Определение витамина Е (токоферола) в крови

В практике биохимических и биомедицинских исследований последних лет капиллярная хроматография применялась для определения в плазме крови и других биологических средах витаминов, например а-токоферола [83], фармацевтических средств (кофеина, теобромина, барбитуратов) [84], психотропных средств [c.209]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНА Е (ТОКОФЕРОЛА) В КРОВИ [c.369]

До сих пор не известно, в каких именно реакциях принимают участие жирорастворимые витамины в организме. Они входят в состав ферментов, и, по-видимому, их действие связано с действием ферментов. Поскольку витамин А является сильно ненасыщенным соединением (в его молекуле содержится система сопряженных двойных связей), он легко дезактивируется под действием окислителей. Витамин О содержит три двойные связи и гидроксильную группу. Его биологическая активность не уменьшается с повышением температуры, как можно было бы ожидать на основании его строения. Витамины А и О с треххлористой сурьмой дают окрашенное в голубой цвет соединение. Эта реакция используется для аналитических целей. Витамин Е быстро превращается в неактивную форму в присутствии окислителей и на свету. В этих условиях разрушается кислородсодержащее кольцо токоферола. Витамин Е устойчив к нагреванию в отсутствие воздуха. При окислении витамина Е азотной кислотой образуются продукты, окрашенные в красный цвет (аналитический метод определения витамина Е). Витамин К, содержащий кольцо нафтохинона-1,4, принимает участие в реакциях окисления — восстановления. Он разрушается под действием кислот, спиртовых растворов щелочей и ультрафиолетовых лучей. При нагревании витамин К не изменяется. Витамин К не удается определить колориметрически. Определение этого витамина основано на изменении времени свертываемости крови цыплят в его присутствии. [c.308]

Штурм и др. [46] определяли наличие, а-, у- и б-токоферолов в арахисовом масле, элюируя пробы масла хлороформом на силикагеле G. Количественные определения они проводили, элюируя эти соединения после разделения с пластинки и обрабатывая элюаты реактивом Эммери—Энгеля. Эти операции следует выполнять при слабом искусственном свете. Лавледи [47] испытал семь различных элюирующих систем в сочетании с силикагелем G и нашел, что наилучшее разделение р- и -токо-феролов дает смесь циклогексан—н-гексан—изопропиловый эфир—аммиак (20 20 10 1). При опрыскивании реактивом,, представляющим собой смесь 1,6 г фосфомолибденовой кислоты и 0,092 г 2,7-дихлорфлуоресцеина в 60 мл этанола, к которой добавляют 7,6 мл аммиака и затем разбавляют до 100 мл деионизованной дистиллированной водой, можно выделить и обнаружить витамины при их содержании 0,08 мкг/мкл. Полученные пятна не обесцвечиваются несколько месяцев. Этим методом определяли содержание индивидуальных токоферолов в плазме крови и красных кровяных тельцах [48], С тем чтобы количественно оценить содержание витаминов, разделенные вещества элюируют с пластинки, получают их триметилсилильные производные и затем анализируют методом газовой хроматографии. Предел обнаружения при использовании водородного пламенного детектора составляет 0,03 мкг. Уиттл и Пеннок [49] разделяли а-, р-, у- и б-токоферолы методом двумерного хроматографирования на силикагеле G, элюируя пробу в одном направлении хлороформом, и в другом смесью петролейный эфир (40—60°С)—диизопропиловый эфир (5 1). Далее зоны элюировали с пластин и обрабатывали реактивом Эммери—Энгеля (Т-108). Выход составлял около 92%. Pao и др. [50] разделяли эти соединения на силикагеле посредством одномернога элюирования смесью петролейный эфир (60—80°С)—диэтиловый эфир—диизопропиловый эфир—ацетон—уксусная кислота (254 3 32 12 3), используя затем ту же методику количественного определения. В этом случае выход разделяемых продуктов составлял 97—98 %. С помощью этой же системы элюентов Стоу [51] разделял р- и -токоферолы. [c.411]

Для определения соединений группы витамина А в различных сортах маргарина используют хроматографию на лихросор-6е Si 60 в системе гептан — диизопропиловый эфир (19 1). Поскольку глицериды, токоферолы,. .чецнтины н другие полярные соединения сорбируются на колонке, в нее можно вводить неочищенные препараты, причем регенерировать колонку необходимо лишь после 20—50 анализов [534]. На этом же сорбенге проведено определение ретинола в сыворотке крови [535], а также разделение аналогов ретиноевой кислоты и их метаболитов в системах гексан — тетрагидрофуран — уксусная кислота (980 15 6) или гексан — метилбензоат — пропионовая кислота (1750 250 7) [536]. С помощью обращенно-фазовой хроматографии на лихросорбе (10 мкм) в 90%-ном водном метаноле проводят анализ молока и детских питательных смесей [537], а в системе метанол — вода (99 1) разделяют каротины. [c.263]

Оценка обеспеченности организма токоферолом. Основным мето дом является определение концентрации витамина Е в крови. Однако при гипер-р-липопротеинемиях, в том числе и возрастных, содержание токоферола в крови не отражает уровня обеспеченности им тканей организма (ЛПНП одна из транспортных форм витамина). [c.71]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология