также клеточные линии для роста

Путем прямой селекции in vitro отобраны клеточные линии петунии, устойчивые к ртути, сорго — к алюминию, моркови — к алюминию и марганцу одновременно суспензионные клеточные культуры дурмана—к кадмию. На кафедре сельскохозяйственной биотехнологии МСХА также проводились работы по получению клеточных линий и растений-регенерантов льна-долгунца, устойчивых к соли нитрата кадмия и изучалось действие этой соли на интактные растения. Экспериментально показано, что присутствие ионов кадмия в почве приводит к торможению роста стеблевой и корневой частей растения, к сокращению на 7—9 дней онтогенетических фаз развития, следующих за фазой елочки по сравнению с контролем, культурные виды накапливают ионы кадмия в вегетативной массе, в то время как дикие — нет. Мезо- и ультраструктурный анализ стеблей льна-долгунца показал, что присутствие кадмия в субстрате приводило к уменьшению количества клеток элементарных волоконец в пучке, к некомпактному расположению клеток элементарных волоконец в лубяных пучках, а также к формированию клеток элементарных волоконец неодинаковых размеров в пределах одного пучка и к различным срокам формирования вторичной клеточной стенки. В результате клеточной селекции были получены растения-регенеранты, обладающие устойчивостью к соли кадмия (Гончарук Е.А., 2000). [c.148]

С применением мембран существенно ускоряется рост в сравнении с агаризованной средой, лучше удается освобождать культуры-от ингибирующего влияния фенольных веществ, выделяющихся в среду, а также предохранять клеточную линию от существенных повреждений при изучении метаболитов, продуцируемых культурами, и др. Таким путем удается уменьшить расход материалов и, как следствие, снизить цены, поскольку культуры могут поддерживаться в течение длительного времени без замены культуральных контейнеров. Ингредиенты (продукты) для культи- [c.501]

Время удвоения в бессывороточной среде может изменяться, но соответствующие эффекты не всегда предсказуемы. Большинство клеточных линий замедляет темп делений, но в ряде случаев наблюдается ускорение деления клеток. Эти изменения не являются пагубными, так как все исследованные линии продолжали секретировать большие количества МА (по меньшей мере 5—50 мкг/мл) или интерлейкина. Отмечена также еще одна особенность в характере роста в бессывороточной среде, заключающаяся в том, что клетки перестают прикрепляться к пластмассовой поверхности. В бессывороточной среде клетки большинства линий растут в суспензионной культуре, в то время как добавление сыворотки приводит к образованию клеточных монослоев. [c.190]

Окислительно-восстановительный потенциал (ОВП), нли редокс-потенциал, является показателем заряда среды, и его величина, следовательно, определяется соотношением окисляющих и восстанавливающих химических соединений, концентрации кислорода и pH. При изготовлении свежей среды и помещении ее в культуральный сосуд требуется время для установления равновесного ОВП (процесс называется уравновешиванием). Оптимальный уровень ОВП для роста многих линий клеток составляет +75 мв, что соответствует значению рОг растворенного кислорода 8—10%. Некоторые исследователи предпочитают контролировать поступление кислорода в культуру с помощью окислительно-восстановительного, а не кислородного электрода. При прослеживании изменения ОВП с помощью редокс-электрода и рН-метра (с милливольтовой шкалой) можно получить данные о характере роста клеток [5]. Это связано с тем, что значение ОВП снижается в течение логарифмического роста клеток и достигает минимального значения примерно за 24 ч до наступления стационарной фазы (рис. 3.5). Такой способ оценки роста культуры является особенно эффективным, когда невозможно отбирать пробы клеток. Этот метод полезен также для предсказания момента окончания логарифмической фазы роста, чтобы смена среды, добавление вирусов или промоторов образования клеточных продуктов были произведены в оптимальное время. Влияние ОВП на клеточные культуры подробно рассмотрено Гриффитсом [6]. [c.71]

Кроме того, медленный рост (время удвоения числа клеток 1—3 дн), длительный период выращивания (2—3 недели) в строго асептических условиях, чувствительность к механическим повреждениям, во многих случаях низкое содержание искомого продукта являются недостатками этого метода, ограничивающими его применение в промышленности. Это также предстоит преодолеть исследователям и технологам. Надо помнить, что кроме генетических подходов к созданию продуктивных, устойчивых к стрессам выращивания, быстрорастущих и быстро переходящих к синтезу продукта линий необходимо знание физиологических механизмов репрессии и активации ключевых ферментов различных путей. метаболизма. Правильное сочетание компонентов среды, двухэтапное культивирование клеток на средах для роста и для продукции (см. табл. 2) может увеличить количество продукта в клеточной культуре, полученной из растения, способного к данным синтезам. [c.27]

Как уже говорилось, для наращивания клеточной массы удобнее использовать не монослойные, а суспензионные культуры. Некоторые клетки, особенно кроветворные, лучше растут в суспензионной культуре. Другие клетки могут быть адаптированы или отобраны на рост в суспензии. И наконец, небольшая часть клеток, например линии диплоидных клеток человека ( 1-38, МКС-5), вообще не выживает в суспензии. Помимо всего прочего некоторые клеточные продукты могут экспрессироваться, только когда клетки существуют в монослое либо после образования межклеточных контактов (например, для распространения внутриклеточных вирусов по клеточной популяции), что также ограничивает возможность использования суспензионной культуры. [c.94]

Например, многие из этих клеточных линий характеризуются избыточной экспрессией иротоонкогена туе или родственных ему генов N-тус и L-my . Часто это связано с амплификацией соответствующей области и проявляется в кариотипе как двойные минихромосомы или гомогенно окрашивающиеся хромосомные участки (рис. 21-31, см. также разд. 21.1.13). В этих же клетках гены семейства ras нередко претерпевают специфические точковые мутации. Амплификация гена туе всегда коррелирует с особенно быстрым ростом опухолевых клеток в культуре и с полным подавлением дифференцировки. Больных, имеющих опухоли с амплификацией этого гена, ждет особенно плохой прогноз. [c.478]

Среди гормонов наиболее важным для обеспечения роста почти всех типов клеток в культуре оказывается инсулин. Этот гормон обычно добавляют в культуру в относительно высокой концентрации, так как он быстро распадается, а также инактивируется цистеином. Глюкокортикоиды (гидрокортизон, дексаметазон) могут стимулировать или подавлять рост клеток в культуре в зависимости от типа клеток и их плотности. Глюкокортикоиды влияют на пролиферацию клеток, изменяя их чувствительность к факторам роста. Некоторые линии клеток нуждаются в других стероидных гормонах (эстрадиол, тестостерон, прогестерон см. табл. 2.2). Гормоны щитовидной железы (главным образом трииодтиронин) оказываются активными в поддержании роста некоторых клеточных линий (см. табл. 2.2 в таблице приведены ссылки на работы, в которых была показана активность этих и некоторых других факторов в поддержании роста клеток в культуре). [c.29]

Интерферон в концентрациях от 10 до 1000 ед. в 1 мл подавляет размножение самых разных клеток. И хотя такой диапазон концентраций, при которых интерферон оказывает заметное действие, частично связан с тем, что исследования были проведены в различных лабораториях, тем не менее ясно, что одни клетки более чувствительны к подавляющему действию интерферона, а другие менее. Интерфероны регулируют рост клеток многих типов, включая первичные клеточные культуры, стабильные клеточные линии, нормальные и опухолевые клетки [44, 179. В настоящее время внимание сосредоточено на противоопухолевом действии интерферонов [83, 84], которое изучают на индуцируемых вирусом и трансплантируемых опухолях на экспериментальных животных, а также на раковых больных. В обсуждении мы рассмотрим некоторые из основных механизмов, которые лежат в основе их антипролиферативного и противоопухолевого действия. [c.68]

Многочисленные аналогии с описанным поведением клеток в опухоли можно найти в поведении культивируемых клеток. Трансформация клеток в культуре может-проявляться в продукции активатора плазминогена, сни- жении зависимости клеток от сыворотки или потере контактного торможения роста и движения. Последний феномен называют также ингибированием роста и движения, зависящим от плотности. Нормальная клетка пр№ контакте с другой клеткой прекращает движение в прежнем направлении и начинает двигаться назад. Если непосредственно рядом с клеткой имеется так много других, что обратное движение невозможно, клетка округляется. При такой плотности клеток рост культуры нередко-вообще прекращается. Трансформированная же клетка не только не поворачивает назад, наткнувшись на другую, но, напротив, проползает под или над ней, не меняя направления движения. Размножение трансформированных клеток менее чувствительно к локальной плотности культуры. Потеря зависимости от прикрепления к субстрату in vitro — свойство, которое сильнее всего сближает культивируемые клетки с опухолевыми клетками в организме. Клетки, растущие в суспензионной культуре, почти во всем сходны с клетками, образующими опухоли у животных. Перечисленными выше свойствами необязательно обладают все трансформированные клетки. Наиболее обычный порядок событий при опухолевой трансформации состоит в том, что сначала снижается-зависимость клеток от сыворотки, а затем — зависимость от прикрепления к субстрату путем соответствующего отбора можно, однако, получить клеточные линии,, требующие для роста сыворотки, но не требующие при-креплейия К субстрату [199]. [c.105]

Каждый год в США выявляется около 140 тыс. новых больных раком легкого До сих пор эффективных методов лечения этой формы рака не существует, и более 90% таких больных умирает в течение года с момента установления диагноза. Для понимания молекулярнобиологических особенностей этого вида злокачественной опухоли были проведены детальные исследования одной из его форм -мелкоклеточного рака легкого, на долю которого приходится 20% всех случаев рака этой локализации. Полагают, что мелкоклеточный рак развивается из нейроэндокринных клеток легкого, секретирующих гастринвысвобождающий пептид (ГВП его называют также бомбезином из-за сходства с нейропептидом земноводных того же названия) и другие локальные химические медиаторы. Из опухолей различных больных этим видом рака было выделено и проанализировано более сотни культивируемых линий клеток. Эти клетки демонстрируют широкий спектр аномалий, к тому же варьирующих от линии к линии. Выявлены изменения но крайней мере в десяти известных онкогенах и генах-супрессорах опухолевого роста, многочисленные хромосомные делеции и транслокации, а также нарушения в секреции сигнальных молекул, влияющих на клеточную пролиферацию. [c.478]

М. Бейтсом, К. Гудменом и М. Спитцером (М. Bates, G. Goodman, М. Spitzer). У эмбриона нервный тяж сравнительно тонок и прозрачен, что позволяет на живой особи наблюдать в микроскоп не только отдельные клетки, но и их конусы роста, а также использовать внутриклеточные микроэлектроды для регистрации электрической активности и введения красителя. На нескольких типах нейронов удалось проанализировать полную последовательность всех стадий процесса — от клетки-предшественника до зрелого нейрона. Как показано на рис. 10.6А, Б, некоторый ганглий, например третий грудной, содержит определенный набор клеток-предшественников. Имеется латеральная группа из 30 нейробластов (НБ) и расположенная по средней линии группа медианных клеток-предшественников (МК), а также одиночный медианный нейробласт (МНБ). Справа на рисунке показана последовательность клеточных делений. Каждая МК делится только один раз. Каждый НБ делится несколько раз, что приводит к образованию цепочки ганглиозных материнских клеток (ГМК). Каждая из них делится на ганглиозные [c.244]

ИЛ-2 образуют Тх-клетки. Функции этого цитокина включают стимуляцию деления Т-клеток. высвобождения медиаторов, таких как ИФу, индукцию роста В-клеток, а также активацию моноцитов и НК-клеток для усиления иммунного ответа. Аутологичные предшественники НК-клеток больных почечно-клеточным раком могут быть активированы in vitro высокими дозами ИЛ-2 (1000 ИЕ/мл) для получения линий так называемых лимфокин-активированных клеток-киллеров (ЛАК-клетки), которые используются для экспериментальной терапии рака. [c.208]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология