Метод молекулярных отпечатков

Тотальную ДНК из клеток человека гидролизуют эндонуклеазой примерно на 500000 фрагментов длиной от 10 до 10 нуклеотидных пар. Затем фрагменты разделяют по молекулярной массе с помощью гель-электрофореза в агарозе, после чего ДНК денатурируют щелочью прямо в геле, чтобы получить одноцепочечные фрагменты. Их переносят на нитроцеллюлозный фильтр и фиксируют высушиванием при 80°С. В результате получается отпечаток (реплика) картины разделения фрагментов ДНК по их размеру. Эти фрагменты можно идентифицировать методом гибридизации с радиоактивными ДНК-зондами, специфичными для определенных генов или хромосом. Любой фрагмент, содержащий всю последовательность зондируемого гена или его часть, будет выглядеть на радиоавтографе в виде темной полосы (рис. 4.60). [c.126]

В изучении НК применяются различные методы молекулярной биохимии и биофизики, электронной микроскопии, изотопного анализа, цитохимии, иммунохимии. Все это накладывает определенный отпечаток на характер организации лабораторных исследований в области НК. Поэтому лаборатория, которая ставит перед собой цель решить ту или иную задачу в области НК, должна иметь специалистов разных отраслей науки. Так, для решения задач биологического характера, например для исследования НК в связи с проблемами устойчивости растений к неблагоприятным факторам питания, эмбриогенеза и т. д., необходимы биохимик, цитохимик и биофизик (или только два первых). [c.22]

Перейдем тенерь к работе Г. Вейля, в которой, как мы уже подчеркивали, предлагается несколько иная иерархия приближенных методов. Если Фок уделяет основное внимание одноэлектронному приближению, т. е. методу молекулярных орбиталей, то Г. Вейль обращается к методу валентных схем. Это накладывает отпечаток на выбор следующего этажа иерархии. Так же, как и В. А. Фок, Г. Вейль заканчивает свою иерархию анализом классической теории. Однако, если Фок за одноэлект-репным приближением помещает классическую механику, то Вейль вслед за приближенным методом валентных схем ставит классическую химическую теорию. Эта теория, по его мнению, тоже является пусть весьма грубым, но все же приближением к квантовой механике. Она повторяет некоторые черты метода валентных схем, который в свою очередь является приближением к строгой квантовой механике. [c.41]

Диалкилсульфиды (тиаалканы) составляют главную массу тиоэфиров Кх—3—Ка в большей части исследованных нефтей. Подобно тиолам и дисульфидам, тиаалканы обнаруживаются главным образом в бензино-кер осиновых фракциях с ростом температуры кипения доля этих СС снижается почти до полного исчезновения в дистиллятах, кипящих выше 300°С (см. рис. 2.4). Возможно, что эти представления о распределении алифатических сульфидов в нефтях неточно отражают реальные факты и несут на себе отпечаток существенного спада эффективности используемых методов выделения веществ с ростом молекулярной массы, что уже отмечалось при обсуждении состава нефтяных тиолов. [c.56]

Другим большим разделом химии углеводов является химия полисахаридов. Полисахариды представляют собой полимеры моносахаридов, точнее продукты их поликонденсации, и их молекулы образуют цепи, состоящие из моносахаридных звеньев, связанных друг с другом через атом кислорода. Полисахариды — типичные высокомолекулярные вещества, и этот раздел химии углеводов по принципиальным и методическим подходам сходен с другими разделами химии полимеров. В частности, уже само понятие индивидуального вещества в данном случае теряет смысл и часто заменяется понятием фракции, содержащей идентичное по строению, но различающееся по молекулярному весу семейство полимергомо-логов. Это накладывает свой отпечаток на методы выделения и разделения полисахаридов. Далее, понятие структуры полисахарида и методы ее установления также сходны с соответствующими понятиями и методами высокомолекулярной химии. [c.9]

В заключение необходимо подчеркнуть следующее важное обстоятельство. Оценка относительной активности свободных радикалов в реакциях отрыва и присоединения часто основывается на результатах измерения количества продуктов, образующихся при соответствующих реакциях. Применительно к полимеризации информация такого рода далеко не всегда достаточна, так как незначительные с точки зрения обычной органической хим и реакции, скорость которых измеряется десятыми или сотыми долями процента от скорости основного процесса, способны наложить весьма существенный отпечаток на полимеризацию. Так, когда растущая цепь, представляющая собой макрорадикал, утрачивает свою активность в результате пусть очень редко осуществляю-ще 1ся реакции отрыва малонодвижного Н-атома, то это ограничивает величину образовавше1 ся макромолекулы. Как мы увидим дальше, длина полимерной цепи, точнее число входящих в нее звеньев мономера, может при определенных условиях служить мерой отношения скоростей реакций присоединения макрорадикалов к мономеру и отрыва ими Н-атомов от мономера. Измерение молекулярного веса полимера позволяет установить это отношение с достаточной точностью, несмотря на то что константы скоростей соответствующих реакций различаются на несколько порядков. Ясно, что обычные химические методы недостаточно чувствительны для обнаружения реакций, протекающих в столь малой степени. [c.192]

Молекулы ПАВ имеют тенденцию к ассоциации как в полярных, так и в неполярных растворителях. Это накладывает отпечаток на определение их молекулярной массы, поскольку для нахождения истинного значения искомой величины необходимо иметь показания измерений при различных концентррапи-ях с четкой их интерпретацией и учетом возможности молекулярной и коллоидной ассоциаций, а также диссоциации в растворах. Наиболее подходящими для молекул ПАВ являются методы, основанные на изучении коллегативных свойств веществ— свойств, не зависящих от структуры молекулы, а являющихся функцией только числа частиц. Такие свойства определяются кинетической энергией молекул. Это осмотическое [c.80]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология