Хроматография при умеренном давлении

ХРОМАТОГРАФИЯ ПРИ УМЕРЕННОМ ДАВЛЕНИИ [c.104]

Статические методы. Простой по своей сути метод определения равновесия пар — жидкость состоит в следующем исследуемую смесь выдерживают при таких температуре и давлении, при которых паровая и жидкая фазы сосуществуют, и тщательно их перемешивают до достижения равновесия, далее отбирают пробы двух фаз и анализируют их, стараясь не нарушать сколько-нибудь заметным образом существующего равновесия. Одним из затруднений, которые могут возникнуть при низких или умеренных давлениях, является значительная масса пробы пара, необходимая для выполнения анализа, в момент отбора которой равновесие может заметно нарушиться. Поэтому при использовании оборудования этого типа желательно применять для анализа хроматографию или масс-спектрометрию, так как в этом случае объем пробы может составлять всего 1 мл или около того. [c.545]

В разд. 24-2 показано, что скорость потока в оптимуме на кривой зависимости высоты тарелки от скорости подвижной фазы сильно зависит от диаметра частиц, и в связи с низкими коэффициентами диффузии в жидкостях оптимальная скорость потока невелика. В последнее время размеры частиц снижаются до 10— 15 мкм при диаметре 0,1 —1,0 см и длине колонки 0,1—0,5 м. При малом диаметре колонки достижимы значительные увеличения скорости потока, что приводит к сокращению времени без потери эффективности разделения [пятый член уравнения (24-14)]. При умеренной длине колонки необходимы высокие давления на входе (от 20 до 300 атм). Наблюдается значительный прогресс в развитии приборов, методик и систем детектирования [54,55] для хроматографии с высоким разрешением при высоких давлениях и скоростях. При продолжительности разделений от нескольких минут до одного часа достигается число теоретических тарелок от 1000 до 10 000, что сравнимо с параметрами газохроматографического разделения. При диаметре частиц силикагеля 20—30 мкм и 5—10 мкм и скоростях потока 0,1 см/с [56] и 1,2 см/с [57] получены высоты теоретической тарелки порядка долей миллиметра. В жидкостной хроматографии высокого давления носитель для стационарной фазы должен быть достаточно жестким, чтобы его размеры существенно не менялись при высоком давлении. Этому требованию удовлетворяют пористые стеклянные шарики. Опубликован сборник статей, посвященных актуальным вопросам жидкостной хроматографии [58]. [c.546]

Последним из обсуждаемых здесь и в данный момент наиболее популярным методом увеличения производительности хроматографа является метод, связанный с увеличением диаметра колонки. Увеличение диаметра часто применяют в совокупности с методом повторения циклов, в особенности это относится к разделениям промышленного масштаба. Поскольку при этом нет необходимости в использовании длинных колонок, необходимый перепад давлений оказывается умеренным и легко обеспечивается имеющимся в настоящее время оборудованием. Увеличение диаметра колонки — единственный способ действительного повышения допустимого размера пробы до любого требуемого уровня, и потому этот способ был наиболее тщательно исследован. Принципиальный его недостаток — уменьшение эффективности колонки. [c.99]

Для исследования белков, нуклеиновых кислот и их фрагментов большой интерес представляют принципиально новые подходы к осуществлению высокоэффективной хроматографии, развиваемые фирмами LKB и Pharma ia . По аналогии с предыдущим этп подходы можно условно объединить названием жидкостная хроматография при умеренном давлении . Рассмотрим отличительные особенности [c.104]

ИОНООБМЕННИКИ ДЛЯ ХРОМАТОГРАФИИ БЕЛКОВ ПРИ УМЕРЕННЫХ ДАВЛЕНИЯХ ФИРМЫ <(PHARMA IA [c.276]

В последнее время разработка новых материалов и методов с целью добиться хорошего разрешения идет в двух направлениях. С одной стороны, увеличение жесткости гранул позволяет Т1спользовать частицы меньших размеров (например, сефакрил S-200, 40—105 мкм вместо сефадекса G-150, 120—140 мкм) и достигать значительно больших скоростей потока вплоть до предельных, при которых за время прохождения белка по колонке равновесие не успевает установиться. Еще более мелкие гранулы требуют более высоких давлений, которых трудно достичь при рутинной работе. С другой стороны, развитие жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) дает возможность использовать очень мелкие частицы (например, 5— 10 мкм) обычно на основе силикатов, что обеспечивает высокое разрешение за очень короткое время. Однако ЖХВД — это преимущественно аналитический метод. Поэтому для разделения образца, количество которого превышает несколько миллиграммов, колонка необходимых размеров потребует снижения давления. По-видимому, эти два подхода дадут нечто среднее — жидкостную хроматографию при умеренном давлении с использованием очень тонких гранул и не слишком больших скоростей потока. [c.205]

Следует еш е раз подчеркнуть, что при этом можно ограничиться весьма умеренными перепадами давления на колонке, допустить заметный уровень его пульсации и вообще отказаться от использования дорогостоящих современных хроматографов для ЖХВД в пользу более простых систем, подобных той, которая была разработана для хроматографии белков фирмой Pharma ia и подробно описана в конце гл. 3. Разумеется, при обессоливании или смене буфера, в котором растворен белок, нет нужды вести элюцию столь же медленно, и в соответствующем примере из той же брошюры фирмы LKB использована скорость более 90 мл/см -ч. Еще большие скорости элюции могут потребоваться при использовании гель-фильтрации под высоким давлением для целей технологического экспресс-контроля, например в пищевой промышленности, но в этом случае от требования высокой разрешающей способности метода придется отказаться и нельзя будет обойтись без использования специальной аппаратуры для ЖХВД. [c.161]

Сорбенты на основе полисахаридов и их производных. Как уже упоминалось в гл. 7, наиболее распространенный и наиболее полно изученный сорбент этой группы — триацетилцеллюлоза, особенно ее микрокристаллическая форма. Это довольно дешевый материал, но его свойства могут различаться от партии к партии. Поскольку для хроматографии сорбент используют в набухшем состоянии, он подвержен до некоторой степени сжатию, хотя МТАЦ с малым размером частиц была успешно применена в стальных колонках при довольно высоком давлении (50—100 бар) [1]. Тем не менее препаративные разделения на этом сорбенте были вьшолнены только при низком или среднем давлении, которые обеспечивают лишь очень низкую эффективность колонки. И все же на колонках вполне умеренного размера можно осуществить за один прогон разделение граммовых количеств энантиомеров (рис. 9.2). [c.228]

Ппвпды против 1) умеренная потеря разрешающей способности (для веществ, характеризующихся почти одинаковой степенью удерживания) в диапазоне высоких значений Кг 2) относительно низкая скорость потока при гг - а 4 см (если не повышена приложением давления) 3) метод не так прост и доступен, как линейное элюирование 4) относительно мало число одновременно анализируемых образцов (5-10) 5) не может быть реализован двухмерный вариант тонкослойной хроматографии. [c.289]

Впервые применение газо-жидкостной хроматографии для определения комплексов металлов было описано в работе [303]. Было показано, что при разделении на колонке с 31% н-гексаде-кана на хромосорбе отношение обратных времен удерживания Sn U и Ti U почти равно отношению давлений их паров. Частичное разделение оптический изомеров гексафторацетилацетонатов хрома(III) было впервые осуществлено [304] на колонке с правовращающим кварцем (80—120 меш). Позднее эта же группа авторов исследовала газохроматографическое поведение хелатов металлов с ацетил ацетоном, трифторацетилацетоном и гексафтор-ацетилацетоном [305]. Разделение многокомпонентных смесей проводилось быстро и эффективно. Разделение смеси удалось значительно улучшить при применении программирования температуры и термоионного детектора. Хилл и Гессер [306] для разделения р-дикетонатов бериллия, алюминия и хрома использовали колонку с 7,5% SE-30 на огнеупорном кирпиче (40—60 меш). Эти авторы получили хорошее разделение при умеренных временах удерживания. [c.261]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология