Методы разделения смеси полисахаридов

При гидролизе растительной ткани концентрированной кислотой с последующим разбавлением водой и инверсией образовавшихся декстринов все полисахариды, без разделения на легко- и трудногидролизуемые, превращаются в моносахариды, смесь которых затем подвергается количественному анализу. Этим методом определяют в растительной ткани содержание маннана, ксилана, арабана и других углеводов, входящих в состав различных сложных полисахаридов гемицеллюлоз, строение которых было подробно рассмотрено выше. [c.300]

Метод разделения на активированном угле, покрытом декст-раном. Активированный уголь обладает широко используемым на практике свойством адсорбировать небольшие молекулы. Адсорбируются также белки и комплекс Ат — Аг, хотя медленнее и в меньшей степени. Однако если уголь покрыть сшитым полисахаридом декстраном (этот материал является молекулярным ситом, в которое не могут проникать большие молекулы, гл. 8), то ни Ат, ни Ат — Аг не будут адсорбироваться. Следовательно, если к смеси, содержащей свободный Аг и Ат—Аг, прибавить уголь, покрытый декстраном, и смесь немедленно центрифугировать, то радиоактивность, не связанная с Ат (т. е. Аг ), оказывается в гранулах угля, а радиоактивность, отвечающая Ат —Аг, остается в супернатанте. Схема действия этого быстрого и удобного метода изображена на рис. 10-8, А. [c.259]

Рассмотрим применение этого метода при разделении смеси полисахаридов. Например, необходимо было разделить смесь полисахаридов, которая состояла из галактоглюкоманнана (65%), содержащего ацетильные группы, ксилана и других полисахаридов [32]. [c.47]

В последние годы для разделения белков с различными молекулярными весами широко применяется метод хроматографии на сефадексе (гельфильтрация). Сефадекс представляет собой мелкозернистый порошок, изготовленный из полисахарида декстрана, углеводные цепочки которого дополнительно соединены мостиками глицерина. В результате каждое зерно сефадекса представляет собой клубок из полисахаридных цепей, внутрь которого могут проходить вещества с определенным для каждого типа сефадекса молекулярным весом. При фильтровании раствора, содержащего смесь бел- [c.55]

Распределение белка и полисахарида или липополисахарида между фенолом и водой было применено для расщепления и разделения специфических осадков полисахаридных антигенов с антителами [40]. В принципе осадок диспергируют в воде и прибавляют при перемешивании равный объем жидкого фенола. После разделения фаз центрифугированием водный слой содержит свободный от антител полисахаридный антиген, который можно выделить и проанализировать. Метод позволяет очищать полисахаридные анти1 ены путем избирательного осаждения антителами [32, 40], т. е. фракционировать полисахаридные антигены по их серологической специфичности. Хоман и Лене 41] очистили препараты гепарина, содержащие белки, использовав смесь фенола с водой. Из водной фазы, которая оказалась свободной от белка, был выделен очищенный гепарин. [c.330]

Успех определения строения полиоз во многом зависит от тщательности очистки исходных веществ. В природных веществах растительного происхождения обычно содержится смесь нескольких полиоз с целлюлозой и другими соединениями. Очистка полиоз заключается в отделении примесей и разделении смеси полиоз. Удаление примесей производится многократным переосаждением или химическими методами. Однако физические методы очистки не дают возможности полностью удалить примеси, а число химических методов ограничено кроме того, применение этих методов связано с возможностью разрущения полисахаридов. Поэтому на практике приходится иметь дело с более или менее загрязненными продуктами. Разделение полиоз осложняется и тем обстоятельством, что для полиоз, как и для всех высокомолекулярных соединений, отсутствуют надежные критерии для оценки степени чистоты препаратов. [c.512]

Фракции крахмала и их строение. Крахмал не является однородным веществом он представляет смесь полисахаридов, построенных по двум различным типам, поэтому крахмал можно разделить на две основные фракции амилозу и амнлопектин. Для разделения фракций крахмала существует много различных методов. Один из простейших методов заключается в том, что крахмальные зерна обрабатывают горячей во,дой (около 80° С). При этом амилоза переходит в раствор, тогда как амнлопектин лишь разбухает и остается в зернах. В последние годы разработаны методы получения кристаллической амилозы. [c.253]

После экстракции пробы кислотой фильтрат нейтрализовали NaH Os, раствор центрифугировали со скоростью 2000 об/мин в течение 30 мин и фильтровали через бактерицидную фильтрующую прокладку для удаления суспендированных частиц. Фильтрат подвергли диализу в системе раствор —вода и не прошедшие сквозь полупроницаемую мембрану соединения высушивали вымораживанием, в результате чего получали смесь полисахаридов. Смесь растворяли в воде и разделяли дистиллированной водой на колонке диаметром 5,5 см и длиной 100 см, заполненной сефадексом G-100. Большинство полисахаридов элюировалось из колонки в объеме 400—1400 мл элюата, в то время как окрашенные соединения с меньшими молекулярными массами элюировались позже, в объеме 1400—2300 мл. Дальнейшее разделение и идентификацию проводили методами ионообменной и бумажной хроматографии. [c.286]

Разделение кислых и нейтральных полисахаридов в виде их ацетатов осуществляется ниже изложенным методом [6]. Смешивают 5 г гемицеллюлоз, высушенных иад силикагелем в вакууме при комнатной температуре, с 1 г безводного хлористого цинка. К смеси добавляют 100 мл уксусного ангидрида и смесь нагревают 4 ч при 80° С. Образовавшийся гомогенный раствор концентрируют до 50 мл и выливают в I л ледяной воды. Желатинообразный осадок промывают декантацией водой и растворяют в 200 мл хлороформа. Раствор высушивают безводным сернокислым натрием, фильтруют через активированный уголь, обрабатывают 1 л холодного раствора углекислого натрия в течение 3 мин и выливают в делительную воронку. Однородный хлороформенный раствор отделяют и дважды обрабатывают раствором углекислого натрия, после чего высушивают сернокислым натрием и выливают в петролейиый эфир (I л). Образующийся осадок отделяют центрифугированием, промывают эфиром и высушивают на воздухе. Полученный продукт представляет триацетат гексозанов. Верхний слой в делительной воронке, устойчивую эмульсию промывают встряхиванием с хлороформом, подкисляют и встряхивают с 500 мл хлороформа до образования однородного хлороформного слоя. Последний отделяют, промывают водой, высушивают сернокислым натрием, концентрируют до 100 мл и выливают в 500 мл петролей-ного эфира. Образовавшийся при этом осадок отделяют, промывают и высушивают. Полученный продукт является диацетатом глюкуроноксилана. [c.38]

Орсин-сернокислотный метод был использован Кеслером [45] в хроматографии свободных углеводов на анионообменных смолах в боратной форме. Он использовался также для регистрации разделения продуктов гидролиза древесины и древесной пульпы на анионообменной смоле в сульфатной форме с применением в качестве подвижной фазы 92%-ного водного этанола [57]. Кроме того, орсин-сернокислотный реагент может быть полезен в автоматических анализах элюатов в гель-проникающей хроматографии полисахаридов [58]. Схематическое изображение этой системы с использованием ТесЬп1соп Аи1оапа1угег дано на рис. 22.4. Элюат после колонки вначале смешивают с 1%-ным водным орсином, а затем с 72%-ной серной кислотой. Реакционную смесь затем нагревают до 95 °С, охлаждают и измеряют поглощение образовавшихся продуктов при 420 нм [58]. Для этой цели используют двойной стеклянный змеевик длиной 24 м [c.72]

Такая система позволяет получить более четкое разделение. При нанесении образца (в объеме 40 л) элюат, не содержащий аминокислот, сливают в трап. После впитывания всех 40 л отсоединяют первую колонку и оставшиеся три промывают 0,15 н. водным раствором аммиака со скоростью 20 мл/мин, собирая элюат по фракциям объемом 250 мл. Анализ ведут методом бумажной хроматографии. Первую колонку, содержащую основные аминокислоты, соединяют с двумя небольшими колонками (2,5x20 см и 1,7x13,6 см), также заполненными полистиролом. Вытеснение ведут 0,075 н. раствором едкого натрия со скоростью подачи 6 мл/мин (объем фракций равен 250 мл). Профиль элюирования строят по данным хроматографии на бумаге. Объединяют фракции, характеризующиеся наиболее простым составом и максимальным содержанием аминокислот. Эти уже обогащенные смеси вновь фракционируют на сульфокатионите (Zeo-Karb-215) в различных условиях или на дауэксе-2 до получения чистых аминокислот. Не представляющие интереса промежуточные фракции отбрасывают. Условия рехроматографии выбирают с учетом состава смеси. Выход аминокислот составляет около 50% от веса исходного белка. В качестве источника аминокислот используют белковые гидролизаты например, яичного альбумина) или гидролизаты микроорганизмов (например, дрожжей) и даже биологические экстракты [90]. Важно лишь, чтобы смесь не содержала большого количества полисахаридов. [c.356]

Фракции крахмала и их строение. Крахмал не является однородным веществом он представляет собой смесь гигантских молекул общей формулы (СбН о05)п. содержащих сильно колеблющееся число остатков глюкозы. Полисахариды, составляющие крахмал, построены по двум различным типам, и поэтому крахмал можно разде-Л ить на две основные фракции (части) 1) амилозу и 2) амилопектин. Для разделения этих фракций крахмала существует много различных методов. Один из простейших методов заключается в том, что крахмальные зерна повторно извлекают теплой водой (температуры 80°). При этом растворимая в воде амилоза переходит в раствор, тогда как амилопектин лишь разбухает и остается в зернах. Водный раствор амилозы можно сгустить в вакууме и осадить спиртом. В последние годы разработаны методы получения кристаллической амилозы. Соотношение между количествами амилозы и амилопектина колеблется в крахмалах разных растений и, по-видимому, зависит от ряда причин. В большинстве случаев содержание амилозы составляет 10—20%, а амилопекти-па — 80—90%. [c.229]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология