Пикорнавирусы белки

Изучение топографии репликации пикорнавирусов в животных клетках показало, что транскрипция, трансляция и созревание происходят в цитоплазме [81], хотя и не обязательно на поверхности цитоплазматических мембран [361]. В противоположность этому РНК ряда вирусов растений реплицируется в ядре, преимущественно в ядрышке. Синтез же белка и сборка вируса происходят в цитоплазме, вероятно на поверхности мембран [68, 4191 [c.250]

Какие общие заключения можно сделать из наблюдаемой вариабельности аминокислотных последовательностей белков оболочки вирусов группы ВТМ А в случае пикорнавирусов [c.285]

Рис. 18.3. Структурная организация капсида пикорнавирусов. А. Оболочка, состоящая из 60 субъединиц — протомеров. Из этих субъединиц 60—п идентичны зрелым протомерам (VP1, VP2, VP3, VP4), а п являются незрелыми протомерами (VPO, VP1, VP3). VPO представляет собой нерасщепленный предшественник цепей VP2 и VP4. Вирионы пикорнавирусов скорее всего содержат две незрелые субъединицы. Б. Электрофорез в полиакриламидном геле с ДСН белков вируса ЕМС, меченных смесью [ С]-аминокислот.

Таблица 18.5. Молекулярные массы белков оболочки некоторых пикорнавирусов

Эффективность образования бляшек пикорнавирусами обычно довольно низка она составляет 0,1—2%, даже когда предпринимаются меры для удаления дефектных или инактивированных частиц [147, 161, 206, 243, 285]. Потеря инфекционности обычно связана с тепловыми повреждениями (например, с денатурацией вирионных белков), окислением тиоловых и метио-ниновых остатков, потерей УР4 или фрагментацией РНК в сердцевине. Все эти эффекты можно уменьшить, если собирать урожай вируса сразу после того, как его титр достигнет максимума (см., например, рис. 18.7), и производить очистку при нейтральном pH и низкой температуре. Чтобы минимизировать окисление или замещение реакционноспособных боковых групп [c.206]

Начальные этапы размножения пикорнавирусов нелегко исследовать по двум причинам. Во-первых, доля вирусных частиц, которым удается успешно вызвать заражение, невелика, обычно менее 1 % от количества внесенного вируса. Во-вторых, незначительные количества синтезируемого вирусного материала маскируются интенсивным метаболизмом макромолекул все еще полноценной клетки-хозяина. Поскольку зараженные клетки не содержат всех компонентов, необходимых для репликации вируса, предполагают, что первая задача вируса заключается в трансляции своего генома и в наработке белков, необходимых для репликации его РНК- [c.229]

Картирование этих белков на геноме пикорнавирусов оказалось трудной задачей для ее решения понадобилось 19 лет и пришлось применить разнообразные методы. К счастью, в са- [c.232]

Вирусы, содержащие неидентичные субъединицы, вынуждают, по-видимому, клетку-хозяина синтезировать вначале первичный белок, содержащий в единственной цепи последовательности субъединиц. В процессе самосборки и созревания вируса этот первичный белок селективно расщепляется (возможно, протеиназами хозяина), образуя все необходимые субъединицы. Так, предполагается, [21], что пикорнавирусы, типа энтеровирусов, собираются и соЗ ревают в ступенчатом режиме. Первичный белок вначале расщепляется на три фрагмента (VPO, VP1, VP3). Эти фрагменты, как полагают, через промежуточные формы VP0-VP1-VP3 и (VPO-VPl-VP-3)s собираются в прокапсиду (VP0-VP1-УРЗ)бо- Были выделены пустые оболочки этого типа. Затем в капсиде располагается РНК и происходит созревание посредством протеолитического расщепления VPO. В результате расщепления образуются субъединицы VP2 и VP4 и в результате созревший вирус состоит из капсиды (VPl-VP2-VP3-VP4)eo, окружающей вирусную РНК- Неизвестно, играет ли РНК какую-либо роль в управлении созреванием белков капсиды. [c.568]

Наиболее простые вирусы, содержащие несколько белков,— это типичные пикорнавирусы животных, к числу которых относятся вирусы полиомиелита, мышиного энцефалита и др. Структурная и функциональная роль четырех белковых комионентов этих вирусов еще не изучена. Известно лишь, что при электрофоретическом (в геле) разделении вирусоспецифичных белков, синтезированных в клетке-хозяине, было обнаружено фактически значительно большее число белков, а именно 14. Некоторые из них относятся к высокомолекулярным белкам, причем [c.153]

Изучение реконструкции вирусов растений и мелких бактериофагов in vitro указывает на то, что сборка простых вирусов — это спонтанный процесс, осуществляемый за счет общего повышения энтропии процесс этот происходит быстро — после того, как концентрация белка и нуклеиновой кислоты достигнет некоторой достаточной величины. С другой стороны, мы уже обсуждали необходимость в факторе созревания для стабилизации пикорнавирусов (гл. IX, разд. Б). Как показывают результаты полученные с аденовирусами и вирусом группы герпеса ДТП может носить более общий характер [407] Что касается созревания РНК-содержащих фагов то после того, как синтез потомства фага завершен (обычно когда накапливается около 10 ООО частиц на клетку) клетки Е. oli лизируют, а фаговые частицы высвобож даются в окружающую среду. В отличие от ДНК-содержа щих фагов в этом случае нет никаких указаний на суще ствование лизирующего фермента. Вирусы же растений остаются в клетках до тех пор, пока механические причины или же биологические переносчики не доставят их новому хозяину. [c.260]

В принципе, позитивный контроль трансляции может осуществляться засчет расположенной на мРНК специальной области трансляционного энхансера который способен выборочно привлекать рибосомы. Показано, что определенные РНК-вирусы (пикорнавирусы) содержат такую область. Ее присутствие приводит к тому, что трансляция начинается с внутренних сайтов AUG, которые в других случаях в эукариотической клетке не используются для инициации синтеза белка (рис. 10-56). [c.229]

Рис. 10-57. Модель позитивного контроля трансляции, согласно которой для интенсивной трансляции мРНК необходимо связывание белка (активатора фансляции). Хотя известно, что трансляция специфических мРНК находится под позитивным контролем его механизм до конца неясен. Установлено, что позитивный контроль имеет отношение к синтезу коротких пептидов, трансляция которых инициируется перед первым AUG. Это дает право считать, что в данном случае действует механизм, аналогичный тому, который описан у пикорнавирусов (рис. 10-56).

Главные защитные антигены икосаэдрических вирусов также расположены на поверхности. Антитела к капсидному белку пикорнавирусов VP1, а также к белкам гексона и фибрилл у аденовирусов нейтрализуют инфекционность и обеспечивают резистентность in vivo [14, 24, 95, 11, 112, 196]. Главным защитным антигеном реовирусов является гемагглютинин — поверхностный белок S1 [193]. Кроме того, что он реагирует с антителами, этот белок служит также мишенью для цитотоксических Т-клеток, лизирующих зараженные Т-клетки [46]. Аналогичным образом стимулирует образование нейтрализующих антител наружный капсидный гликопротеин ротавируса gp 35 [59, 72]. [c.147]

Пикорнавирусы содержат единственную цепь РНК ее З -ко-нец полиаденилирован, а к 5 -концу ковалентно присоединев низкомолекулярный белок, обозначаемый VPg. Первой РНК пикорнавирусов, для которой удалось определить нуклеотидную последовательность, была РНК полиовируса типа 1 [159, 257] Вслед за этой пионерской работой было проведено секвениро-вание РНК других пикорнавирусов. Оказалось, что длина этих РНК значительно варьирует — от 7430 до 8450 оснований (табл. 18.3). У более длинных РНК —вирусов ЕМС и ящура — между белком VPg и началом белок-кодирующего района рас положен участок poly (С). [c.194]

В самом начале этапа сборки оболочки (этап 6) предшественник белка Р1 расщепляется вирус-специфической протеазой с образованием 5S-субъединиц (незрелый протомер), состоящих из трех тесно связанных белков (VPO, VP3 и VP1). 5 S-субъединицы объединяются в пентамеры. Для образования 60-субъединичной белковой оболочки, окружающей геномную РНК, нужно 12 таких пентамеров. Инфекционные (150—160) S-вирионы (этап 7) образуются в результате созревания, при котором большинство цепей VPO расщепляется с образованием зрелых четырехцепочечных субъединиц (VP4, VP3, VP2, VP1), характерных для вирионов пикорнавирусов. Полные вирусные частицы, которые в зараженных клетках часто образуют кристаллы, в конце концов высвобождаются из этих клеток в результате разрушения, вызванного инфекцией (этап 8). [c.212]

Клетка-мишень обычно служит для вируса источником энергии и предшественников для синтеза вирусных компонентов, а также предоставляет весь аппарат (рибосомы, тРНК, ферменты и т. д.), необходимый для синтеза вирусных белков. На ней расположены рецепторы, необходимые для заражения, от нее вирус получает мембраны для сборки вирионов и по крайней мере один фактор, требующийся для синтеза вирусной РНК.. Имея в виду все это, мы можем говорить о пикорнавирусах как [c.222]

Механизм выключения клеточного синтеза белков связывают иногда с накоплением двухцепочечной РНК, токсическим действием вирусных белков оболочки, увеличением концентрации ионов натрия и снижением концентрации ионов калия в цитоплазме (которые в свою очередь связывают с изменениями в плазматической мембране), инактивацией факторов, необходимых для инициации синтеза белка, и вытеснением клеточных мРНК вирусной РНК в конкуренции за лимитирующие компоненты белоксинтезирующего аппарата [89, 90]. Каждая из этих гипотез имеет своих сторонников, и в результате вопрос о механизме выключения синтеза белков клетки-хозяина, зараженной пикорнавирусами, принадлежит к числу наиболее противоречивых во всей литературе по пикорнавирусам. [c.227]

Лидерный белок L, обнаруженный у афто- и кардиовирусов, но не у энтеро- и риновирусов человека, был впервые идентифицирован при исследовании продуктов бесклеточной трансляции кардиовирусной РНК [43, 166, 290]. Усовершенствование системы из ретикулоцитов кроликов путем предварительной обработки нуклеазой для удаления эндогенных матриц [238] позволило значительно увеличить эффективность бесклеточной трансляции и послужило основой для идентификации [ПО, 234, 237, 289] вирусной протеазы и картирования ее в ЗСр ° [234]. В табл. 18,10 приведен ключ к старой номенклатуре белков некоторых наиболее детально изученных пикорнавирусов. [c.233]

Фенольный метод. Это метод часто применяют для выделения белков из вируса ВТМ [157] и некоторых пикорнавирусов [243, 697, 698] После фенольной экстракции белок при помощи специальной обработки, дредложен-ной Андерером [157], переводится в состояние, которое напоминает нативное. [c.172]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология