Эрлиха прямая

Для обнаружения сиаловых кислот служат характерные цветные реакции с тиобарбитуровой кислотой после предварительного окисления перйодатом (реакция Уоррена) с /г-аминобензальдегидом в присутствии концентрированной соляной кислоты (прямая реакция Эрлиха) и с раствором орцина или резорцина в соляной кислоте (реакция Биаля) Наиболее специфична первая реакция, которая может применяться для обнаружения и количественного определения сиаловых кислот в гидролизатах животных тканей. Она основана на образовании формилпиро-виноградной кислоты, которая и дает окраску с тиобарбитуровой кислотой. [c.337]

На рис. 47 представлены типичные кривые потенциометрической регистрации окислительно-восстановительного потенциала суспензии клеток асцитной карциномы Эрлиха мыши в присутствии феррицианида калия (10" М). Видно, что суспензия свежеотмытых клеток способна восстанавливать Кз[Ре(СК)в] (см. рис. 47, 1) в отличие от надосадка этой же суспензии клеток (см. рис. 47, V). Внесение дитиодипиридина (1 мМ) — соединения, легко проникающего в асцитные клетки и быстро окисляющего редокс-системы, связанные с SH-глутатионом [254], прекращает восстановление феррицианида (см. рис. 47, пунктирная линия). Эти данные свидетельствуют о том, что Кз[Ре(СК)в] восстанавливается при участии внутриклеточных окисли-тельно-восстановительных систем. Внесение аскорбиновой кислоты (10 мкМ) заметно увеличивает скорость восстановления феррицианида (см. рис. 47, 3). Поскольку количество вносимого аскорбата на порядок ниже, чем количество феррицианида, наблюдаемый эффект не может быть объяснен прямой реакцией аскорбиновой кислоты с феррицианидом калия и скорее всего обеспечивается либо действием дегидроаскорбата на окислительно-восстановительное равновесие, либо влиянием его на транспорт восстановительных эквивалентов через клеточную мембрану. [c.209]

ПРЯМАЯ РЕАКЦИЯ N-АЦЕТИ Л-В-ГЛЮКОЗАМИНА С РЕАКТИВОМ ЭРЛИХА (РЕАКЦИЯ МОРГАНА — ЭЛЬСОПА [И]) [c.52]

Прямая реакция Эрлиха основана на превращении сиаловых кислот в производные пиррола, дающие окрашенные соединения при взаимодействии с /г-диметиламинобензальдегидом. Метод пригоден для определения любых производных сиаловых кислот, в том числе и гликозидов, но неприменим непосредственно к неочищенным биологическим препаратам, так как они могут содержать производные пиррола. [c.338]

Нитросоединения поглощают в УФ-области. Эта особенность соединений данной группы значительно облегчает их обнаружение в УФ-области, особенно если бумагу предварительно опрыскивают раствором флуоресцеина. После опрыскивания щелочью нитросоединения превращаются в фиолетовые ач -нитропроиз-водные. Ароматические амины можно с достаточной чувствительностью обнаруживать посредством прямого восстановления их на бумаге (ОР-26), а также с помощью чувствительного реагента Эрлиха (ОР-15). Поскольку нитрогруппа содержит 2 кислородных атома, она в значительной степени полярна (гидрофильна), т. е. в этом отношении примерно соответствует гидроксильной группе. Поэтому выбирать растворители в этом случае следует исходя из соотношения числа углеродных атомов и числа нитрогрупп. Изомерные динитробензолы, динитронафталины, динитроантрахиноны, нитроксилолы, нитротолуолы, нитроэтил-бензолы и некоторые нитрокрезолы можно хроматографировать в обращенно-фазных системах с керосином в качестве неподвижной фазы (пропитывающей жидкости) и смесью этанол —вода— уксусная кислота (20 14 1) в качестве подвижной фазы. Применяются также гидрофильные системы на основе бутанола с добавкой пиридина, аммиака, уксусной кислоты и т. д. [c.134]

Вернер и Один [274] опубликовали подробную методику определения сиаловых кислот с помощью прямой реакции Эрлиха. Реакция специфична для очищенных гликонротеинов, так как, насколько известно, они не содержат каких-либо компонентов, отличающихся от сиаловых кислот и дающих устойчивое пурпурное окрашивание с г-диметиламинобензальдегидом. Триптофан и содержащие триптофан белки дают пурпурное окрашивание нри нагревании с реагентом Эрлиха, но окраска исчезает через несколько минут после охлаждения. Недостатком метода является его невысокая чувствительность для одного определения необходимо 200—400 мкг сиаловой кислоты. [c.220]

Предполагают, что билирубин, входящий в состав желчи, не вполне идентичен билирубину, первично образующемуся в клетках ретикуло-эндотелиальной системы. Так, билирубин, циркулирующий в незначительном количестве в крови, в норме не дает с диазореактивом Эрлиха характерного окрашивания. Для получения положительной реакции сыворотку крови необходимо подвергнуть специальной обработке (белки крови осаждаются спиртом). Поэтому такая реакция называется непрямой реакцией на билирубин. Однако при патологических состояниях, вызываемых закупоркой желчного протока, или при некоторых других нарушениях функций печени происходит застаивание желчи. При этом в кровеносные и лимфатические сосуды попадает билирубин желчи, и тогда реакция с диазореактивом Эрлиха удается без предварительной обработки спиртом. В этом случае говорят о прямой реакции на билирубин. Однако многие считают прямую реакцию на билирубин характерным признаком желтух, сопровождающихся поражением паренхимы печени, а не только застойных желтух. [c.445]

Эффект аггравации имеет явно евалентную природу, так как присоединение сложных аддендов к иону или полярной группе существенно не влияет на их валентное состояние, как это показывают прямые спектроскопические определения. Отодвигая на второй план структурпо-ва-лентный фактор ( фермент подходит к субстрату, как ключ к замку ), который усиленно выдвигался в науке со времени Фишера, Эрлиха, Моргенрота, концепция аггравации старается найти иной, более о бший механизм активации сложных структур. Действительно, хотя имеется много данных о тонкой настройке биологических катализаторов на опре- [c.50]

Для определения сиаловых кислот используется ряд реакций. Одной из специфических реакций является прямая реакция Эрлиха. При нагревании сиаловой кислоты (100°С) в 1 н. соляной кислоте в присутствии л-диметиламинобензальдегида появляется пурпурная oik-раска, обусловленная, по-видимому, образованием пирролкарбоновой кислоты. Данная реакция широко применяется при исследовании гликопротеинов, так как другие компоненты этих биополимеров в этих условиях не дают окрашенных соединений. Широко используется также реакция Уоррена с тиобарбитуровой кислотой. При этом образующаяся в результате окисления перйодатом формилпировиноградная кислота взаимодействует с 2-тиобарбитуровой кислотой и дает окрашенное соединение (Хмакс 549 нм) [c.46]

Наиболее специфичной из цветных реакций сиаловой кислоты является прямая реакция Эрлиха , т. е. образование устойчивой пурпурной окраски при нагревании сиаловой кислоты при 100° в 1 н. соляной кислоте в присутствии /г-диметиламинобепзальдегида. Хромогеном является, вероятно, 5-тетраоксибутилпиррол-2-карбоновая кислота [64] (см. гл. 8). [c.180]

Наиболее специфичный из одностадийных методов основан на прямой реакции Эрлиха. Блике [273] впервые сообщил, что сиаловые кислоты без предварительной обработки щелочью дают пурпурное окрашивание при нагревании с г-диметиламинобензальдегидом в водной соляной кислоте. Окраска устойчива и очень похожа на окрашивание, даваемое пирролами. Хромогеном в этой реакции является, вероятно, производное пиррола (XXIV) [22]. [c.220]

Важные дополнительные сведения при идентификации дают положительная реакция с тиобарбитуровой кислотой, положительная прямая реакция Эрлиха и специфическое отщепление остатка М-ацилированной нейраминовой кислоты от гетеросахарида под действием нейраминидазы. Идентификация сиаловых кислот с помощью хроматографии на бумаге является наименее удовлетворительной. Причину такого необычного факта следует искать в неустойчивости сиаловых кислот. Сиаловые кислоты легко разлагаются в водных растворах при значениях pH, обусловленных их присутствием, или в слабощелочной среде [290, 291], в результате чего часто дают на бумажных хроматограммах несколько пятен. Гранцер [292] описал тонкослойную хроматографию производных нейраминовой кислоты. [c.224]

Начальные, промежуточные и конечные фракции асимметричного пика при хроматографии на ТЭАЭ-целлюлозе не показали заметного различия в антитрипсиновой активности, содержании нейтральных сахаров (по орцину) и в соотношении маннозы к галактозе [19]. Содержание сиаловой кислоты лри определении методом с дифениламином варьировало от 1% в первых л до 2% в последних фракциях, но было одинаковым (около 0,5%) при определении прямым методом Эрлиха (см. том 1, гл. 8). Выделение овомукоида [c.26]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология