Радиоиммуноанализ

Чрезвычайно чувствительный и избирательный иммуноанализ используется при определении концентраций молекул, к которым могут быть получены антитела. Иммобилизация исследуемого вещества или антитела приводит к значительному упрощению иммуноанализа (радиоиммуноанализ, ферментативный иммуноанализ и метод флуоресцентных антител). [c.380]

Таблица 6.13. Твердофазный радиоиммуноанализ

Как стабильные , так и радиоактивные изотопы широко используются в химических и биологических исследованиях. Введение изотопных меток произвело целую революцию в изучении метаболизма. В одном из первых биологических экспериментов, основанных на использовании стабильного изотопа (регистрируемого масс-спектрометрически), Шен-геймер с сотрудниками в 1937 г. обнаружили неожиданно высокую скорость обновления белков в живых тканях (гл. 14, разд. Б). Используя СО2, Кэлвин и др. впервые проследили путь углерода в процессе фотосинтеза (дополнение 11-А). Аналогичным образом применение изотопов Р и 5 позволило изучить метаболизм фосфора и серы тритий ( Н) нашел широкое применение для мечения разнообразных органических соединений, например тимина. Использование радиоактивных изотопов лежит в основе чувствительных аналитических методов, к числу которых относится радиоиммуноанализ [c.168]

Стандартным методом онределения содержания лекарственных веществ является ГХ-МС. Капиллярная ГХ широко используется для предварительной проверки. Радиоиммуноанализ позволяет провести проверку быстрее и является более экономичным, однако метод характеризуется невысокой надежностью (35%) и специфичен только для некоторых лекарственных средств. Капиллярная ГХ является более универсальным методом, характеризующимся высокой чувствительностью и воспроизводимостью. Поэтому ГХ широко используется во многих лабораториях для проведения предварительной проверки. [c.117]

Радиоиммуноанализ становится широко распространенным методом, особенно для наркотиков, гормонов, химиотерапевтических средств, антибиотиков, иммуноглобулина и т. п., как это показано в обзорных статьях и книгах [3, 154, 214, 460, 679]. [c.381]

За последние 25 лет благодарят появлению новых, альтернативных радиоиммуноанализу методов иммуноанализа коренным образом изменились наши представления о возможностях, а также [c.150]

Концентрация LH поданным радиоиммуноанализа,ед./л [c.159]

К настоящему времени эндорфины найдены в центральной нервной системе, в спинномозговой жидкости, в почках, в нервных волокнах Желудочно-кишечного тракта, в крови, плаценте и гипофизе. Для изучения распределения эндорфинов используется иммуно-цитохимическая техника и радиоиммуноанализ. Поскольку различные опиатные пептиды имеют значительное структурное сходство, стало возможным получить антитела для всей группы пептидов. Показано, что высокомолекулярные эндорфины, прежде всего, вероятно, стабильный к протеазам /3-эндорфин, коИцент Яв1У -ются в гипофизе и гипоталамусе. Энкефалины найдены преимуШествеиНо в [c.293]

Следовательно, процесс состоит в ингибировании связывания чистого меченого антигена антителом под влиянием немеченого антигена, содержание которого и определяется. Если система находится в равновесии, радиоактивность, связанная с антителами, отделяется от несвязанной радиоактивности, а затем измеряется одна из них. По этим данным можно рассчитать содержание немеченого антигена в неизвестном образце. Предел обнаружения в методе радиоиммуноанализа 10 "—моль, т. е. метод позволяет количественно определять большинство биологически активных соединений, которые находятся в бнологичеоких системах в нанограммовых и ппкограм1Мовых количествах. Метод существенно упрощен благодаря использованию связывания антител на нерастворимых носителях [178, 1272]. [c.381]

Антисывороткн, ковалентно связанные с агарозой, целлюлозой и сефадексом, в системах радиоиммуноанализа белков и гаптенов исследовались Болтоном н Хантером [135], Показано, что ковалентное связывание с нерастворимой матрицей е оказывает неблагоприятного влияния на антисыворотку. Ухудшение чувствительности анализа обусловлено в большинстве случаев иространствен-ными затруднениями для высокомолекулярных антигенов. Богданов и Страш [131] указали на возможные ошибки радиоиммуно-анализа, возникающие из-за большого объема атома радиоактивного иода. [c.381]

Примером применения твердофазного радиоиммуноанализа является определение орнитиитранскарбамилазы, синтезируемой в системе транскрипции — трансляции, управляемой геном argF, вводимым специализированным трансдуцирующим бактериофагом [336]. [c.381]

Ингвал и др. [324] применилн принцип радиоиммуноанализа, описанный для определения кроличьего иммуноглобулина G однако вместо меченных радиоактивным изотопом антигенов они конъюгировали последние с ферментом — щелочной фосфатазой. Основой конкурентного иммуноаналнза является разделение свободных и связанных с антителами антигенов, так чтобы антигены можно было определить количественно. Это разделение можно облегчить фиксацией антител на твердой фазе путем физической сорбции на стенках полистирольных пробирок. [c.382]

Если получены два антитела к стерически различным участкам белкового продукта ОРС, их можно использовать для специфической детекции этого белка с помощью радиоиммуноанализа. При этом методе одно из антител (связывающий агент) иммобилизуется на пластике, из которого изготовлены лунки планшета. Второе антитело (антитело второго порядка) иодируется до достижения высокой удельной радиоактивности (100 мкКи/мкг) с помощью специального метода (табл. 6.12). Метод твердофазного радиоиммуноанализа подробно приводится в табл. 6.13. [c.199]

Другие методики. Когда определение ферментативной активности или прямые измерения радиоактивности не подходят для контроля элюирования, следует рассмотреть другие возможности для анализа связывания. Наибольшего внимания в качестве общего чувствительного метода количественного измерения подвижного компонента заслуживает, по-видимому, радиоиммуноанализ. Кроме того, может оказаться целесообразным измерение количества элюированного подвижного компонента с помощью количественного лигандсвязывающего анализа, например в случае доступности радиоактивно меченного лиганда, аналогичного по структуре иммобилизованному лиганду. [c.232]

Твердофазные иммунореагенты вначале использовали для выделения антигенов и аитител. Впоследствии иммобилизованные антитела применили для радиоиммуноанализа белков [1, 2] и гаптенов [3,4 ], где с их помощью удалось упростить разделение свободного и связанного с антителами определяемого вещества. Реагенты (антитела или антигены) связывали с носителем или ковалентно, или с помощью пассивной адсорбции. Ковалентное связывание требует проведения химических реакций и тщательной очистки готового продукта. Связывание путем пассивной адсорбции занимает много времени, а полученные таким способом реагенты сложно ис- [c.52]

В последние годы в качестве стандартного метода определения различных соединений в клинической химии все большее распространение получает иммуноаналиэ, отличающи11Ся хорошей чувствительностью, специфичностью и широкой сферой применения. В частности, иммуноаналиэ применяют для определения гормонов, лекарственных препаратов, наркотиков, белков и низкомолекулярных органических загрязняющих веществ (например, пестицидов). Наиболее ствительны методики радиоиммуноанализа (РИА), однако они ооладают рядом недостатков. Радиация опасна для здоровья, и поэтому при проведении РИА в лаборатории необходимы особые меры предосторожности. Кроме того, в РИА усложнена стандартизация, так как срок пригодности наборов РИА зависит от периода полураспада радиоактивной метки. Наконец, для РИА необходимы специальные реагенты и дорогие счетчики сцинтилляции. [c.138]

В этой главе рассматриваются методы иммуноанализа не требующие радиоактивных меток. Очевидно, чтобы оказаться достаточно жизнеспособными, эти новые альтернативные методы иммуноанализа по своим характеристикам не должны уступать им-мунорадиометрическому анализу (ИРМА) или радиоиммуноанализу (РИА). Кроме того, альтернативные методы иммуноанализа должны иметь большие потенциальные возможности для дальнейшего повышения чувствительности, бьпъ простыми, дешевыми, требовать как можно меньше времени для проведения анализа и т.д. При этом альтернативные методы иммуноанализа должны сохранять высокую специфичность и точность. [c.150]

В настоящее время очевидно, что хемилюминесцентные метки могут заменить радиоактивные соединения. Более того, в имму-иометрических методах хемилюмтаесцентные метки позволяют добиться таких характеристик, которые в принципе невозможны в системах на основе 1. Хотя методы иммуноанализа с неизотопными метками разрабатываются в течение кшогих лет, только сейчас появилась реальная возможность использовать все их преимущества. Вероятно, сейчас радиоиммуноанализ следует рассматривать уже как устаревший подход. [c.186]

Аналогичные результаты определения TSH позднее были получены методом радиоиммуноанализа (РИА) с набором реагентов Behring HS-TSH. Вероятно, этот пациент ошибочно был включен в группу больных тиротоксикозом. [c.231]

Сериани с сотрудниками предоставили данные, показывающие наличие специфических антигенов молочной железы в нормальных и опухолевых клетках молочной железы. Эти исследователи иммунизировали кроликов обезжиренным препаратом верхней фракции отстоенного молока человека. Видоспецифические антитела удалялись из этой сыворотки путем адсорбции на эритроциты человека. Результаты непрямого иммунофлуоресцентного анализа показали, что антитела, содержащиеся в такой антисыворотке, специфически связываются с линиями клеток нормальной молочной железы и карциномы молочной железы человека. Был предложен чувствительный метод радиоиммуноанализа, позволивший получить количественное подтверждение этих результатов. Семь линий карциномы молочной железы и первичные культуры эпителия молочной железы связывали по крайней мере в 10—30 раз больше антител, чем фибробласты молочной железы и эпителиальные клетки из других источников. Трипсинизация клеток МСР-7 и МДА-МВ-157 приводила к снижению реактивности клеток на 80—84%, что указывало на поверхностную локализацию антигенов, специфических для молочной железы [38]. [c.152]

Смотреть страницы где упоминается термин Радиоиммуноанализ: [c.257] [c.3] [c.74] [c.28] [c.380] [c.383] [c.260] [c.448] [c.199] [c.175] [c.175] [c.230] [c.12] [c.53] [c.85] [c.108] [c.178] [c.181] [c.206] [c.55] [c.142] [c.143]

Биологическая химия (2002) -- [ c.257 ]

Кинетические методы в биохимическихисследованиях (1982) -- [ c.259 , c.260 , c.267 ]

Новое в клонировании ДНК Методы (1989) -- [ c.198 , c.200 ]

Иммунология (0) -- [ c.530 , c.531 ]

Биосенсоры основы и приложения (1991) -- [ c.57 , c.497 , c.547 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология