бромдезоксиуридин

Рис. 46. Схема замены пары Т А на пару С С при репликации в присутствии наряду,с тимидином его аналога 5-бромдезоксиуридина (Вг и) символ всюду опущен

В течение 10—14 дней дефектные клетки элиминируются. Миеломные клетки, устойчивые к бромдезоксиуридину, дефектны по тимидинкиназе (ТК ), а устойчивые к 8-азогуанину, не содержат ГГФРТ (ГГФРТ). Эти клетки не располагают обходными путями синтеза пуринов или пиримидинов, но способны синтезировать [c.575]

Подобно рентгеновским лучам, ультрафиолетовые лучи могут повредить клетки, особенно клетки, в ДНК которых включился бромдезоксиуридин [158, 159]. По-видимому, этот эффект связан со случайными одноцепочечными ошибками в замещенной ДНК. Однако поврежденные таким образом клетки обладают способностью излечиваться , возможно выбрасывая поврежденные участки, содержащие димеры тимина, и заменяя их нуклеотидами, которые были удалены из ДНК [153—157]. [c.223]

N-Гликозидная связь в ряде пиримидиновых дезоксирибонуклеозидов (дезоксиуридине, тимидине и 5-бромдезоксиуридине) гидролизуется с заметной скоростью в нейтральной и слабокислой средах (pH 3—7). В этом интервале pH скорость гидролиза практически не зависит от pH и ионной силы среды (табл. 8.9). [c.503]

Одним из основных отличий химического мутагенеза от радиации является специфичность действия химических соединений. Известно много случаев, когда мутагенное для одного организма вещество совершенно не вызывает у другого организма мутаций (В. Н. Никифоров, 1965). Например, уретан, индуцирующий мутации у плодовой мушки, растений и бактерий, совершенно не вызывает их у нейроспоры (Ауэрбах, 1958). Уретан является также канцерогенным для мышей и крыс, но не вызывает опухолей легких у кроликов и морских свинок (Роджерс, 1957) 5-бромдезоксиуридин способен вызвать у бактерии только точечные мутации, а в культуре клеток человека — разрывы хромосом (В. Г. Никифоров, 1965). [c.302]

Рассмотрение триплетных состояний приводит к выюду, что в ДНК триплетная энергия локализуется на тиминовых основаниях. Замещение тимина 5-бромдезоксиуридином в ДНК приводит к более эффективной локализации энергии и увеличению числа повреждений в местах включения 5-бром дезоксиур иди на, что приюдит к [c.231]

Активируются ли различные единицы репликации случайным образом или же существует строгий порядок, согласно которому и удваиваются определенные области генома Для того, чтобы ответить на этот вопрос, была проведена серия экспериментов. Синхронизированную клеточную культуру, находящуюся в S-фазе, в течение коротких промежутков времени метили аналогом тимидина 5-бромдезоксиуридином (BrdU). Области митотических хромосом, включившие метку в свою ДНК. можно обнаружить в М-фазе по снижению окрашивания определенным красителем или по связыванию со специфическими антителами. Такие опыты показали, что области хромосом реплицируются в виде больших единиц, а очередность их удвоения в S-фазе для каждой хромосомы строго регламентирована (рис. 9-60). [c.139]

Связь между строением хроматина и временем репликации ДНК подтверждается данными о времени репликации отдельных генов. Популяцию растущих клеток метили бромдезоксиуридином, после чего клетки тут же разделяли по размеру центрифугированием. Так как рост клеток связан с клеточным циклом, клетки большего размера окажутся старше , и их ДНК, таким образом, будет помечена на более поздней стадии S-фазы. Из клеток каждого типа выделяли ДНК, меченную BrdU, и гибридизовали ее с серией известных ДНК-зондов, чтобы определить, какие гены она содержит. Поскольку ДНК, в состав которой входит BrdU, более плотная, ее легко можно отделить от обычной ДНК пу- [c.139]

Аналоги оснований 2-аминопурнн 5-бромурацил, 5-бромдезоксиуридин Ошибки в репликации ДНК Преимущественно 1 транзиции типа АТ-ьОС Низкая Относительно низкая эффективность [c.16]

Факторы, способные изменять степень начального радиационного поражения клетки. Установлено, что в присутствии кислорода увеличивается выход однонитевых разрывов ДНК и эффективность летального поражения клеток. Другой модифицирующий агент — бромдезоксиуридин >— включается в состав ДНК вместо тимидИна. При этом увеличивается число однонитевых разрывов и снижается радиочувствительность. [c.125]

В 1968 г. был предложен общий л етод получения ауксотрофных мутантов (Као, Риск, 1968). В основе этого метода лежали данные о том, что ДНК, содержащая 5-бромдезоксиуридин (BUdr), становится чувствительной к видимому свету флуоресцентной лампы. Эта чувствительность может быть использована для избирательной гибели прототрофов, растущих в рестриктивной среде, т. е. в среде, ограничивающей рост ауксотрофных или иных мутантов. Клетки, которые после обработки могут расти в полной среде, представляют собой ауксотрофных мутантов. Ниже приведены последовательные этапы получения ауксотрофных мутантов. [c.183]

Клетки, лишенные тимидинкиназы (клетки ТК ), можнО выделить, обработав клеточные культуры высокими концентрациями (30 мкг/мл) 5-бромдезоксиуридина, который убивает клетки, содержащие фермент тимидинкиназу, в результате включения в клеточную ДНК большого количества аналога. [c.184]

Собрать клетки и высеять их аналогичным образом, но при концентрации бромдезоксиуридина 30 мкг/мл. Это приводит к отбору высокорезистентных мутантов. [c.187]

Способность клеток к индуцированному синтезу и запасанию триглицеридов подавляется при обработке пролиферирующих (но не покоящихся) клеток бромдезоксиуридином (5 мкМ) > Это соединение, как известно, нарушает и другие системы дифференцировки (Rutter et al., 1973) в концентрации, не оказывающей влияния на скорость роста клеток. [c.221]

Фрагменты ДНК, содержащие начала репликации, выделяли по модифицированному методу Р. Мартина, (США) (рис. 23). Клетки метили в течение длительного времени [ С]-тимидином и затем (после удаления намеченных нуклеотидов из среды) в течение нескольких минут [ Н]-дезоксицитидином и бромдезоксиуридином (БДУ). Таким образом, тотальная ДНК была мечена [ С], а новообразованная — [ Н] и, кроме того, новообразованная ДНК была более тяжелой за счет включения БДУ. Как видно из рис. 23, новообразованная ДНК может присутствовать на концах длинных растущих цепей ДНК, полностью занимать только что начатые новые цепи ДНК и, наконец, находиться в области репарации ДНК. Только что начатые цепи ДНК, очевидно, содержат в своем составе начала репликации. [c.129]

У высших организмов большие перспективы для переноса чужеродной наследственной информации открываются в результате разработки метода гибридизации клеток. Недавно доказана возможность трансгеноза с помощью ДНК, выделенной из клеток и освобожденной от примесей (рис. 70). На искусственной среде выращивали клетки зародыша цыпленка. В определенный момент к ним добавляли бромдезоксиуридин, который включался во вновь синтезированные нити ДНК- По этой метке новые синтезированные за время наблюдения нити ДНК можно было отличить от старых. В эту среду одновременно добавляли ДНК, полученную от мыши и меченную тритием ( Н), что позволяло отличить ДНК мыши от ДНК цыпленка, которая или содержала, или не содержала в качестве метки бром. Через некоторое время после размножения клеток из них выделяли ДНК и выявляли в ней распределение меток по брому (ДНК цыпленка) и тритию (ДНК мыши). При этом обнаруживался обмен кусочками их ДНК ДНК мыши включалась в ДНК цыпленка н наоборот. [c.172]

Химические агенты 2-аминопурин, 5-бромдезоксиуридин гидроксиламин азотистая кислота [c.76]

Рис. 21.2. Включение 5-бромдезоксиуридина (БДУ) в ДНК в зависимости от присутствия БДУ в течение одного (А) или двух (Б) циклов репликации

Наиболее адекватной тест-системой должна служить культура клеток человека, в которой учитывают хромосомные аберрации и обмены между сестринскими хроматидами, современный метод анализа которых предложили в 1972 г. А. Ф. Захаров и Н. А. Его-лина. При репликации хромосом лимфоцитов периферической крови человека в присутствии 5-бромдезоксиуридина (БДУ) этот аналог включается на место тимидина. Если БДУ дают только в течение одного клеточного цикла, то меченой после второго цикла будет только одна хроматида из двух (см. гл. 6), если же БДУ находится в среде в течение двух клеточных циклов, то мечеными к концу второго цикла будут обе хроматиды (рис. 21.2) одна по обеим комплементарным цепям ДНК, а другая только по одной. Собственно обнаружить различие хроматид (содержащих тимидин и БДУ) удается только с помощью красителей азур-эозина, красителя Гимза, акридинового оранжевого и др., а также при исследовании флуоресценции хромосом с БДУ. После окраски акридиновым оранжевым хроматиды, не содержащие брома, светят в зеленой части спектра, а включившие бром —в красной. [c.536]

Клетки культивировали в течение двух кле юмных циклов с 5-бромдезоксиуридином (К) мкмоль), окраска по Гимза [c.537]

Определение количества белка является относительно простым методом оценки числа клеток. Этот метод особенно удобен в монослойной культуре, и важное его преимущество заключается в том, что промытые препараты могут храниться долгое время в замороженном виде это не искажает конечный результат и облегчает скрининг. Завышенная оценка числа клеток может иметь место при изучении действия некоторых препаратов, подавляющих репликацию, но не влияющих на синтез белка (например, 5-бромдезоксиуридин и метотрексат). Для монослойной культуры была разработана специальная модификация метода Лоури, использующая феноловый реагент фолина [30]. Рекомендуется также метод с амидо-черным, при котором линейность стандартной кривой сохраняется в более широком диапазоне концентраций [3]. Вывод о цитотоксичности при использовании этого метода можно делать, если изменение накопления белка в культуре в течение времени показано в нескольких точках если же точка одна, то воздействие лекарственного препарата должно быть длительным и должен существовать период восстановления. [c.276]

Смотреть страницы где упоминается термин бромдезоксиуридин: [c.168] [c.573] [c.312] [c.516] [c.318] [c.333] [c.393] [c.312] [c.139] [c.73] [c.42] [c.166] [c.73] [c.126] [c.182] [c.187] [c.187] [c.243] [c.94] [c.130] [c.140] [c.55]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология