Хроматография, элюирование мочевиной

Фиг. 76. Хроматография аморфного инсулина свиньи, содержащего значительное количество де-замидоинсулина [321. Колонка ШС-50 (0,9X20 см.) раствор для элюирования 0,1 М фосфат—7 М мочевина, pH 6,0. Пик / — дезамидоинсулин пик 2— продукт, образующийся из инсулина под действием мочевины пик 5 —главный пик инсулина.

Подготовка ДЭАЭ-целлюлозы для хроматографии в С1 "-форме производится так же, как указано выше, но уравновешивание колонки, растворение фракционируемого материала и элюирование осуществляют буферными растворами, содержащими 8М мочевину. В качестве стартового буферного раствора в данном случае используют буферный раствор трис-НС pH 8, содержащий 0,05 М С1 и 8 М мочевины. Чтобы предотвратить агрегацию и ассоциацию молекул фракционируемого материала в присутствии мочевины, к буферному раствору добавляют 0,1% додецилсульфата натрия. В полученном растворе, содержащем оба детергента (мочевину и додецил-сульфат натрия), растворяют фракционируемый материал, который диализуют против того же раствора в течение 24 ч. [c.207]

Совершенно не ясно, каким образом вообще осуществляется взаимодействие между набухающими в воде гелями и ароматическими соединениями. Этот эффект можно подавить, вводя в элюент различные добавки. Создавая в элюенте высокую концентрацию роданида или мочевины, удается почти полностью нормализовать элюирование пикриновой кислоты и триптофана [52]. На сефадексе 0-25 в водно-спиртовой среде полифенолы ведут себя в соответствии с их молекулярным весом, ВТО время как в чистой воде они сильно задерживаются гелем [53]. Возможные активные центры геля не удается насытить путем добавления к элюенту ароматических соединений (например, 0,2 н. салицилата натрия) [42], однако в 1 М пиридине ди-нитрофенильные производные аминокислот появляются в элюате раньше, чем свободные аминокислоты. По-видимому, при хроматографировании в системе фенол — уксусная кислота — вода (1 1 1) гель уже не имеет сродства к ароматическим соединениям [54], Карнеги [55], работая на сефадексе 0-25 в этой системе (которая позволяет избежать побочных эффектов), сумел на ряде пептидов подтвердить обычную зависимость между объемами выхода и молекулярным весом (табл. 26). Он предполагает, что при молекулярном весе выше 400 имеет место собственно гель-хроматография, поскольку здесь уже не должен действовать эффект распределения [63]. Однако до сих пор все же не доказано, одинаков ли состав растворителя в гранулах геля и между гранулами. [c.130]

Колонка 1,2x100 см. Элюирование в линейном градиенте концентрации (0,52—0,7 М) хлорида натрия в 0,03 М ацетатном буферном растворе с pH 4.5 в присутствии 7 М мочевины (общий объем 500 мл). Скорость подачи 8 мл/ч. Объем фракций 4 мл. Перед хроматографией фракции А, Б а В подкисляли до pH 4,5 и добавляли мочевину до концентрации 7 М. Символы Val, Phe, Arg, Pro, Gly, Tyr, Leu, His соответствуют акцепторной активности фракций тРНК.- поглощение при 260 нм. [c.85]

Для анализа некоторых термически нестабильных пестицидов применяли скоростную жидкостную хроматографию на колонке с зипаксом, импрегнированным р, р -оксидипропионитрилом. Элюирование проводили ди-н-бутиловым эфиром при давлении около 25 атм [1]. На рис. 46.11 приведено разделение некоторых гербицидов, являющихся производными мочевины. Ряд работ, главным образом прикладного характера, приведен в табл. 46.8. [c.257]

Важным этапом в развитии структурного анализа нуклеиновых кислот явилось использование при хроматографии на DEAE-целлюлозе 7 М мочевины для разделения олигонуклеотидов по длине цепи (Tomlinson, Tener, 1963). Найдено, что концентрация соли, необходимая для элюирования олигонуклеотида, пропорциональна логарифму его заряда. [c.286]

Углеводороды, высшие спирты жирного ряда и стерины составляют компоненты неомыляемой фракции, которые необходимо раньше разделить, а уже затем хроматографировать. Для этого неомыляемую фракцию обрабатывают мочевиной в горячем спиртовом растворе [85]. При охлаждении мочевина со спиртами жирного ряда и углеводородами образует кристаллические клатрат-ные соединения. Стерины остаются в верхнем слое. При кипячении клатратов с водой выделяются спирты жирного ряда и углеводороды. Методом жидкостно-адсорбционной хроматографии на окиси алюминия полученные фракции можно разделить далее на углеводороды, одноосновные и двуосновные спирты [18]. Неомыляемую же фракцию липидов можно сразу разделить на окиси алюминия без предварительного фракционирования мочевиной [57]. Сырую фракцию спиртов затем разделяют хроматографически на окиси алюминия на одноатомные спирты, а,а)-диолы и а,р-диолы, используя для элюирования различные сочетания растворителей. [c.454]

Фракцию а-казеина, которая была получена в виде нерастворимой кальциевой соли, Вог [43, 44] назвал g-казеином, Макмикин и сотр. [45] — ai-казеином и Лонг и сотр. [46]—аг-казеином. а-Казеин содержит два основных компонента с оптической плотностью, равной 45% оптической плотности казеина, полученного после первого этапа его обработки с использованием хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе в присутствии 4,5 М мочевины. Эти компоненты взаимодействуют с >с-казеином (см. ниже) в соответствующих весовых соотношениях, образуя комплексы в отсутствие двувалентных катионов, или мицеллы, способные образовывать комки с реннином в присутствии двувалентных катионов. С помощью электрофореза на крахмальном геле было показано, что обе главные фракции гетерогенны [47]. Первая элюированная фракция названа agi, 2-казеином она является смесью si- и ад2-казеинов, причем asi-казеин обладает большей подвижностью при pH 8,4 вторая фракция была названа ад-казеином. [c.42]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология