Процедура заливки

Рис. 12.3. Процедура заливки чашек.

Гели с градиентом денатурирующих веществ, перпендикулярным направлению электрофореза, используются для определения характера плавления фрагментов ДНК с неизученными свойствами. Такие гели дают информацию, необходимую при расчете оптимальных градиентов и времени электрофореза для стандартных параллельно-градиентных гелей. В разделе описывается процедура заливки таких гелей. Дополнительные сведения по этому вопросу имеются в работе [20]. [c.156]

Стандартная процедура подготовки дьюара к заливке жидким гелием заключается в его предварительном охлаждении с помощью жидкого азота, который сравнительно недорог, имеет высокую теплоемкость и прост в обращении. Однако использование еще одного хладагента связано с дополнительными хлопотами, особенно при работе в полевых условиях. Есть и еще один недостаток - перед началом заливки необходимо полностью удалить азот из дьюара. Это очень важно, поскольку жидкий (или твердый) азот плохо проводит тепло (коэффициент теплопроводности 10 " Вт/(см-К) и обладает больщой теплоемкостью при температурах между 77 и 4,2 К, так что для охлаждения одного литра азота до 4,2 К могут потребоваться десятки литров жидкого гелия. Заливать жидкий гелий без предварительного охлаждения жидким азотом имеет смысл, когда есть возможность эффективно охладить испаряющимся гелием внутренность дьюара, т.е. гелиевый резервуар и тепловые экраны. При такой процедуре заливки, часто занимающей много времени (2-10 ч), необходима хорощо теплоизолированная переливная трубка. Нащ опыт показывает, что при охлаждении гелиевого резервуара до 4,2 К, а тепловых экранов до 80 К расходуется примерно по 2 л в 1 ч, после чего заливка жидкости происходит со скоростью 50 л в 1 ч. Сразу после заливки скорость испарения примерно втрое выше, чем в равновесном состоянии, т.е. через 12 24 ч. [c.178]

Альтернативная процедура включает заливку высушенного образца смолой или воском и нарезку из него тонких срезов для аналитических исследований. Для консультаций относительно последних достижений этого метода может быть рекомендован обзор [446]. [c.300]

Срезы можно получать в криостате или на замораживающем микротоме. В этом случае исключаются процедуры с заливкой в парафин и приготовлением парафиновых блоков. [c.128]

По третьему варианту в СОЖ вводят увеличенное количество дезинфектанта, например бактерицида. СОЖ с добавками циркулирует в системе длительное время (6—8 ч), затем ее сливают, систему очищают (в случае необходимости) и промывают чистой водой. Недостаток способа — возможность инфицирования системы микроорганизмами, присутствующими в технической воде. Этот вариант применим для подготовки оборудования перед заливкой биостойких СОЖ или в качестве предварительной процедуры перед последующей дезинфекцией системы. [c.206]

Существует серьезная опасность того, что процедуры фиксации или заключения могут повредить структуру клеток или клеточных макромолекул. Вот почему предложен другой метод приготовления срезов, уменьшающий эту опасность, - быстрое замораживание. Здесь можно обойтись без фиксации и заливки. Замороженную ткань просто режут на криостате - специальном микротоме, установленном в холодной камере. Полученные таким образом срезы позволяют избежать некоторых артефактов, и в то же время обладают определенными недостатками отдельные структуры индивидуальных макромолекул, таких, например, как белки, при замораживании сохраняются хорошо, но структура самой клетки может оказаться поврежденной. Следующий этап после приготовления срезов (любым из методов) - их окраска. [c.176]

Смолы могут удалять и перераспределять элементы, и нет сомнения в том, что процедура заливки может внести элементы в анализируемые материалы. Некоторые из эпоксидных смол могут содержать относительно большое количество серы, в то время как смолы на основе эпихлоргидрина содержат малое количество хлора. Низкий уровень хлора (0,73%) в смоле Спурра с низкой вязкостью все еще слишком велик, когда должны проводиться критические исследования хлора. Желательно проводить элементный анализ всех заливочных химикатов перед их употреблением для препарирования образца. Ме-такрилатные смолы теоретически свободны от минеральных элементов, но вызывают сильную усадку при полимеризации и нестабильны под электронным пучком. [c.284]

Для повышения надежности работы насосов на насосных станциях и облегчения автоматизации центробежные насосы, как правило, а осевые насосы обязательно, следует устанавливать с подпором при наиниз-шем уровне воды в источнике или в приемном резервуаре. Процедура заливки в этом случае максимально упрощается. Перед пуском насоса достаточно открыть задвижку на всасывающей линии насоса и кран для выпуска воздуха, установленный в верхней точке корпуса насоса. [c.135]

Процедура заливки расплавленного питательного агара ( заливка чашки ) представлена на рис. 12.3. Подразумевается, что агар был приготовлен в небольших флаконах (флаконы Маккартни). [c.47]

Окрашенный кусочек ткани исследуют и фотографируют. Клетки, содержащие железо и оксиды железа, выглядят голубыми, а другие ткани остаются неокрашенными. Затем можно обезводить ткань проводкой через спиртовые растворы, просветлить в ксилоле и заключить в заливочную среду для изготовления срезов. Процедура заливки-обычная она детально описана во многих методических руководствах (например, Humason, 1967). [c.248]

Так как образец в конечном итоге исследуется в микроскопе в вакууме, вода либо должна быть удалена, либо давление ее паров должно быть уменьшено понижением температуры образца. Нет сомнения в том, что химическое обезвоживание приводит к потере легко диффундирующих веществ из клеток и тканей, вызванной химической фиксацией. Хотя критические сравнительные исследования не производились, оказалось, что не существует большой разницы в воздействии этанола, метанола или ацетона в качестве обезвоживающих реактивов. Однако в работе [421] было установлено, что в растительном материале, обезвоженном диметоксипропаном, обнаружена существенно лучшая сохранность ионов (Ыа+, К+, С1 ) по сравнению с обезвоживанием в ацетоне. Можно обойтись без классических процедур обезвоживания, используя инертные процедуры обезвоживания, предложенные в [422], водно-растворимые смолы, метод заливки в глутаральдегиде-мочевине [423] или пропускание материала, прошедшего фиксацию в глутаральдегиде, через глутаральдегид с возрастающимп концентрациями вплоть до 50%, после чего ткань переносится прямо в эпон-812 [404]. Другая процедура [424] заключается в инфильтрации фиксированных образцов раствором поливинилового спирта (МШ 14 000) с возрастающими концентрациями вплоть до конечной 20%-ной концентрации. Вода затем удаляется путем диализа, а образовавшийся твердый гель связан поперечными связями с глутаральдегидом. Однако оказывается, что эти процедуры незначительно снижают потерю растворимых материалов из исследуемых образцов. Простая сушка образца на воздухе также вызывает перераспределение элементов. Таким же образом процедура сушки в критической точке, которая обычно проводится в конце фиксации и обезвоживания, по всей видимости, приведет к слабому различию в концентрации растворимых веществ, которые давно уже были удалены в процессе [c.283]

Парафин (Paraffinum soli dum) — смесь твердых нефтяных углеводородов, получаемых при дистилляции парафинистой нефти после отгонки смазочных масел. Очищенные парафины представляют белую массу без запаха и вкуса. Сорта парафина отличаются по температуре плавления сорт А плавится при 54°, сорт Б — при 52°, сорт В — при 50 . Парафин применяется в гистологии для заливки кусочков тканей и органов при изготовлении срезов на микротоме. Для этой цели лучше брать так называемый гомогенизированный парафин, потерявший свою кристаллическую структуру под действием высокой температуры, или смесь парафина и церезина с соответствующей температурой плавления. Из смеси парафина и вазелинового масла готовят искусственный вазелин. Наконец, парафин, как средство обладающее большой теплоемкостью, применяют для тепловых процедур при лечении невритов, артритов и других болезней. Парафин применяют для изготовления свечей. В смеси со скипидаром из него получают крем для чистки обуви и мастику для натирки полов. [c.54]

Исследователю, изучающему связанные с тканью минералы биогенного происхождения in situ с помощью просвечивающего электронного микроскопа, приходится иметь дело с инструкциями, в которых подробно описаны способы подготовки тканей. В задачи этой главы не входит даже беглое обсуждение огромного числа способов обработки, фиксации, заливки, резки, окрапгавания и перенесения срезов на сетки. Читателю, интересующемуся данными вопросами, целесообразно изучить последние руководства, описывающие эти разнообразные процедуры, и посоветоваться с работающими в данной области специалистами. [c.233]

Изоэлектрофокусирование и НЭГрН как первый этап разделения, Обе процедуры проводятся в стандартном приборе для электрофореза в столбиках геля, залитого в трубки длиной 12 см и внутренним диаметром 3 мм (наружный диаметр 6 мм), Перед заливкой геля нижнее отверстие чистых и сухих трубок закрывают небольшим квадратным отрезком увлажненной диализной мембраны, которую закрепляют кольцом из тонкостенной силиконовой трубки, а затем сверху покрывают слоем пара фильма. Трубки закрепляют вертикально и заполняют гелем, не доходя 1—1,5 см до верхнего края (в зависимости от объема образца). Состав геля в расчете на 10 мл для заполнения 10 трубок приведен ниже [c.77]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология