Комплексообразование химотрипсина

Таблица 57. Термодинамические параметры комплексообразования химотрипсина (pH 7,8)

В качестве примера сравним характеристики комплексообразования с активным центром а-химотрипсина двух красителей [61], а именно профлавина [c.30]

Влияние среды на гидрофобное взаимодействие активного центра химотрипсина с субстратами и ингибиторами. Исследование эффектов среды — это классический подход к изучению природы комплексообразования. В-приложении к химотрипсину результаты таких исследований подтвердили гидрофобный характер фермент-субстратных взаимодействий. [c.143]

Рис. 69. Зависимость (5.206) обратного времени релаксации комплексообразования (5.197) а-химотрипсина (ХТ) с красителем акрифлавином (АФ) от суммы равновесных концентраций фермента и красителя [41]

Зависимость времен релаксации комплексообразования профлавина с а-химотрипсином от суммы равновесных концентраций реагентов [c.201]

В работе [8] было показано, что нековалентный комплекс ксантенового красителя родамина 60 с активным центром а-химотрипсина представляет собой соединение включения . На основании данных табл. 8 определить значение энергии активации реакции комплексообразования. [c.255]

Эта теория требует, чтобы промежуточный комплекс был реакционноспособным и нестабильным, и, следовательно, весьма маловероятно, чтобы какой-либо промежуточный комплекс удалось выделить и непосредственно изучить. С другой стороны, эта теория постулирует, что ингибиторы действуют, кроме того, путем комплексообразования с ферментом, давая относительно стабильные соединения. Успешное выделение и идентификация некоторых соединений ингибитор — фермент дают существенное подтверждение теории. Такие комплексы образуются между трипсином 114] или химотрипсином [15] и ингибитором следующего строения . 0 [c.112]

Существуют примеры, показывающие, что механизм комплексообразования, обладающий характерными чертами механизма включения , имеет место. Так, энергия активации комплексообразования родамина-60 с. активным центром а-химотрипсина равна 17-1-1 ккал/моль, в то время как энергия активации процессов, контролируемых диффузией, не превышает 2—3 ккал/моль. Это является свидетельством в пользу механизма, связывающего энергетический барьер комплексообразования с термодинамически невыгодной конформационной перестройкой акцептирующего белкового центра в переходном состоянии образования комплекса. [c.217]

Особенностью этих соединений является значительное изменение спектров поглощения или флуоресценции при связывании с ферментом. Этот спектральный сдвиг трактовался [25671 как следствие изменения диэлектрической проницаемости среды при комплексообразовании красителя с белком, причем свойства активного центра химотрипсина в этом отношении близки к свойствам циклогек-сана. Однако спектральный сдвиг красителя, по-видимому, определяется не столько диэлектрической проницаемостью, сколько" показателем преломления среды [2568]. [c.242]

Константы равновесия в том и другом случае отличаются незначительно (в 2—4 раза). В то же время при переходе от профлавина к родамину 6Q процесс комплексообразования красителя с активным центром замедляется почти в 10 paat Структуры молекул этих лигандов различаются в основном лишь тем, что молекула родамина 6Q содержит дополнительное бензольное кольцо. Как показало изучение температурной зависимости кинетики комплексообразования, энергия активации этого процесса порядка 17 ккал/моль (71,4 кДж/моль). С другой, стороны, известна, что энергия активации процессов, контролируемых диффузией, не превышает, как правило, 5 ккал/моль (21 кДж/моль) [62, 63]. Поэтому следует заключить, что образование комплекса химотрипсина с более объемной молекулой родамина 6G возможно лишь в результате конформационных изменений в молекуле фермента. Такой механизм (1.8) комплексообразования органических молекул с белками, по-видимому, весьма распространен. [c.31]

Те же закономерности характеризуют также и кинетику гидролиза химотрипсином специфических аминокислотных субстратов как на стадии ацилирования, так деацилирования [21, 113]. Пространственное взаимоотношение сорбционной и каталитической областей в активном центре нашло отражение также и в эффективности комплексообразования с химотрипсином бифункциональных ингибиторов, алкил- и фенилалкилборных кислот [114, 115]. [c.150]

Величина называется временем релаксации. При анализе зависимости времени релаксации от равновесных концентраций Е и А могут быть найдены элементарные константы скорости реакции (5.197). В качестве примера на рис. 69 приведены кинетические данные реакции комплексообразования активного центра а-химотрипсина с красителем ак-рифлавином [41]. Представленные экспериментальные данные хорошо описываются уравнением (5.206). По тангенсу угла наклона и отрезку, отсекаемому на оси ординат, найдены, соответственно, константы скорости процесса комплексообразования 12 = 2,4-10 М" -с , = = 2,7-10 с-1. [c.208]

В качестве примера рассмотрим механизм комплексообразования с активным центром а-химотрипсина красителя профлавина [411. Кинетическая кривая комплексообразования описывается суммой двух экспоненциальных членов. Из их цоказателей были найдены два времени релаксации и т . На рис. 70 представлена зависимость функции от суммы равновесных концентраций фермента и красителя. В соответствии с уравнением (5.214) по тангенсу угла наклона этой зависимости определяется константа скорости Отрезок, отсекаемый на оси ординат, дает сумму констант 21 + 23 + Соответственно из зависимости функции от равновесных концентраций фермента [c.210]

В таблице 5 приведена температурная зависимость константы ассоциации диэтилглутарата с активным центром а-химотрипсина [5]. Определить значения стандартных энтальпии и энтропии комплексообразования. [c.253]

Ковалентные комплексы чрезвычайно важны с точки зрения химии, но с точки зрения энзимологии они не столь интересны. Наиболее ферментоподобными являются нековалентные комплексы, как, например, комплексы, образуемые циклоамилозой. Пиклоамилозы и их производные прекрасно моделируют такие ферменты, как химотрипсин, рибонуклеазу, трансаминазу [27] и карбоангидразу [28]. Высокие каталитические свойства проявляют полимерные комплексы. Показано, что скорости реакций в обращенных мицеллах приближаются к ферментативным [25]. Очевидно, что катализ, движущей силой которого выступает комплексообразование, будет интенсивно исследоваться в ближайшие годы. [c.341]

Рис.84. Зависимость свободной енергии комплексообразования ароматических соединений с химотрипсином от площади их поверхности [2413,2555]

Для всех перечисленных соединений константы равновесия комплексообразования составляют около 1.10 -1 10 М, что соответствует изменению свободной энергии 4,2-5,5 ккал/моль. Величина энтальпии комплексообразования, например ацетилтриптофана с химотрипсином, составляет -9 ккал/моль [24693. Таким образом, наблюдаемая энергия комплексообразования, по-видимому, намного ниже, чем та энергия, которая получается расчетным путем при суммировании всех взаимодействий белка и лиганда. [c.302]

В качестве примера на рис. 2.46 приведены кинетические данные реакции комплексообразования активного центра а-химотрипсина с красителем ак-рифлавином. Представленные экспериментальные данные хорошо описываются уравнением (2.114). По тангенсу угла наклона и отрезку, отсекаемому на оси ординат, найдены константы скорости процесса комплексообразования 2,4-10 М- -с- , А 2,1= 2,7-102-с- . [c.174]

Реакция образования комплекса индометацин — PGH-син-тетаза имеет константу скорости бимолекулярного взаимодействия 6,3-10 М" с . Это значение на семь порядков ниже диффузионно контролируемого предела. Однако в настоящее время накапливается все больше фактов, свидетельствующих в пользу того, что кинетика образования комплексов с низкомолекулярными лигандами может быть чувствительна к структуре органического лиганда. Так, введение в аспарагиновую кислоту метильной группы почти в Ю раз уменьшает константу скорости комплексообразования этого субстрата с активным центром аспартатаминотрансферазы. При переходе от профлавина к родамину GG, имеющему геометрически большую молекулу, процесс комплексообразования лиганда с активным центром а-химотрипсина замедляется в 10 раз, в то время как константа равновесия практически не меняется. [c.215]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология