Виды жидкостной хроматографии

Виды жидкостной хроматографии [c.430]

Основы тонкослойной хроматографии. Метод тонкослойной хроматографии является одним из видов жидкостной хроматографии, аналогичным методу хроматографии на бумаге. Но в этом методе в качестве носителя используются такие сорбенты, как оксид алюминия, силикагель, ионообменные смолы и т. д., нанесенные на пластинку. Перемещение жидкости в слое носителя происходит так же, как в колоночной хроматографии. Поэтому при разделении веществ в тонком слое носителя можно использовать принципы адсорбционной, распределительной и ионообменной хроматографии, механизм которых описан выше. В ТСХ используют следующие хроматографические системы жидкость — твердый сорбент и жидкость — жидкость — твердый сорбент. [c.58]

Подвижная фаза (растворитель) является одной из составляющих системы жидкость — жидкость, ответственной за процесс разделения в распределительной хроматографии. Поэтому, кроме обычных требований, предъявляемых к растворителям в других видах жидкостной хроматографии (химической инертности по отношению к используемым неподвижным фазам, носителям и компонентам разделяемых смесей, низкой вязкости, чистоты, совместимости с детекторами, доступности и дешевизны), в распределительной хроматографии к подвижной фазе предъявляются и некоторые специфические требования. [c.66]

В эту номенклатуру можно также ввести информацию о природе неподвижной фазы. Обычно это делается посредством вставки в аббревиатуру одной или двух букв. Так, ЖТХ и ЖЖХ — два вида жидкостной хроматографии (ЖХ, подвижная фаза — жидкость), различающиеся тем, что в первом случае неподвижная фаза твердая (Т), а во втором — жидкая (Ж). [c.30]

Гель-проникающая хроматография. Особым видом жидкостной хроматографии является ГПХ. [c.99]

Селективность подвижной фазы изменяют путем замены растворителя В, использованного для получения необходимой элюирующей силы, на растворитель, относящийся к другой группе, и подбора такой его концентрации, которая обеспечивал бы туже элюирующую силу подвижной фазы. В различных видах жидкостной хроматографии решение этой задачи имеет свои специфические особенности, рассмотренные в соответствующих разделах. [c.131]

Как и в случае газовой хроматографии существует несколько систем сопряжения с масс-спектрометром. Эти системы, естественно, должны обеспечивать эфс )ективный перенос пика растворенного вещества, иметь высокую чувствительность при степени извлечения образца более 30% и давать возможность выбора нужного вида жидкостной хроматографии и режима работы масс-спектрометра. Такая система должна гарантировать быстрый, надежный анализ при минимальных требованиях к подготовке оператора. Необходимо таюке обеспечить возможность быстрого и полного удаления растворителя, примененного в качестве подвижной фазы наконец, перенос пика должен быть воспроизводимым. [c.174]

Получение Н.к. В клетках Н.к. связаны с белками, образуя нуклеопротеиды. Выделение Н.к. сводится преим. к очистке их от белков. Для этого препараты, содержащие Н.к., обрабатывают ПАВ и экстрагируют белки фенолом. Послед, очистка и фракционирование Н.к. проводятся с помощью ультрацентрифугирования, разл. видов жидкостной хроматографии и гель-электрофореза. Для получения индивидуальных Н.к. обычно используют разл. варианты последнего метода. [c.299]

Тонкослойная хроматография (ТСХ) - вид жидкостной хроматографии, в котором подвижная фаза жидкая, а разделение происходит на слое сорбента, толщина которого существенно меньше его ширины [42, 43]. Адсорбционный слой с пленкой растворителя, удержи- [c.99]

Была сделана попытка составить перечень видов жидкостной хроматографии в порядке возрастания относительной эффективности (оцениваемой по разрешающей способности) в соответствующем оптимальном диапазоне и при обычных (не экстремальных) условиях (табл. 15). Приводимые данные соотнесены с результатами, получаемыми в ненасыщенной сэндвич-камере, разрешающая способность в которой принята равной единице. Приводимые цифры могут только указывать тенденцию и точные их величины могут оказаться спорными. Однако таблица однозначно иллюстрирует несколько фактов. [c.301]

Отрицательное влияние на ТСХ-разделение такого важного фактора, как температура, общеизвестно, и чтобы его предотвратить, обычно принимаются соответствующие меры. Температура отрицательно влияет на разделение во всех видах жидкостной хроматографии, за исключением ионообменной. [c.48]

Метод ТСХ является одним из видов жидкостной хроматографии, но отличается простотой выполнения, экспрессностью и большим разнообразием практических приемов. Распределение и разделение веществ происходит в слое тонкодисперсного сорбента, нанесенного на пластинки из стекла или алюминиевой фольги. Чаще всего используется непрерывный проточный метод разделения на пластинке с помощью восходящих потоков жидкой фазы (восходящая ТСХ). [c.32]

В трех последующих главах обсуждаются принципы основных видов жидкостной хроматографии (адсорбционной, распределительной и ситовой), объясняется механизм селективности и приводятся примеры достигаемого разделения в отдельных рассматриваемых системах, подробно говорится об используемых материалах (особенно неподвижных фазах), причем, как всегда, основное внимание уделяется практическим вопросам. [c.12]

В настоящее время остро ощущается недостаток методических руководств по жидкостной хроматографии, и в этом смысле данная книга окажет неоценимую помощь многочисленным лабораториям. В ней есть все необходимые сведения, которые помогут правильно выбрать и применить соответствующую методику. Б книге кратко дана теория метода, указаны требования к материалам и конструкции, которые необходимо учитывать при изготовлении и эксплуатации жидкостного хроматографа. Подробно рассмотрены все 4 вида жидкостной хроматографии распределительная, адсорбционная, ионообменная, ситовая. Приведены многочисленные примеры применения высокоскоростной жидкостной хроматографии. [c.4]

Хроматографические методы анализа применяют в основном к экстрактам полимеров. Для разделения экстрактов широко используют все виды жидкостной хроматографии. Доминирующим хроматографическим методом определения стабилизаторов до настоящего времени остается тонкослойная хроматография (ТСХ), благодаря малой продолжительности анализа, высокой чувствительности метода, несложности оборудования и возможности одновременного анализа многих компонентов, которые могут быть разделены в одном хроматографическом процессе. Распространению метода способствовал промышленный выпуск готовых пластинок. Хотя основную ценность этот метод имеет для идентификации добавок, он позволяет получать и количественные результаты, причем не с меньшей точностью, чем другие хроматографические методы. Количественное определение можно проводить после снятия пятен с пластинки и экстракции их полярным растворителем или непосредственно на пластинке с использованием сканирующих денситометров. [c.245]

При обсуждении наполнителей хроматографических колонок целесообразно рассмотреть колонки, используемые в различных видах жидкостной хроматографии. [c.29]

Ситовая хроматография - это вид жидкостной хроматографии, в котором растворенное вещество распределяется между свободным растворителем и растворителем, находящимся во внутренних полостях пористых частиц. Свободный растворитель служит подвижной фазой, а пористые частицы, содержащие растворитель, образуют неподвижную фазу (часто неподвижной фазой неточно называют сами пористые частицы). Разделение зависит от размеров внутренних полостей, так как степень проникновения молекул растворенного вещества определяется величиной молекул последнего. Очень большие молекулы не могут проникнуть в неподвижную фазу и вымываются при прохождении через колонку объема растворителя, равного объему колонки, т.е. объему свободного растворителя в колонке. Если молекулы растворенного вещества достаточно малы, чтобы проникнуть в растворитель, содержащийся в пористых частицах, то они элюируются объемом растворителя, равным сумме свободного объема колонки и объема растьиритбля, содержащегося в тепопвижнЬй фазе, т.е, равным общему объему растворителя в колонке. [c.108]

Тонкослойная хроматография (ТСХ) является одним из видов жидкостной хроматографии, поэтому область ее применения столь же широка, как и колоночной жидкостной хроматографии. Однако ТСХ характеризуется и дополнительными преимуществами 1) простота методики и аппаратуры 2) экспрессность 3) большая гибкость (например, возможность осуществлять проявление в двух направлениях — двумерная хроматография, совместное использование электрического поля и хроматографического разделения и т. д.) 4) определение соединений, которые практически не элюируются (в колоночной хроматографии эти соединения отравляют колонку). [c.5]

В газовой и некоторых видах жидкостной хроматографии объемы устройства для ввода пробы и детектора незначительны, вследствие чего п можно выразить следующим образом [c.236]

С целью наилучшего разделения соединений различных типов разработано несколько видов жидкостной хроматографии. [c.14]

ВОЗМОЖНОСТЬ разделения сходных веществ с помощью этого метода ограничивается числом циклов распределения, которые можно осуществить. К счастью, когда одна фаза двухфазной системы иммобилизована в виде слоя, находящегося на поверхности малых частиц, процесс распределения может многократно повторяться при использовании хроматографии в колонке, заполненной порошком целлюлозы, или на бумаге. При этом вещества разделяются в результате распределения их между водной фазой, покрывающей целлюлозные волокна, и неполярной фазой, протекающей через пространство между волокнами. Кремневая кислота или целит также широко используются в качестве носителей при распределительной хроматографии как в колонках, так и в тонком слое. Разделение веществ с помощью кремневой кислоты в колонках описано в разд. 18.5.2, а в тонком слое — в разд. 17.3.4. Газовая хроматография (разд. 16.3.4) и некоторые виды жидкостной хроматографии под высоким давлением (разд. 16.3,5) также основаны на распределении растворенных веществ. [c.206]

При анализе белков, пептидов и многих других веществ большое значение имеют различные виды жидкостной хроматографии. Среди них на первом месте стоит высокоэффективная жидкостная хроматография, а также гельпроникающая хроматография и ионообменная. [c.475]

Гель-хроматография является одним из видов жидкостной хроматографии. При анализе этим методом растворенное вещество распседе-ляется между свободным растворителем и растворителем, находящимся во внутренних полостях пористых частиц наполнггтеля. Свободный растворитель является подвижной фазой, а пористые частицы, содержащие растворитель, образуют неподвижную фазу. [c.58]

В ТСХ, как и в других видах жидкостной хроматографии, одной из наиболее важных проблем является правильный выбор состава элюента. Следует руководствоваться элюотроппым рядом, в котором растворители расположены в порядке возрастания элюирующей силы, а также данными о свойствах разделяемых веществ и их способности взаимодействовать с подвижной и неподвижной фазами. В ТСХ выбор растворителя аналогичен выбору состава элюспта в адсорбционной хроматографии. Не следует выбирать многокомпонентную смесь, предпочтительней применение одно- нли двухкомионентпых элюентов для облегчения воспроизводимости условий ТСХ. [c.613]

Точно определенный диапазон эксклюзии между мертвым объемом и суммой мертвого объема и объема пор Vo + Vp обеспечивает малые времена удерживания, определяемые коэффициентом распределения К. Получаются узкие пики, что позволяет проводить их правильную колююственную обработку. Поскольку, как правило, проба не вступает ни в какие химические или физические взаимодействия, ее компоненты элюируются без потерь. Следовательно, данный метод пригоден для препаративного разделения. В то же время, проба не влияет на разделяющую колонку, как это происходит в других видах жидкостной хроматографии. [c.292]

Диаметр колонок от 1 до 10 мм, длина до 300 мм, сорбенты 70 наименований для всех видов жидкостной хроматографии обратно- и прямофазной, ионообменной, ион-парной, ионной, эксклюзионной. Каждая колонка имеет индивидуальную тест-хроматограмму и паспорт. [c.449]

Некоторые вопросы, связанные с пиками растворителя. Пик растворителя может присутствовать па многих хроматограммах. Обычно это интенсивный сигнал, который появляется в начале хроматограммы. В газовой хроматографии пики растворителя имеют весьма несимметричную (хвостящую) форму. В жидкостной хроматографии они могут проявляться множеством различных способов, например в виде интенсивных отрицательных и положительных сигналов в начале хроматограммы. В некоторых видах жидкостной хроматографии, особенно при разделении веществ в ионной форме (разд. 3.3), пики, обусловленные подвижной фазой, могут проявляться па хроматограмме и гораздо позже в виде отрицательных сигналов или пиков, ничем не отличающихся от пиков компонентов образца. Этот последний вид сигнала, обусловленного растворителем, можно рассматривать в качестве дополнительного (неопределяемого) пика, от которого на хроматограмме необходимо отделить определяемые пики. [c.208]

Дезактивация колонки является одной из основных проблем в жид-костно-адсорбциошюй хроматографии, для которой она более важна, чем для других видов жидкостной хроматографии. Высокоактивная поверхность аддарбента может прочно удерживать очень полярные соедашения, присутствующие в виде следов в образце или в подвижной фазе. В результате при многократном использовании колонки наблюдается уменьшение значений к образца, пики становятся несимметричными, уменьшается число теоретических тарелок и разделение постепенно ухудшается, В этом случае становится необходимой регенерация колонки. Регенерация колонки может быть проведена путем последовательной промьшки ее растворителями с постепенно увеличивающейся полярностью [24], например мети-ленхлоридом, метанолом и водой, ёсли на колонке разделяли кислые или основные соединения, то к метанолу или воде добавляют соответственно пиридин или уксусную кислоту. За стадией промывки должна следовать стадия кондиционирования колонки, заключающаяся в удалении с адсорбента полярных растворителей и воды. Выполняют эту операцию п)ггем промьшки колонки растворителями в обратной последовательности метанол, метиленхлорид, гексан. Причем объемы растворителей должны быть большие, чтобы обеспечить полное удаление полярных веществ с адсорбента. Обычно этот объем в 10-20 раз больше вместимости колонки. [c.51]

Затем в качестве твердого носителя для разделения модифицироваииых аминокислот стали использовать фильтровальную бумагу. Хроматография на бумаге, единственный широко применяемый в биохимии вид жидкостной хроматографии, является одним из наиболее эффективных аналитических методов разделения. Полоску фильтровальной бумаги, на которую недалеко от верхнего конца нанесено некоторое количество смеси аминокислот, насыщают водной неподвижной фазой и помещают в камеру, насыщенную парами обеих фаз верхний конец полоски опускают в лодочку, содержащую подвижную фазу, п закрепляют в ней. Подвижная фаза под действием капиллярных сил поступает из лодочки и движется далее вниз по полоске бумаги. Индивидуальные аминокислоты перемещаются вниз по бумаге с различными скоростями, зависящими от их коэффициентов распределения для данной пары фаз (по аналогии с противоточным распределением или колоночной жидкостной хроматографией). Порядок движения аминокислот по бумаге различен в разных растворителях, и ни один из применяемых растворителей не позволяет произвести полное разделение всех 20 аминокислот, но, используя хроматографирование в двух перпендикулярных направлениях (рис. 5.14), можно добиться полного их разчсления. Аминокислоты можно обнаружить, опрыскивая бумагу раствором нингидрина, что приводит к появлению синеватых окрашенных пятен аминокислот. Описанная методика соответствует нисходящей бумажной хроматографии. Иногда в [c.149]

ЖСФХ —это не то же самое, что обращенно-фазовая жидкостная хроматография (ОФЖХ). Последнюю можно определить как вид жидкостной хроматографии, в которой подвижная фаза более полярна, чем неподвижная, Такая ситуация не реализуется в газовой хроматографии. Подробное обсуждение ОФЖХ см. в разд. 3.2.2.1. [c.31]

В ОФЖХ механизм удерживания еще более неясен, чем в других видах жидкостной хроматографии. Пока невозможно изобразить простую картину этого процесса, которая позволила бы получить однозначные уравнения, описывающие зависимость удерживания от различных представляющих интерес параметров. К сожалению, в последние десять лет на эту тему слишком много рассуждают, причем часто экспериментальных данных, приводимых в подтверждение сделанных выводов, недостаточно. Поэтому неудивительно, что предложено множество различных выражений для описания удерживания в ОФЖХ. [c.74]

В различных видах жидкостной хроматографии к разряду основных могут относиться различные параметры (см. табл. 3.10). Термин градиентное элюирование обычно применяют к хроматографическим экспериментам, в которых в течение анализа изменяется состав подвижной фазы. Часто используют градиент концентрации соли или pH, особенно в ионообменной хроматографии [26]. Однако наиболее популярны такие виды градиентного элюирования, которые предусматривают изменение состава подвижной фазы. Обычно при этом происходит добавление сильного растворителя В) к слабому растворителю (Л). Типичные примеры такого рода градиентов — это градиенты воды (растворитель А) с метанолом, ацетонитрилом или тетрагидрофураном (растворитель В) в ОФЖХ. В нормально-фазовой жидкостной хроматографии к н-гексану [c.240]

Чтобы получить линейный градиент силы элюента, форма программы градиента должна быть приведена в соответствие с механизмом удерживания, т. е. с данным частным видом жидкостной хроматографии [уравнение (5.5)]. Например, удерживание как функция состава подвижной фазы в ОФЖХ может быть описано уравнением [c.241]

Так как большие молекулы не имеют доступа во внутренние поры наполнителя колонки, то они более или менее медленно продвигаются по колонке в промежутках между частицами наполнителя. В отличие от других видов жидкостной хроматографии, самые большие по размеру молекулы в этом случае элюируются первыми, наименьшие — последними. Молекулы промежуточного размера имеют и промежуточное время удерживания. Резделение основано на том, что молекулы различного размера имеют доступ к разным объемам колонки. Для заданной системы колонка — анализируемое вещество размеры молекул компонентов, элюируемых из колонки, являются функцией объема растворителя, используемого в качестве подвижной фазы и прошедшего через колонку к данному моменту времени. На основании данных, полученных при хроматографировании полимеров с известным молекулярным весом, можно построить калибровочный график в координатах логарифм молекулярного веса — удерживаемый объем. Этот график позволяет получить распределение по молекулярным весам для неизвестных полимеров. Калибровочная кривая, полученная [c.85]

Тонкослойная хроматография— вид жидкостной хроматографии, в которой роль подвижной фазы выполняет жидкая фаза, а разделение происходит на слое сорбента, толщина которого существенно меньше его ширины. В наиболее распространенном варианте тонкослойной хроматографии слой сорбента (более точно —одна его сторона) открыт, а движение подвижной фазы происходит как результат пропитки сорбционного слоя растворителем, который используется как злюент. [c.5]

В некоторых работах разделение на неспецифических адсорбентах с помощью полярных элюентов было названо жидкостной хроматографией с обращенными фазами . Впервые этот вид жидкостной хроматографии был использован Болдингом [25] в 1948 г. для разделения метиловых эфиров жирных кислот. В настоящее время таким способом разделяют конденсированные ароматические углеводороды [26, 27], витамины [27, 28], инсектициды [29], антибиотики [30], стероиды [26] и многие другие вещества. Этот вариант жидкостной хроматографии был также назван обращенно-фазовой хроматографией [29, 31—33] в том смысле, что в жидкостно-адсорбционной хроматографии обычно применяли специфический адсорбент и неспецифический элюент, в то время как в этом варианте — наоборот. [c.208]

Как и в большинстве других видов жидкостной хроматографии, в ионообменной хроматографии преобладает эмпирический подход из-за невозможности в настоящее время установить взаимосвязь между характеристиками ионообменного процесса и физико-химическими свойствами разделяемых веществ. Известные трудности теоретического описания процесса связаны с природой ионообменных смол, которые в большинстве случаев являются разветвленными полимерами с высокой плотностью ионных функциональных групп. Селективность разделения часто определяется только электростатическими силами, но существенный вклад может вносить ван-дер-ваальсово взаимодействие, особенно при разделении органических веществ. Следует также учитывать явления, происходящие на поверхности раздела фаз, и, в частности, механизм перехода вещества из одной фазы в другую. Кроме того, подавляющее большинство способных к обмену ионов находится не на поверхности смолы, а внутри нее, что обусловливает необходимость перемещения ионов в смолах. [c.41]