Сбор вирусов

По прошествии 24—72 ч приступайте к сбору вируса (разд. 9.4.3). Оптимальное время находят эмпирически, отбирая пробы с интервалом в 12— 24 ч и определяя титр каждого препарата (разд. 9.6.1). [c.289]

Яйца помещают на лотки воздушным пузырем (т. е. тупым концом) вверх и держат в обычном термостате в течение 3 дней <68—72 ч) при 35°С. После этого их охлаждают (оставив при 4°С на ночь или по меньшей мере на 3 ч), чтобы остановить кровообращение и таким образом предотвратить кровотечение при сборе вируса. [c.398]

Перед сбором вируса скорлупу над воздушным пузырем разламывают и удаляют. Проколов обнаженную мембрану и отодвинув эмбрион в сторону с помощью стерильного пинцета, стерильной пастеровской пипеткой (с коротким капилляром и желательно с широким отверстием) отсасывают аллантоисную жидкость. В среднем получают около 10 мл жидкости из одного яйца со значительными индивидуальными колебаниями. Нужно [c.398]

Размножение вируса и его выход из клеток обычно сопровождаются дегенерацией последних, причем цитопатическое действие (ЦПД) наиболее четко выражено при размножении вируса в монослое клеток. Начиная работу, полезно ставить в качестве контроля незараженную культуру, хотя обычно дегенерация клеток очевидна и выражается в их частичной гибели и деструкции монослоя. Рис. 2.1 иллюстрирует ЦПД, вызываемое полиовирусом. Однако размножение пикорнавирусов не всегда сопровождается видимыми эффектами. Вирус гепатита А не дает заметного ЦПД в клетках РКЬ К-6, причем в культуральной среде воспроизводимо обнаруживается лишь небольшое количество вируса. Обычно при достижении максимального ЦПД энтеровирусы полностью высвобождаются из зараженных клеток, в то время как риновирусы остаются частично связанными с клетками. В некоторых случаях очень важно время сбора вируса так, имеются сообщения, что вирионы вируса ящура содержат связанную рибонуклеазу, которая разрушает геномную РНК, если собирать вирус через 12, а не через 8 ч после заражения [14]. Аналогичные данные имеются и для риновирусов. [c.49]

Методика учета результатов и сбора вируса [c.70]

Культивирование тогавирусов уже детально рассмотрено в одном из предыдущих разделов настоящей главы. Оптимальную систему для культивирования следует подбирать специально в каждом случае. В целом лучшей можно считать ту систему, в( которой вирус дает максимальный титр, хотя нужна иметь в виду, что очистка вируса из тканей зараженных животных, например экстрактов мозга, затруднена в связи с большим содержанием в препаратах клеточных компонентов кроме того, радиоактивное мечение вируса в организме животных, как правило, невозможно. В тех случаях, когда вирус хорошо размножается в культуре ткани, имеет смысл потратить некоторое время, чтобы оптимизировать его выход. Выбор же таких параметров, как чувствительная линия клеток, культуральная среда, множественность инфекции, температура инкубации и время сбора вируса, существенно влияет на выход. При опти- [c.95]

Через 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12 и 18 ч после заражения соответствующие чашки обрабатывают для сбора вируса, как описано выше (см. стадии 10—12). [c.115]

Извлечение или сбор крупных вирусов и фагов 0,1 Эфир целлюлозы [c.220]

Борьба с грызунами в парниках, выращивающих рассаду Пропаривание грунта в теплицах Очистка кочанов капусты от поврежденных листьев и гнили Отряхивание на полотно (пленку), сбор и уничтожение долгоносиков Сортовая прочистка картофеля (удаление сортовых примесей и больных вирусом кустов) Побелка и обмазка штамбов и скелетных ветвей известью в смеси с глиной Обмазка срезов и ран деревьев краской, садовым варом, глино-навозной замазкой с обвязкой мешковиной [c.360]

Стряхивание на полотно (пленку), сбор и уничтожение долгоносиков Сортовая прочиСтка картофеля (удаление сортовых примесей и зараженных вирусом кустов) [c.157]

Четыре компонента вируса существуют в виде частиц различного размера. Это означает, что один и тот же капсидный белок может упаковать каждую РНК в характерную именно для нее частицу. Такой способ упаковки отличается от способа упаковки отрезков нуклеиновой кислоты одного размера в капсиды определенной формы. Однако и у вирусов, имеющих только одну правильную форму капсида, в процессе сбор и могут возникать измененные формы капсида. Речь идет о частицах-монстрах, головка которых длиннее обычной. Таким образом, белку (или белкам) капсида присуща способность собираться в структуру определенного типа, но точный размер и форма этих структур не инвариантны. Во многих случаях существуют также белки сборки, которые не входят в состав оболочки головки, но способствуют правильной сборке частицы. Клеточные геномы также используют белки, функция которых-направлять сборку других белков (см. гл. 29). [c.347]

Сбор и хранение вируса оптимизация условий для повышения титра [c.293]

Во Всесоюзном научно-исследовательском институте табака и махорки М. Ф. Терновский иа основе сложной межвидовой гибридизации получил несколько сортов табака, занимающих более 85% общей площади этой культуры. Они обладают комплексным иммунитетом к наиболее распространенному вирусу табачной мозаики и таким вредоносным болезням табака, как корневая гниль и мучнистая роса. В результате внедрения этих сортов в производство сбор табачного листа в стране увеличился более чем в 2 раза. [c.274]

Сбор зараженных клеток и первая экстракция вируса [c.204]

Примерно через 24 ч после заражения клетки отделяются от стекла, что облегчает их извлечение из флаконов по окончании размножения вируса. В наших опытах включение трипсина в культуральную среду не оказывало какого-либо существенно положительного или отрицательного влияния на выход вируса, однако трипсин вызывает отделение клеток от поверхности стекла, что значительно упрощает их сбор. Это важно, поскольку большая часть вируса в конце цикла размножения остается ассоциированной с клетками. [c.211]

Клетки собирают после максимального проявления признаков ЦПД. Методика сбора клеток зависит от штамма вируса и линии клеток. Так, в случае штамма ПРЕМ и клеток линии ВПК основную массу среды можно удалить из культурального сосуда без потери вируса (поскольку лизируется и отрывается от подложки небольшое число клеток). Затем клетки собирают в оставшуюся среду стерильной резиновой палочкой и центрифугируют при малой скорости. При работе с другими штаммами вируса, например штаммом 186 (ВПГ-2), инфицированные клетки удается собрать только центрифугированием культуральной среды, поскольку большая часть клеток отрывается от поверхности сосуда. Если лизис клеток уже произошел, необходимо использовать среду как составную часть заготовки вируса. Клетки собирают центрифугированием, а затем ресуспендируют в выбранной среде, например стерильной дистилли- [c.273]

Можно указать на некоторые другие применения ультрафильтрации в промышленности и фармакологии очистка антибиотиков, концентрирование и диафильтрация альбумина, процесс непрерывного сбора продуктов ферментации, очистка кристаллизационных растворов и кондиционирование поверхности кристаллов, очистка сывороток диафильтрацией при получении диагностических реактивов концентрирование и очистка ферментов, фракционирование макромолекул, концентрирование гормональных препаратов, стерилизация растворов для внутривенного введения, удаление пирогенных веш,еств, концентрирование вирусов, регенерация масляно-эмульсионных смесей, очистка стоков и регенерация растворов гальванических производств. [c.366]

Ультрацентрифуги фирмы Весктап снабжают еще и проточным ротором типа F-32Ti, допускающим частоту вращения до 32 тыс. об/мин. Его используют обычно для сбора вирусов из большого объема лизатов. Операции такого рода им.еют лишь косвенное отношение к исследованию белков и нуклеиновых кислот, поэтому конструкция проточного ротора здесь не рассмотрена. [c.197]

Чаще всего суспензию вирусного материала вводят в аллантоисную полость или, реже, на хорионаллантоисную оболочку в количестве 0,05-0,1 мл, прокалывая продезинфицированную скорлупу (например, иодированным этанолом) на расчетную глубину. После этого отверстие закрывают расплавленным парафином и эмбрионы помещают в термостат, в котором померживается оптимальная температура для репродукции вируса, например 36-37,5°С. Продолжительность инкубации зависит от типа и активности вируса. Обычно через 2-4 суток можно наблюдать изменение оболочек с последующей гибелью эмбрионов. Зараженные эмбрионы контролируют ежедневно 1-2 раза (овоскопируют, поворачивают другой стороной). Погибшие эмбрионы затем передают в отделение сбора вирусного материала. Там их дезинфицируют, аллантоисную жидкость с вирусом отсасывают и переносят в стерильные емкости. Инактивацию вирусов при определенной температуре проводят обычно с помощью формалина, фенола или других веществ. Применяя высокоскоростное центрифугирование [c.545]

Борьба с переносчиками вируса — тлями, а также сорными растениями — резерваторами вируса. Раздельный сбор хлопка-сырца с больных и здоровых растений и последующая раздельная их очистка. Выделение на семена участков, не содержащих вирусных растений. Ранние посевы хлончапшка, предотвращение изрежнвания посевов, внесение фосфорных удобрений. [c.177]

Можно назвать множество примеров использования микрофильтрационных мембран в качестве фильтров для сбора частиц, подвергаемых затем анализу сбор бактерий для прямого подсчета с помощью микроскопа в прошедшем свете подсчет частиц в напитках подсчет фитопланктона измерение и подсчет инертных частиц подсчет асбестовых волокон, раковых клеток, адсорбция и элюирование вирусов и подсчет жизнеспособных водопереносимых бактерий [7]. Электрофорез является электрически управляемым процессом, в котором белковые фракции разделяются либо в микропористых ацетатцеллюлозных гелях [8], либо в ультрапористых агаровых или полиамидных гелях. Активному возбуждению гибридизации нуклеиновой кислоты помогает способность нитрата целлюлозы сильно сорбировать ДНК, поэтому и ДНК ДНК-, и ДНК РНК-гибриди-зации могут быть осуществлены на мембранном фильтре [7]. [c.85]

При сборе вирусных частиц из природных проб необходимо применять специальные методы их концентрирования. Вирусы можно сконцентрировать из водных образцов при неоднократной ад-сорбции/элюции подкисленных проб при пропускании их через эпоксидные, фиберглассовые или нитроцеллюлозные фильтры. Сорбированные частицы затем элюируют щелочными растворами. Процедуру можно неоднократно повторять, тысячекратно концентрируя вирусные частицы, например из морской воды или проб осадков. [c.254]

J. Almond [4] выделял мутанты FPV методом увеличения бляшек или спонтанно (Sp-серии), выращиванием с 5-ФУ (mF- e-рии), обработкой вируса дикого типа 100 мкг/мл NTG (inN-серии) или 50 мкг/мл NTG (без обозначения). Он выделил также 5-ФУ-индуцированные мутанты путем сбора и исследования каждой бляшки (US-серии). Его результаты исследования 49 мутантов сводятся к следующему [c.193]

Цветная вклейка 1 иллюстрирует влияние опрыскивания иа внешний вид посевов во время сбора уро кая. Более светлый цвет обработанных участков зависит от созревапия растеиий. Опрыскивание посевов риса системными инсектицидами снизило зараженность вирусом [1316]. [c.458]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология