Ингибирование смешанного конкурентного и неконкурентного типа

Рис.82. Оцределение константы ингибирования методом Лайнуивера и Берка а- неконкурентное торможение О- конкурентное торможение 6- торможение смешанного типа

В зависимости от численных значений множителей а и (3 эффектор Э может выступать в роли либо ингибитора (I), либо активатора (А, промотора) ферментативной реакции. Полный кинетический анализ и сводная таблица возможных частных случаев ингибирования и активации фермента в рамках схемы (6.14) даны в работе [6]. Некоторые частные случаи имеют особое значение и широко применяются для описания кинетики ферментативных процессов. К их числу относится полное конкурентное ингибирование, полное неконкурентное ингибирование, бесконкурентное ингибирование, простая активация и некоторые типы смешанного ингибирования и активации. [c.219]

Применение метода Диксона к анализу нетривиальных типов ингибирования. Как отмечалось выше, обработка данных по влиянию ингибиторов на кинетику ферментативных реакций может быть проведена в, координатах Лайнуивера-Берка (1/ц, 1/[8]о) или, согласно методу Диксона, в координатах l v, [I]). Метод Диксона обладает тем преимуществом, что он позволяет определять значение константы ингибирования непосредственно из кинетических данных, не прибегая к дополнительным построениям. С другой стороны, вид графика в координатах Диксона не позволяет отличить смешанный тип ингибирования от конкурентного или неконкурентного ингибирования, как это обычно можно сделать при построении в координатах Лайнуивера-Берка. Однако [c.82]

Мы рассмотрели лишь два крайних случая ингибирования. Зачастую приходится иметь дело с более сложными типами торможения (или, напротив, активации, когда модификатор ускоряет реакцию), например, со смешанным конкурентным и неконкурентным ингибированием и т. д. Эти процессы даже при стационарных условиях требуют решения более сложных уравнений. Математические методы стационарной кинетики сложных ферментативных реакций описаны в 7.6. [c.366]

Рис. 2. Определение эффективных констант У фф и /Сэфф в присутствии ингибиторов различного типа а—неконкурентное ингибирование б—конкурентное ингибирование б—смешанное ингибирование стрелкой везде показано направление увеличения концентрации ингибитора,

Как было указано выше, анализ наклонов и пересечений кинетических кривых с осями позволяет в ряде случаев определить кинетические константы. В табл. 1 приведены выражения этих величин для основных типов ингибирования. Подобный анализ не дает должных результатов, когда зависимость скорости от концентрации не является гиперболической, и поэтому график обратных величин нелинеен. Отклонения от линейности наблюдаются, например, при частичном конкурентном ингибировании или неконкурентном ингибировании в стационарных условиях в ряде случаев смешанного ингибирования и др. [c.28]

Существуют ингибиторы смешанного действия, осуществляющие оба типа торможения — конкурентное и неконкурентное. В зависимости от структурных и физико-химических особенностей парализатора (и фермента) в разных условиях может осуществляться то один, то другой тип ингибирования. Смешанный тип может возникать и тогда, когда ингибитор соединяется не с исходным фермент-субстратным комплексом, а с какими-либо промежуточными продуктами, которые образуются позднее. [c.63]

Продукт реакции — глюкоза — ингибирует /3-глюкозидазу Г, = 0,5-16,4 мМ) [8-10, 12-14]. Отмечается также ингибирование бстратом — целлобиозой (/sT, = 10-41 мМ) [1, 12-14]. Сообща-ся о различных типах ингибирования глюкозой конкурентном 10], неконкурентном [1] и смешанном [8, 9, 12-14]. В работе [8] жазано, что а- и / -аномеры глюкозы ингибируют / -глюкозидазу i T.reesei в различной степени, причем более заметно выраже-I ингибирующее действие а-глюкозы. На основе механизма 1ешанного ингибирования Гонг и Тсао [12] описали кинетику [дролиза целлобиозы до 90%-ной степени конверсии субстрата )И варьировании его начальной концентрации от 5 до 40 мМ. [c.159]

При самом элементарном рассмотрении процесса ингибирования ограничиваются обсуждением двух типов ингибирования конкурентного и неконкурентного. Конкурентное ингибирование действительно распространено очень широко, в то время как случаи неконкурентного ингибиррвания довольно редки, и рассматривать их здесь детально нет необходимости. Понятие неконкурентного ингибирования возникло в связи с тем, что самые первые исследователи явления ингибирования, Михаэлис и его сотрудники, допускали, что определенные ингибиторы действуют па активность фермента, снижая кажущееся значение V, но не оказывая влияния на параметр. Этот тип ингибирования должен был представлять собой случай, альтернативный конкурентному ингибированию, и был назван неконкурентным ингибированием. Однако реально представить себе такую ситуацию довольно труд- но. Действительно, нужно предположить, что ингибитор снижает каталитическую эффективность фермента, но не оказывает влияния на связыварие субстрата. Это допущение, по-видимому, справедливо лишь для ингибиторов очень малых размеров, например для протонов и ионов металлов, однако в других случаях подобная ситуация вряд ли может иметь место. Неконкурентное ингибирование или активация протонами — ив самом деле явление распространенное известно несколько случаев неконкурентного ингибирования ионами тяжелых металлов. Однако неконкурентный характер ингибирования для веществ иной природы наблюдается крайне редко, и для наиболее часто цитированных в литературе примеров — ингибирования инвертазы а-глюкозой [118] и ингибирования аргиназы различными соединениями [81] — после повторения опытов оказалось, что имеет место смешанный тип ингибирования. В общем лучше всего рассматривать неконкурентное ингибирование как особый (и не очень интересный) случай сме шанного ингибирования. Его мы и обсудим ниже. [c.81]

Ингибиторы ферментативных каталитических реакций часта подразделяют на обратимо и необратимо действующие. Эта классификация основана на легкости отделения ингибитора от фермента при помощи физического метода типа диализа. Так, например, эзерин описан как обратимый ингибитор, в то время как фюсфор-содержащие соединения подобно диизопропилфосфофториду (ВРР) принадлежат к необратимым ингибиторам холинэстеразы. Однако, поскольку рассматриваются механизмы ингибирования, эта классификация только вносит неопределенность, так как из нее вытекает, что обратимые и необратимые ингибиторы действуют различным образом в действительности оба типа ингибиторов действуют, соединяясь с ферментом с образованием неактивных комплексов, обладающих весьма различными константами диссоциации . Необратимые ингибиторы образуют комплексы с очень малыми константами диссоциации и поэтому удаляются из комплекса путем диализа только очень медленно, тогда как обратимые ингибиторы образуют комплексы с высокими константами диссоциации и поэтому на всех стадиях удаления присутствует избыток несвязанного ингибитора, поддающегося диализу. Однако более полезным оказывается подразделение ингибиторов на конкурентные и неконкурентные (хотя многие ингибиторы обнаруживают смешанное поведение), так как эти ингибиторы действуют различными путями и кинетические уравнения для них разные. При конкурентном торможении ингибитор соединяется с тем же самым [c.121]

Поэтому проведенное нами изучение реакций совместного пероксидазного окисления о-дианизидина, гидрохинона и ферроцианида калия в присутствии индолил-З-уксусной кислоты позволило установить следующие закономерности [Рогожина, Рогожин, 2003]. Ауксин ингибирует пероксидазу в реакции окисления о-ди-анизидина по конкурентному типу (рис. 19), тогда как в реакциях окисления гидрохинона при кислых значениях pH проявлялся неконкурентный характер ингибирования (рис. 20), переходящий при pH > 6,5 в смешанный тип (рис. 21). Присутствие ауксина не влияло на пероксидазное окисление ферроцианида калия. [c.74]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология