И действительно, при использовании в качестве подвижной фазы смесей ацетонитрил — вода оптимальным является линейный градиент. На рис. 6.7, а представлен пример типичного изменения удерживания некоторых низкомолекулярных компонентов в зависимости от состава подвижной фазы в этой системе. На графике зависимости пк от Ф получаются практически прямые липни (см. также разд. [c.321]

Разделение сложных смесей методом колоночной хроматографии в некоторых случаях удобнее проводить при градиентном элюировании [6, 13, 22а, 37] (см. разд. 1.3.3). В ионообменной хроматографии широко используется программирование потока элюентов и их градиента в настоящее время этот метод благодаря введенным в последнее время привитым фазам также применяется в жидко-жидкостной хроматографии i[3, 20]. Системы формирования градиента, в которых растворители смешиваются при нормальном давлении, относительно недороги и легко изготавливаются. [c.53]

Наиболее полезным вторичным параметром для оптимизации селективности в жидкостной хроматографии с программированием элюента является природа модификатора (модификаторов) в подвижной фазе. Селективность разделения можно менять путем выбора различных растворителей — чистых растворителей для двойных и тройных градиентов, смешанных систем для псевдобинарных градиентов. Как и в изократической ЖХ, в данном случае также возможно применение различных модификаторов, приводящее к изменению селективности при сохранении оптимальных условий элюирования всех хроматографируемых компонентов. Эта возможность оптимизации селективности в жидкостной хроматографии с программированием элюента обсуждается ниже. [c.340]

Градиентное элюирование в жидкостной хроматографии играет такую же роль, что и программирование температуры в газовой хроматографии. Основное назначение обоих способов — получение хорошего разделения за возможно более короткое время, при этом форма (и ширина) пиков практически одинакова на всем протяжении разделения при правильном выборе градиента. Состав растворителя и форму градиента подбирают в соответствии с поставленной задачей и составом разделяемого образца. [c.40]

На большинстве же приборов для градиентного элюирования в жидкостной хроматографии при высоком давлении можно готовить градиенты только из двух элюентов. Градиентное элюирование усложняется из-за различия в вязкости используемых растворителей, различия в сжимаемости и неидеального поведения смесей. Выбранная система элюентов должна быть испытана на воспроизводимость приготовления градиентов и постоянство подачи при заданной программе. [c.146]

В дальнейшем оба процесса (создание градиента растворителей и разделение образца на группы) были осуществлены в одной хроматографической колонке (см. рис. 1, б). Реализация этого способа элюирования подбором растворителей и других условий разделения с использованием жидкостного хроматографа позволила предложить методику разделения мальтеновой части нефтяных остатков на три группы [2, 4]. [c.6]

Выбор сорбента и колонки для ГВЭЖХ также имеет свои особенности. Прежде всего, колонка должна быстро приходить в равновесие с растворителем постоянно изменяющегося состава как в процессе градиентного элюирования, так и при возвращении к исходному составу растворителя при подготовке колонки к новому анализу. Если для старых колонок в жидкостной хроматографии, работавших однократно, градиент формировался и использовался один раз, после чего сорбент в колонке заменялся свежим, и это позволяло применять силикагель и оксид алюминия, то для ГВЭЖХ эти сорбенты не подходят, так как уравновешивание их со слабым растворителем после градиента слишком длительно. Однако современные обращенно-фазные и другие привитые сорбенты достаточно быстро приходят в равновесие с исходным растворителем после окончания градиентного элюирования, что позволяет успешно использовать их для этих целей. Время, необходимое для уравновешивания колонки, для каждого сорбента устанавливается экспериментально по достижению постоянства времени удерживания веществ, входящих в анализируемую смесь. Это время различно как для разных сорбентов, так и для разных по составу растворителей, и может колебаться от десятков до нескольких сотен минут. [c.66]

В различных видах жидкостной хроматографии к разряду основных могут относиться различные параметры (см. табл. 3.10). Термин градиентное элюирование обычно применяют к хроматографическим экспериментам, в которых в течение анализа изменяется состав подвижной фазы. Часто используют градиент концентрации соли или pH, особенно в ионообменной хроматографии [26]. Однако наиболее популярны такие виды градиентного элюирования, которые предусматривают изменение состава подвижной фазы. Обычно при этом происходит добавление сильного растворителя В) к слабому растворителю (Л). Типичные примеры такого рода градиентов — это градиенты воды (растворитель А) с метанолом, ацетонитрилом или тетрагидрофураном (растворитель В) в ОФЖХ. В нормально-фазовой жидкостной хроматографии к н-гексану [c.240]

Наибольшее распространение при анализе флавоноидов в настоящее время получила обращенно-фазная ВЭЖХ. Как правило, в этом случае используют колонки RP- s или RP- is, размером 4,5 (4,6) мм X 125 или 250 мм, размер зерен сорбента 5—7 мкм или меньше. В зависимости от анализируемого материала в качестве элюента используются градиенты на основе воды, метанола и уксусной кислоты уксусной кислоты и ацетонитрила или тетрагидрофурана муравьиной кислоты и метанола уксусной кислоты, ацетонитрила, фосфорной кислоты и воды [14, 34]. Недавно для высокоэффективной жидкостной хроматографии экстрактов лекарственных растений предложены системы растворителей, позволяющие проводить анализ в режиме изократического элюирования [1]. Авторы успешно использовали систему 2-пропа-нол тетрагидрофуран вода для разделения гликозидов и 1-про-панол тетрагидрофуран лимонная кислота для разделения агликонов. [c.103]