Масс-спектрометрический анализ аминокислот

Если N-концевой участок белка удастся выделить в виде короткого пептида, то содержание в нем ацетилированной аминокислоты может быть определено после гидролиза хроматографическим или электрофоретическим анализом [414]. Для установления природы блокирующего остатка и одновременно аминокислотной последовательности пептида наиболее надежен прямой масс-спектрометрический метод (на анализ требуется — 50 пмоль пептида) (гл. 19), [6]. [c.266]

Масс-спектрометрический анализ аминокислот [187 — 189] [c.64]

Л. К. Островской установлено, что питание растений солями, содержащими тяжелый азот в нитратной или аммиачной группах, и последующий масс-спектрометрический анализ-выделенных из растений соединений, содержащих азот, дают основание сказать, что участие меди в ассимиляции этих форм азота различно. При питании нитратами недостаток меди тормозит образование какого-то из ранних продуктов их восстановления и вначале не сказывается на обогащении азотом аминокислот, амидов, белков, пептонов и полипептидов. В дальнейшем же наблюдается сильное торможение обогащения всех фракций органического азота, причем оно особенно значительно в амидах. При питании аммиачным азотом недостаток меди задерживает включение тяжелого азота в белок, пептоны и пептиды уже в первые часы после внесения азотной подкормки. Это указывает на особо важную роль меди при применении аммиачного азота. [c.21]

Масс-спектрометрические исследования. 9. Метиловые и этиловые эфиры некоторых алифатических а-аминокислот. (Анализ Et-эфиров АК на капиллярных колонках.) [c.80]

Для быстрого испарения элюата Блэкли и др. [66] использовали кислородно-водородное пламя. Этими авторами установлено, что для анализа биологических препаратов требуется 1—10 нг вещества при условии записи полного масс-спектра и менее 1 нг при обнаружении элюата по заранее выбранным в масс-спектре ионам. Авторы использовали эту методику для масс-спектрометрического анализа аминокислот. Полученные спектры очень просты и содержат в основном пики, отвечающие протонированным молекулярным ионам МН+ (рис. 2.5). Исключение составляют лишь лизин и гистидин, в масс-спектрах которых интенсивность пиков МН+ составляет соответственно 60 и 80%. Ограниченная фрагментация молекул позволяет отличить глутаминовую кислоту от лизина, однако лейцин и изолей- [c.48]

До разработки метода перметилирования было показано, что пептиды, содержащие несколько трифункциональных аминокислот, могут быть подвергнуты масс-спектрометрическому анализу при условии, что дикарбоновые аминокислоты (Asp, Glu) этери-фицированы по их свободным карбоксильным группам, тирозин представлен в виде 0-метилового эфира, а лизин — е-ацилирован производные цистина и гистидина дают масс-спектры без модификации боковых цепей [25]. Только аргинин вызывает наибольшие затруднения. Шемякин и сотр. [26] показали, что арги-ниновые пептиды могут быть сконденсированы с Р-дикетонами (например, ацетилацетоном) с образованием пиримидиновых производных, которые дают хорошие масс-спектры (см. также Веттер-Дихтел и сотр. [27]). Шемякин и сотр. [26] далее показали, что обработка аргининовых пептидов гидразином приводит к образованию соответствующих орнитиновых производных. [c.217]

Перметилирование одного миллиграмма стендомициновой кислоты, соединения открытой формы , образующегося при мягком щелочном гидролизе пептидного антибиотика, дало вещество с достаточной летучестью для масс-спектрометрического анализа. Это можно считать удовлетворительным результатом, поскольку молекула содержит четыре оксиаминокислоты в дополнение к основной компоненте, предположительно существующей в форме четвертичного аммониевого производного. При масс-спектрометрическом анализе была определена последовательность первых десяти аминокислот [96]. [c.223]

При ионизации полевой десорбцией масс-спектры пептидов состоят практически из одних молекулярных ионов. На этой основе Я. Шимониши был разработан метод исследования структуры белка путем непосредственного анализа смеси пептидов, получаемых после ферментативного гидролиза. Смесь пептидов подвергается деградации по методу Эдмана, и после каждого этапа, наряду с идентификацией отщепленных аминокислот, масс-спектрометрически по молекулярным ионам определяются молекулярные массы [c.73]

Вследствие относительно высокой упругости паров соединений, содержащих фтор [50], газо-жидкостная хроматография применяется для разделения К-ТФА-эфиров ди-, три- и тетрапептидов, Газо-хроматографический анализ различных летучих производных коротких пептидов проводился рядом автором [51—56]. Бименом и Веттером, например, осуществлено хроматографическое разделение N-aцeтилиpoвaнныx аминоспиртов и полиаминов, полученных из лейцил-аланина, глицил-фенилаланина, фе-нилаланил-глицина, лейцил-аланил-пролина и лейцил-аланил-глицил-лейцина с последующим масс-спектрометрическим определением последовательности аминокислот в пептидных цепях [53]. Однако наибольшего успеха удалось достигнуть при применении, как и в случае разделения аминокислот, К-трифторацетилирован-ных метиловых эфиров (рис. 9). Указанный метод, по-видимому, имеет ограниченное применение при исследовании структуры пептидов [64] и степени рацемизации при их синтезе [55]. [c.267]