Приготовление вектора

Приготовление вектора-затравки [c.59]

Величина поглощения поляризованного ультрафиолетового света циклическими пуриновыми и пиримидиновыми системами достигает максимального значения, когда электрический вектор находится в плоскости цикла, и минимальна, когда он перпендикулярен плоскости системы. Дихроизм, выражаемый как оптическое поглощение при электрическом векторе, параллельном плоскости структуры, минус оптическое поглощение при векторе, перпендикулярном к структуре, может, таким образом, в зависимости от отношения молекулярной структуры к поглощающей системе быть величиной как положительной, так и отрицательной (рис. 8-16). Отношение этих двух величин оптического поглощения обычно называют дихроическим отношением. Дезоксирибонуклеиновая кислота из зобной железы, ориентированная растяжением, характеризуется отрицательным ультрафиолетовым дихроизмом [129[, а для ориентированных пленок, приготовленных из вязкого геля [c.569]

Таблица 2.2. Приготовление плеч космидного вектора

Г. Приготовление плеч вектора [c.22]

Векторы, использующие репликаторы нитевидных фагов, применяют для получ Ения однонитевых фрагментов ДНК с целью их секвенирования или приготовления гибридизационных зондов. [c.238]

Другой способ приготовления вектора, несущего на своих З -концах выступающие дТМФ, заключался в его расщеплении уникальной рестрикционной эндонуклеазой X ml, два сайта узнавания которой на- [c.229]

Обработка фрагмента ДНК ультразвуком с целью его фрагментации, применяемая, пожалуй, чаще других воздействий, лишь незначительно зависит от особенностей его нуклеотидной последовательности, хотя и считается, что АТ-богатые участки ДНК расщепляются немного чаще, чем ОС-богатые. Размер получаемых под действием ультразвуковой обработки фрагментов ДНК зависит от продолжительности озвучивания, его амплитуды. Полученные таким образом фрагменты ДНК также нуждаются в репарации своих концов, протекающей достаточно эффективно, с целью их затупления и пригодности для клонирования в специально приготовленном векторе (рис. 8.6). Эффективное секвенирование субклонированных фрагментов предполагает предварительное обогащение пула озвученных молекул ДНК путем ультрацентрифугирования или гель-электрофореза. [c.243]

Ранее был предложен имеющий много общего с описанными выше методами подход к получению делеционных субклонов в одноцепочечном векторе, основанный на построении с помощью Кленовского фрагмента ДНК-полимеразы I комплементарной цепи участков вставки, имеющих разную протяженность [Burton et al., 1988]. В цитируемой работе осуществлялся отжиг олигонуклеотидного праймера, в результате ферментативного удлинения которого происходило увеличение двуцепочечного участка вставки, причем производимый по времени отбор аликвот данной реакции обеспечивал получение их разной протяженности (рис. 8.14). Далее остающийся недостроенным одноцепочечный участок вставки и самого вектора удалялся нуклеазой S1. Затем с помощью подходящей рестрикционной эндонуклеазы, сайт которой находился в полилинкере поблизости от места клонирования вставки, вырезались делетированные варианты вставки. Их дальнейшее лигирование с заранее приготовленным вектором проводилось с таким расчетом, что происходила реориентация вставки, позволяющая секвенировать фрагменты ДНК со стороны делеций, давая, таким образом, возможность получить перекрывающиеся участки секвенируемой последовательности ДНК. [c.263]

Отметим, что близкие результаты, указывающие на значительные упругие деформации в приграничных областях, были получены недавно в работе [119], где наблюдали и измеряли методом просвечивающей электронной микроскопии кривизну кристаллической рещетки вблизи границ зерен, а также переменную разори-ентацию вдоль индивидуальных границ в N1, подвергнутом ИПД. В этой работе, используя изгибные контуры экстинкции, исследовали структурную кривизну рещетки, которая является кривизной кристаллографических плоскостей, параллельных волновому вектору, в отличие от обычной изгибной кривизны, относящейся к плоскостям, перпендикулярным волновому вектору. Вследствие этого структурная кривизна отражает реальную структуру объемных образцов, поскольку плоскости, параллельные волновому вектору, практически не меняют свою кривизну при возможном изгибе фольги при ее приготовлении. [c.65]

При облучении свежеприготовленного азида серебра ультрафиолетовым светом с длиной волны 2537 А он окрашивается в фиолетовый цвет [59, 65], который обусловлен присутствием небольших, размером примерно 10—20 А, вкраплений серебра на поверхности кристаллов [66]. Аналогичная окраска наблюдается у азида серебра после распада радиоактивного изотопа Ag, введенного в препарат во время его приготовления [67]. Если кристаллы, находящиеся в таком состоянии, подвергнуть отжигу нри температуре между 115и150°в течение 1 час или же облучить видимым светом, обогащенным инфракрасным излучением, то интенсивность имевшейся полосы поглощения снижается, а вместо нее появляется новая широкая полоса около 4800 А. Этот последний пик был идентифицирован Маклареном [59]. Он обусловлен вкраплениями коллоидного серебра размером около 100 А. Исследуя спектр в поляризованном свете, Макларен показал, что когда свет с электрическим вектором, параллельным [001], пропускается по направлению [010], то появляется ник при 4750 А. Если же электрический вектор параллелен направлению [100], то пик смещается к 4900 А. Эти результаты полностью согласуются с предсказаниями теории Ми. [c.179]

Кристаллы LigSijOg легко раскалываются по плоскостям совершенной спайности (010), и образцы, приготовленные седиментацией взвеси на пластинку КВг, отчетливо текстуриро-вапы полосы колебаний с электрическим вектором Е, нормальным плоскости (010), отсутствуют или ослаблены в спектре поглощения, но заметно усиливаются при наклоне плоскости подложки к оси пучка (рис. 2). Полный перечень частот максимумов поглощения в спектрах поликристаллических образцов дан в табл. 1. [c.116]

Приготовление растворов и измерение обычных полярограмм осуществлялось так же, как в предыдущей работе [4]. Переменнотоковые ноляро-граммы регистрировались вектор-нолярографом ЦЛА при амплитуде переменного напряжения 8 мв. Температура всей ячейки устанавливалась на заданном уровне воздушным термостатом. [c.90]

Таким образом, при определенных условиях спектры НПВО можно обрабатывать тем же путем, что и спектры поглощения. Однако существенной особенностью метода НПВО является возможность исследования структурного строения образца без необходимости приготовления ряда срезов. Это вызвано тем, что электрический вектор параллельной компоненты падающего света взаимодействует с молекулами, электрические диполи которых лелчат в плоскости падения впе зависимости от их ориептации в этой плоскости. [c.324]

Выбор ферментов, используемых для двойного расщепления космидного вектора при приготовлении плеч по методу Иш-Горовица и Берка [10], определяется характеристиками данной космиды. На рис. 2.1 приведена схема общего метода для любого космидного вектора. Методика, детально описанная в табл. 2.2, касается семейства космид Лориста [7, 8], где фермент X — это Sstl, фермент Y — BsffiH, а сайт клонирования Я1Пс1П1. [c.47]

Недавно сконструированы векторы, содержащие промоторы SP6, Т7 или ТЗ, непосредственно примыкающие к сайтам для клонирования ([8] и неопубликованные результаты). Это позволяет быстро и легко приготовить меченные згр РНК-зонды, специфичные в отношении концов клонированной ДНК и поэтому очень подходящие для использования в качестве зонде в для идентификации новых космид, вставки в которых перекрываются со вставкой в исходной космиде. Этот процесс выделения перекрывающихся клонов известен как прогулка по геному, причем использование промоторных систем SP6/T7/T3 может существенно уменьшить время и труд, затраченный на проведение такой прогулки , поскольку при этом отпадает необходимость в идентификации концов клонированных фрагментов с помощью рестрикционного картирования и физического выделения этих фрагментов для приготовления новых зондов. [c.65]

Лимфоциты больной заранее были отделены от остальных элементов крови, Т-лимфоциты стимулированы к росту. Затем в условиях in vitro в них был введён ген ADA с помошью ретровирусного вектора. Приготовленные таким образом генно-инженерные лимфоциты были возвращены в кровоток. [c.294]

Нацеливать аденовирус на определенные клетки, имеющие специфичные поверхностные антигены, наиболее просто удается с помощью конъюгатов (рис. 14.23). Данный подход реализован на различных раковых опухолях, для которых показана селективная трансдукция аденовирусными векторами встроенных в них трансгенов. Несмотря на очевидные достоинства, стратегия использования адаптерно-лиганд-ньк юмплексов имеет серьезный недостаток — многоступенчатость процедуры приготовления in vitro нацеленного гибридного аденовируса. [c.383]

Визуальное наблюдение окрашенных облучением в дымчатый цвет / -кристаллов синтетического кварца указывало на то, что форма сечения плоскостью (0001) поверхности коэффициента ноглощения в максимуме дымчатой окраски отличается от круговой, присущей нормально дихроичным кристаллам. Для проверки этого предположения и получения количественной информации было выполнено измерение спектров поглощения на различно ориентированных пластинах, приготовленных из пирамиды <г> кристалла кварца с заведомо аномальпо-плеохроичной окраской. Всего было приготовлено шесть пластин, ориентированных параллельно оптической оси и трем кристаллофизическим осям х и у кристалла кварца. Все эти пластины были подвергнуты одновременно "У" облучению дозой 1-10 рентген, после чего были измерены их спектры поглощения в поляризованном свете. Спектры поглощения необыкновенной волны (т. е. волны с колебаниями электрического вектора вдоль оси Lз кварца) для всех образцов, естественно (поскольку это одно и то же направление), оказались примерно одинаковыми. В то же время спектры обыкновенной волны у разных пластин достаточно резко различаются между собой как по виду, так и по интенсивности. На рис. 2 приведено построенное по кривым поглощения для обыкновенной волны сечение плоскостью (0001) поверхности коэффициентов поглощения В при длине волны X = 4800 А. Такая длина волны выбрана потому, что на трех из шести кривых в этом месте наблюдается характерный максимум. Из рисунка видно отклонение формы [c.209]

Смотреть страницы где упоминается термин Приготовление вектора: [c.47] [c.48] [c.117] [c.63] [c.160] [c.160] [c.775] [c.64] [c.334] [c.336] [c.157] [c.179] [c.156] [c.157] [c.179] [c.214] [c.59] [c.277] [c.280] [c.418] [c.334] [c.336] [c.105] [c.287]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология