Аминокислоты, газовая хроматография основных

Количественный анализ аминокислот методом ГХ представляет несомненный интерес. Как правило, количественное определение аминокислотного состава пептида является одним из решающих моментов анализа последовательности. Поскольку при деградации крупного белка образуется большое число фрагментов, желательно затрачивать на анализ каждого из них минимальное количество времени и вещества. Привлечение в данном случае ГХ достаточно хорошо удовлетворяет этим условиям. Многочисленные исследования по ГХ аминокислот в конечном итоге направлены на решение этой задачи. Однако к действительно эффективному количественному методу предъявляются несоизмеримо более высокие требования, чем к качественному. Если учесть к тому же трудности получения и разделения производных аминокислот, станет ясно, почему до сих пор не разработан стандартный метод их количественного определения с помощью газового хроматографа. Основные трудности связаны, как подчеркивалось в разделе о получении производных, с полифункциональными аминокислотами. Метод, игнорирующий их идентификацию, может найти лишь ограниченное применение. Количественный анализ только простых аминокислот не может удовлетворять экспериментатора [40]. Вопрос о том, все ли аминокислоты, встречающиеся в белках, можно определять ГХ с достаточной точностью, все еще остается открытым. Здссь можно только вкратце рассмотреть имеющиеся условия и возможности. Проблемы, связанные с аппаратурой, необходимой для количественной ГХ, уже обсуждались ранее (см. стр. 302). [c.335]

Активированный уголь играет основную роль в газовой хроматографии, а именно при разделении газообразных углеводородов, а также в фронтальной методике (см. стр. 221) и при отделении ароматических аминокислот от жирных. При хроматографировании антибиотиков активированный уголь служит для первичной обработки ферментационной жидкости, из которой он извлекает активные вещества. Нередко раствор смеси соединений, полученной в результате химической реакции или из природных материалов, перед хроматографированием обрабатывают углем для удаления некоторых примесей, которые затруднили бы разделение или наблюдение за разделением. [c.196]

Так как аминокислоты являются нелетучими или мало летучими веществами, перед газохроматографическим разделением их необходимо сначала перевести в производные, в которых карбоксильная группа, аминогруппа или одновременно обе эти группы удалены или защищены другими группами, вследствие чего получаются летучие производные, пригодные для газохроматографического разделения. Этот метод получил достаточно широкое распространение в целом ряде аналогичных случаев и назван методом реакционной газовой хроматографии. Основные его особенности изложены в монографии Березкина [5]. [c.7]

Гидролиз белков ферментами пищеварительного тракта применяет-1СЯ главным образом для Проведения неполного ступенчатого расщепления. Полученный тем или иным способом гидролизат содержит смесь аминокислот и аммиак, образовавшийся в -результате расщепления аспарагина и глутамина и частичного дезаминирования пептидов и аминокислот. После предварительного удаления основной массы кислоты или щелочи гидролизат подвергают фракционному разделению на аминокислоты. В течение первых двух десятилетий текущего столетия аминокислоты разделяли в виде их эфиров, которые подвергали перегонке в вакууме (метод Э. Фишера). Позднее этот метод потерял свое значение из-за сложности выполнения и необходимости применения большого количества белка. В настоящее время благодаря появлению метода газовой хроматографии, применение эфиров аминокислот, возможно, вновь окажется интересным. [c.479]

В отличие от эфиров ТФА-аминокислот ацетиламинокислоты, впервые изучавшиеся Янгсом [129] в виде н-бутиловых эфиров, менее летучи и, следовательно, имеют больший удерживаемый объем. По-видимому, полярные основные аминокислоты, такие, как Арг, а также Гис, Три и цистин, вряд ли можно подвергать газовой хроматографии. Их нет среди 35 аминокислот (в том числе 18 природных), разделенных с помощью ГХ в виде н-амиловых эфиров Джонсоном и др. [42]. Эти авторы разделяли также н-бутило-вые,. изобутиловые и изоамиловые эфиры, приготовленные аналогично ТФА-производным. Эти эфиры получали в виде бромгидра-тов, а затем прямо ацетилировали уксусным ангидридом. Известно, что при этом из оксиаминокислот образуются также N, 0-диацетиль-ные соединения, но пока нет никаких данных о том, как взаимодействует ангидрид с другими полифункциональными аминокислотами. По сравнению с соответствующими ТФА-производными 0-ацетил-соединения гораздо меньше подвержены гидролизу и, по-видимому, обладают более высокой термоустойчИвостью правда, соответствующих количественных измерений еще не проводили. В литературе описано разделение н-пропиловых эфиров ацетиламинокислот [29], но подробные методики не были опубликованы. [c.321]

Пептиды, подобно аминокислотам, обладают высокой полярностью и низкой летучестью, и поэтому методом газовой хроматографии их можно разделить только в виде соответствующих производных. Поскольку собственно газовой хроматографии пептидов посвящено лишь несколько работ, причем основное внимание в них уделено масс-спектрометрии и хроматомасс-спектрометрии, этот метод более подробно обсуждается в разд. [c.82]

К числу основных задач в области газовой хроматографии относится задача улучшения разделения компонентов смесей. Для этой цели эффективно использование так называемых реакционных методов, т. е. методов, включающих химические реакции. Химическая обработка возможна на разных стадиях процесса, например при разделении аминокислот нужно сначала защитить активные функциональные группы, при анализе высокополимерных веществ применяют гидролиз. Для увеличения избирательности газохроматографического определения нужна разработка селективных детекторов. Другие задачи включают увеличение экспрессивности анализа, что может быть достигнуто, в частности, повышением давления вплоть до 2—3 млн. Па, а также разработку методов определения микропримесей. [c.93]

Как и аминокислоты, пептиды можно анализировать методом газовой хроматографии только после их превращения в более летучие производные. Поскольку основные проблемы, воз- [c.88]

Ч1ротеииы с помощью кислотного, основного или ферментативного гидролиза могут расщепляться на простейшие составляющие — а-ами-нокарбоновые кислоты, обычно называемые просто а-аминокислотами. Ка.чественный анализ получающихся при этом смесей аминокислот связан с относительно большими трудностями. Э. Фишер (1901 г.) обрабатывал такие смеси спиртом и разделял образующиеся в результате смеси сложных эфиров а-аминокислот дробной перегонкой. В настоящее время эти соединения разделяют и идентифицируют методами газовой хроматографии. Использование ионообменной хроматографии позволяет разделить подобные смеси без предварительной этерификации. Существуют приборы, которые автоматически проводят качественный и количественный анализ смесей такого рода. При этом первоначально а-аминокислоты разделяются на ионообменных смолах, элюаты обрабатываются нингидрином, а образующиеся синие окрашенные вещества анализируются колориметрически, кривые поглощения записываются с помоп ью самописца. [c.647]

Аминокислоты Имеется множество методов для выделения и анализа аминокислот в физиологических жидкостях Эти ме тодики используют метод ТСХ, высокоэффективную жидкостную хроматографию, хроматографию на бумаге и газовую хромато графию Основным недостатком анализа аминокислот с по мощью ГХ—МС является необходимость их выделения из био логических жидкостей для последующего анализа в газовой фазе Чаще всего для этой цели применяют ионообменн/ю хро матографию Однако меченые аминокислоты могут потерять изотопную метку при долговременном пребывании в водных растворах при низких значениях pH, что является необходимым условием ионообменной процедуры [c.197]

Монография, написанная коллективом авторов США, Канады н Швейцарии, под редакцией американского ученого Э. Хефтмана посвящена хроматографии — важнейшему современному аналитическому методу, который широко используется в научных исследованиях и в промышленности для контроля и управления технологическими процессами. В практическом аспекте рассматриваются все основные хроматографические методы жидкостная, плоскостная, газовая, ионообменная хроматографии, гель-хроматография, электрофорез. В части 1 рассмотрена хроматография аминокислот, олигопептидов, белков, липидов, терпенов и стероидов. [c.4]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология