Гель-проникающая хроматография сорбенты

Физические основы этого метода очень просты и наглядны. Исследуемый раствор полимера протекает через колонку, наполненную пористым сорбентом. Разделение смесей компонентов основано на распределении определенного компонента между подвижной (текущий растворитель) и неподвижной (растворитель в порах) фазами. Таким образом, определенне ММР методом гель-проникающей хроматографии основано на разной способности макромолекул проникать в поры гранул геля, отсюда и принятое название метода — гель-проникающая хроматография. [c.206]

В тонкослойной хроматографии сорбент высушивается перед нанесением образца. Гель же сушить нельзя, более того, он легко дегидратируется, поэтому в тонкослойной гель-проникаю-щей хроматографии образец наносится на влажный гель, уравновешенный требуемым растворителем. [c.205]

Ограничимся рассмотрением эксклюзионной, или гель-хроматографии. Этот процесс можно рассматривать как процесс сепарации раствора, при котором компоненты разделяются (фракционируются) в соответствии с размером молекул. В качестве сорбента, или, как его еще называют, молекулярного сита, используют пористые полимерные шарики. При прохождении молекул через слой сорбента в микропоры шариков проникают молекулы, размер которых меньше размера пор. Молекулы большего размера в поры не проникают. На рис. 6.12 схематично показан процесс сепарации молекул двух сортов, различающихся размерами [4]. [c.134]

Основной принцип гелевой хроматографии состоит в использовании различной способности полимерных молекул неодинаковых размеров проникать внутрь набухших гелевых зерен, образованных из полимерных сеток и применяемых в качестве сорбента для заполнения хроматографических колонок. Гели подбираются таким образом, чтобы исключить взаимодействие их матриц с полимером- [c.81]

В литературе описаны попытки использования сефадексов и биогелей, представляющих собой соответственно сшитый декстран и гранулированный полиакриламидный гель, для разделения компонентов нуклеиновых кислот за счет различного сродства их молекул к сорбенту [32, 33]. Однако в основном гель-хроматографию применяют для фракционирования нуклеиновых кислот и их компонентов в соответствии с размерами молекул этих соединений. Например, на колонке с сефадексом 0-10 нуклеозиды и нуклеотиды отделяются от неорганических солей (выходят со свободным объемом колонки) [34]. Аналогичным образом олигонуклеотиды, содержащие больше 10—15 нуклеотидных остатков, не задерживаются на сефадексе 0-25 или 0-50, а мононуклеотиды проникают в поры геля и поэтому элюируются значительно медленнее [3]. Именно этот метод широко используют для удаления избытка нуклеозидтрифосфатов из смеси биосинтетических олиго- и полинуклеотидов [35]. [c.167]

В эксклюзионной хроматографии молекулы веществ разделяются по размеру (устаревшее название метода — ситовая, или молекулярная хроматография гель-хроматография) за счет их различной способности проникать в поры неподвижной фазы. При том первыми выходят из колонки наиболее крупные молекулы (с большой молекулярной массой), последними — вещества с малыми размерами молекул, свободно проникающие в поры сорбента. Разделение анализируемых веществ происходит за счет перераспределения молекул между растворителем, находящимся [c.13]

Детальное изложение основ различных методов определения ММР можно найти в специальных изданиях,, например [106, гл. 2]. Здесь же целесообразно рассмотреть лишь метод, основанный на использовании гель-Прошкающей хроматографии (ГПХ), поскольку он занял ведущее положение благодаря ряду особенностей скорость анализа, его простота н возможность полной автоматизации всего процесса анализа, начиная с момента ввода пробы до выдачи информации о кривой распределения и её моментах разделение макромолекул по размерам не зависит от химической природы фракционируемых компонентов, так как механизм разделения основан на разной способности макромолекул различных размеров проникать в поры гранул сорбента. [c.90]

В гель-проникаюшей хроматографии ta — характеризует молекулы и вешества, которые не могут проникнуть в поры геля в колонке в адсорбционной хроматографии — вещества, которые хотя и проникают практически в весь объем пор, но не задерживаются вследствие взаимодействия с поверхностью сорбента. Коэффициент емкости характеризует процессы взай модействия разделяемого вещества с подвижной и стационарной фазами и является, следовательно, термодинамической величиной. Его значение зависит от коэффициента распределения вещества /Сг и объемов стационарной (Ух) и подвижной (Ут) фаз в колонке [c.232]

Разновидность хроматографического метода, в котором роль неподвижной фазы играет макропористый сорбент, адсорбционно инертный по отношению к молекулам хроматографируемого веш,е-ства, называется гель-проникаюш ей хроматографией, если размеры пор соизмеримы с размерами молекул. Название метода сложилось исторически и недостаточно полно отражает его сущность. Это объясняется тем, что на первых порах (60-е годы) в качестве сорбента использовали только набухающие гели — декстрановые для разделения белков и нолистирольные для анализа полимеров [1, 2]. Они представляют собой трехмерные полимерные сетчатые структуры (рис. HI.1), внутрь которых могут с определенной вероятностью проникать различные макромолекулы. Эта вероятность зависит от соотношения размеров макромолекул и ячеек сетки, а скорость проникновения в гель определяется диффузионной подвижностью макромолекул. Для малых макромолекул она выше, чем для больших. Очень большие молекулы не проникают внутрь геля, а очень малые попадают туда с вероятностью, близкой к единице. [c.81]