Трипсин константы скорости

Рис. 117. Определение температуры конформационного перехода активного центра а-трипсина по температурной зависимости эффективной константы скорости ультразвуковой инактивации фермента

Рис. 102. Определение элементарных констант скоростей комплексообразования трипсина с профлавином с помощью релаксационного метода т — времена релаксации при различных значениях равновесной концентрации реагентов

При изучении взаимодействия профлавина с трипсином (схема 9.9) методом температурного скачка [14] было найдено одно время релаксации, зависящее от концентраций реагентов (табл. 15). Определить значения элементарных констант скоростей реакции [c.199]

Температурная зависимость константы скорости инактивации а-трипсина под действием ультразвука. Условия опыта pH 4,2 ионная сила 0.01М (буферный раствор) 1Е]о = 2-10- М интенсивность ультразвука 2 Вт/см [c.257]

В таблице 12 приведена температурная зависимость эффективной константы скорости инактивации а-трипсина под действием ультразвука. Найти температуру конформационного перехода и рассчитать значения энтальпии и энтропии конформационного перехода активного центра фермента. [c.258]

Ферментативные реакции часто исследуют, присоединяя к молекулам субстрата фрагмент, поглощающий свет (хромофор), атомная конфигурация которого остается неизменной в течение реакции, хотя его энергетические уровни меняются. Электронные изменения обнаруживают, изучая поглощение системы как функцию времени. Приведенный рисунок показывает изменение поглощения такого хромофора в ходе реакции, катализируемой трипсином при величине pH 5,3 и температуре 25 °С длина волны 470 нм. Предложите вероятный механизм п опишите количественно порядки реакций и константы скоростей. [c.409]

Описываемый механизм гарантирует достаточно высокую избирательность, но имеет сравнительно низкую скорость. Для большинства белков и функциональных молекул константа скорости ассоциации не превышает 10 л моль с . Скорость ассоциации достаточно велика и достигает 10 л -моль (для трипсина и ингибитора трипсина) и 10 л моль (для инсулина и рецептора инсулина). [c.179]

КОНСТАНТЫ СКОРОСТИ РЕАКЦИИ ВТОРОГО ПОРЯДКА ИНАКТИВАЦИИ ХИМОТРИПСИНА (pH 7,0) И ТРИПСИНА (pH 7.2) МЕТАНСУЛЬФОФТОРИДОМ (МСФ) И БЕНЗИЛСУЛЬФОФТОРИДОМ (БСФ) [176] [c.369]

Константа скорости этой реакции почти равна константе скорости гидролиза -нитрофенилацетата, катализируемого а-химо-трипсином (3,2 —3,3 С pH 7 25 °С) [34]. Сравнение константы скорости внутримолекулярного имидазольного участия с константой скорости аналогичного бимолекулярного процесса (имидазольная атака на я-нитрофенилацетат) в одинаковых условиях дает значение 9,4 М для эффективной молярности соседней группы. Однако, если гидролизу подвергается не ариловый, а метиловый эфир V-(4-имидазолил) масляной кислоты, то никакого участия не наблюдается. [c.78]

Рис.З. Зависимость логарифма константы скорости фосфорилирования активного центра трипсина под действием соединений ( H2 j 0)( H P(0)SX от и. X = н-С Нд (I), gH gHg (II) и С2Н (СНз)С2Нд (III). Условия опытов см. в таблице.

Бимолекулярные константы скорости реакции о(.-химо-трипсина о н-бутиловыми эфирами 0-алкилметилтиофосфоновыз кислот, (EO)(0H )P(0)S0 Hg- . Температура 25,0°С, pH = 7,6, 0,04 М Hia-веронал - Н01 буфер, концентрация ах тонитри— ла 0-0,5 об. . [c.429]

Ферменты, иммобилизованные по сополимеризационной методике, обладают гораздо более высокой устойчивостью против инактивации при повыщенных температурах, чем соответствующие нативные ферменты. Эффект стабилизации, определяемый как отнощение констант скоростей необратимой инактивации нативного и иммобилизованного препаратов, возрастает с увеличением числа связей между ферментом и носителем и достигает больших величин. Например, для а-химотрипсина, пришитого к носителю 15 связями, стабилизационный эффект составляет более 1000 раз. Такие ферментные препараты сохраняют каталитическую активность при существенно более высоких температурах. Так, например, оптимум эстеразной активности трипсина, ковалентно вшитого в полиакриламидный гель 15 связями, наблюдается при температуре 75°С, что на 25° выше оптимума активности нативного фермента. Это указывает на резкое подавление быстрых обратимых денатурационных процессов в иммобилизованном препарате. [c.130]

Вывод, сделанный на основании рассмотренных результатов физико-химических исследований, характеризующих воздействие углеводородов на структуру белков, подтвердился и при изучении влияния углеводородов на биологическую активность ферментов (на примере некоторых протеаз). Углеводороды, солюбилизированные ферментами, тормозят протеолитические реакции пепсина, химотрипсина и трипсина. Однако углеводороды не влияют на лгаксимальную скорость гидролиза, а лишь увеличивают константу Михаэлиса. Эти результаты, а также литературные данные позволяют сделать вывод о том, что углеводороды, являясь конкурентными ингибиторами протеолитических ферментов, существенно не изменяют их структуры [163, 164]. [c.32]

Данные ряда опытов по гидролизу бензоил-1-ар гининамида трипсином [12] свидетельствуют, что формально — эт( реакция первого порядка как по субстрату, так и по ферменту Такое определение порядка по субстрату основано на расчета к константы по кинетическим кривым, снятым в опытах, которьк проводили с одной и той же начальной концентрацией субстрата По этим соображениям априори никак нельзя считать, что первый порядок вытекает из более сложной кинетики, внешне упрощающейся благодаря компенсирующему действию различных факто ров. Прежде чем сделать окончательное заключение о порядке, необходимо провести проверку по начальной скорости реакции. [c.92]

Еще одним примером реакций, в которых свободная энергия играет более существенную роль, чем теплота активащ1и, являются реакции дезактивации и реактивации трипсина. Из опытных значений скорости при pH = 6,5 было найдено =40 [ ]. Но на основании измерений констант равновесия при pH = 2 — 3 значение АН для всей реакции оказалось равным 67,7 ккал[ ]. Если отбросить возможность возрастания АН на 27,7 ккал только благодаря изменению pH, эти результаты означают, что энергия активации эндотермической реакции меньше, чем теплота, поглощенная в процессе реакции. В этом случае энергия активации обратной реакции, т. е. реактивации, должна быть отрицательной. Однако оказывается, наоборот, обратная [c.425]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология