Михаэлиса уравнение, интегральная форма

Полученные значения констант Михаэлиса и максимальных скоростей реакций для исходного и промежуточных олигомеров ввели в математическую модель действия глюкоамилазы и с помощью ЭВМ получили кинетические кривые накопления глюкозы прн гидролизе мальтодекстринов (рис. 2). Теоретические кривые близки по характеру к экспериментальным. Отличие заключается в том, что в них не отражается ингибирование продуктами реакции (поскольку ингибирование не вводилось в математическую модель). Тем не менее обработка теоретических кривых в рамках интегральной формы уравнения скорости (рис. 3), которая обычно проводится при анализе кинетических кривых простых ферментативных реакций [21], свидетельствует о наличии сильного ингибирования продуктами реакции в данной системе. На это указывают положительные угловые коэффициенты соответствующих прямых в известных координатах [Р]/ 1//1п ([5]о/[8]а — [Р]) для различных начальных концентраций исходного субстрата (рис. 3) >. [c.32]

Предложить аналитический метод определения константы Михаэлиса, исходя из уравнения касательной к кинетической кривой в начальный момент времени и интегральной формы уравнения кинетической кривой ферментативной реакции. [c.175]

Определение кинетических параметров ферментативной реакции с помощью интегральной формы уравнения Михаэлиса [c.179]

Интегральная форма уравнения Михаэлиса — Ментен [c.199]

Уравнение (8.2) представляет собой интегральную форму уравнения Михаэлиса—Ментен. Оно определяет временной ход (или кинетическую кривую) реакции, для которой уравнение Михаэлиса—Ментен продолжает выполняться на протяжении длительного промежутка времени после начала реакции. В уравнении (8.2) выражено через р, а не наоборот, как нам хотелось бы, однако это не создает особых неудобств при его использовании. [c.199]

При использовании высоких концентраций фермента, когда степень конверсии равна единице, справедливо соотношение кВ . При этом уравнение (2.217) трансформируется в интегральную форму уравнения Михаэлиса [см. (2.245)], из которого можно найти значения и ферментативной реакции. В этих условиях инактивация фермента не проявляется в кинетике реакции. [c.252]

Проведение реакции при больших концентрациях фермента. Из данного выше анализа следует, что при достаточно больших концентрациях фермента степень конверсии субстрата равна единице, и при дальнейшем увеличении концентрации фермента процессами его инактивации можно пренебречь. Из интегральной формы уравнения Михаэлиса, которое описывает динамику процесса в этих условиях, могут быть найдены параметры и К . Количественные критерии, которые должны быть выполнены при переходе к классическому уравнению Михаэлиса, представлены в табл. 2.20. Левые части неравенств, приведенных в таблице, функционально связаны с величинами определяемыми при проведении реакции при низких концентрациях фермента. [c.263]

Кинетическое уравнение можно записать двумя различными способами либо в виде зависимости концентрации реагента ог времени, либо в виде зависимости скорости реакции от концентраций реагентов. В энзимологии чаще пользуются второй формой, записи, в то время как в химии — первой. Химики отдают предпочтение, как правило, интегральным уравнениям скорости, имеющим то преимущество, что в них входят величины, непосредственно измеряемые экспериментально. Однако, как. видно из гл. 2, первые исследователи ферментативной кинетики, пытаясь применить обычные приемы химической кинетики для описания экспериментальных данных при помощи интегральных уравнений, встретились с большими трудностями. Эти трудности были в значительной степени преодолены благодаря работе Михаэлиса и Ментен [ИЗ], показавших, что более простой способ изучения кинетических свойств ферментов состоит в измерении начальных скоростей реакций. В этом случае можно пренебречь накоплением продукта и расходованием субстрата, которые осложняют анализ всей кинетической кривой. Нежелательным последствием широкого применения этого подхода явилось, однако, то, что биохимики теперь избегают применять интегральные уравнения скорости даже в тех случаях, когда это вполне оправданно. [c.198]

Рис. 100. Определение кинетических параметров гидролиза амида К-ацетил-1-гек-сагидрофенилаланина, катализируемого а-хпмотрипсином, с помощью интегральной формы уравнения Михаэлиса [43]

Рис. 83. Определение кинетических параметров гидролиза амида К-ацетил-Ь-гек-сагидрофенилаланина, катализируемого а-химотрипсином, с помощью интегральной формы уравнения Михаэлиса

Для определения параметров Кт и Утах можно использовать график хода реакции. Для этого уравнения Михаэлиса записывают в интегральной форме [c.24]

Резюмируя все изложенное выше, можно сказать, что кинетическая кривая ферментативной реакции обычно сестоит из трех участков, четко разграниченных по времени, как это показано на рис.2.2. Первый, переходный участок описывается уравнениями, сходными с уравнением (2.9) более детально он рассмотрен в гл. 9. Второй участок (участок начальной скорости)- является единственным, для которого скорость процесса Действительно, постоянна. После опубликования работы Михаэлиса и Ментен большая часть исследований была посвящена изучению именно этого участка кинетической кривой. Наибольшее внимание уделено ему и в настоящей книге. Для описания конечного участка, где концентрации субстрата и продукта существенно изменяются и скорость процесса снижается до нуля, требуются уравнения, сходные с уравнением (2.11) обычно они применяются в интегральной форме. Этот участок рассмотрен в гл. 8. [c.42]

ТИПОВ ферментативных реакций. Большая часть соответствующих уравнений интегрируется гораздо проще, чем обычно полагают. Для этого нужно быть лишь немного знакомым с интегральным исчислением, а не просто уметь находить стандартные интегралы в таблице. Альберти и Корбер [5] проанализировали интегральную форму уравнения для обратимого механизма Михаэлиса — Ментен и применили его к фумаразе. Шверт [131] получил интегральные формы уравнений скорости для ряда более сложных механизмов. Хотя интегрирование этих уравнений не представляет особых трудностей, конечные выражения имеют обычно довольно сложный вид, и поэтому их анализ весьма трудоемок. Кроме того, интегральные уравнения так мало применялись в ферментативной кинетике, что дальнейшее более или менее детальное обсуждение этого вопроса нецелесообразно. [c.208]

Несмотря на то что в последнее время для приведения экспериментальных данных к виду, соответствующему интегральной форме уравнения Михаэлиса — Ментен, очень широко применяется ЭВМ и это даже стало чем-то вроде моды, лучше всего для определения fe at, k atlKm и Км использовать классический подход, заключающийся в измерении начальных скоростей (т. е. при глубине превращения до 5%) и построении такого графика, как график Эди —Хофсти [уравнение (3.29)] [3—5]. Измерения скорости целесообразно проводить при следующих концентрациях субстрата 8Kk, Кк, 2Km, Км, 0,5/См, 0,25/См, 0,125/См. [c.201]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология