Гликопротеины анализ методом ГЖХ

Метод окрашивания полисахаридов перед электрофорезом [478] использовали Павленко и Оводов [479] для анализа ряда нейтральных и кислых полисахаридов с помощью электрофореза в полиакриламидном геле. Для разделения различных компонентов полидисперсных декстранов и амилопектинов с помощью диск-электрофореза ими использованы буферы, содержащие тетраборат натрия (или борную кислоту), трис(гидроксиметил)-аминометан и натриевую соль ЕВТА при pH 9,2—9,3. Электрофорез в полиакриламидном геле используют также для анализа пектиновых веществ [480] и сульфатированных полисахаридов из морских водорослей [481], однако основной областью применения данного метода в химии углеводов является исследование гликопротеинов [482] и гликозаминогликанов (483, 484]. В по- [c.75]

Последовательность мономеров в пептидных и олигосахаридных цепях. Для определения этой последовательности используются два пути— изучение последовательности мономеров в выделенных после глубокой деструкции фрагментах гликопротеинов и установление строения концевых групп гликопротеина. Нужно при этом иметь в виду, что общие методы, используемые при анализе структуры полисахаридов, — метилирование и периодатное окисление (см. гл. 19) в применении к самому гликопротеину могут дать пока крайне ограниченную информацию. Дело в том, что метилирование гликопротеинов, видимо из-за особенностей их вторичной структуры, с большим трудом проходит до конца и чаще всего [c.573]

Методы хроматографического разделения гликопротеинов фактически не отличаются от методов, используемых в химии белков и пептидов. Также имеется ряд белков, которые в обычном смысле не считаются гликопротеинами, хотя они содержат один или несколько гликозидных остатков. Конечно, существует множество методов, с помощью которых могут разделяться различные гликопротеины. С точки зрения хроматографиста, здесь не следует детально их описывать. С другой стороны есть хроматографический метод, специфичный для структурных анализов гликопротеинов и гликопептидов. Специфичность основана на вы-боре подходящей системы детектирования, а не собственно метода разделения. Здесь будет кратко рассмотрен метод, описанный в работе [221- [c.145]

Метод периодатного окисления применяется для установления строения олигосахаридов, полисахаридов, гликопротеинов и гликопептидов. Преимуществом этого метода является то, что расщепление гликоль-ных группировок протекает количественно и анализ требует небольшого расхода вещества. [c.82]

Важную группу полисахаридов составляют гликозаминогликаны, к которым относятся гиалуроновая кислота, хондроитинсульфаты и кератансульфат. Было показано, что в ориентированных пленках молекулы этих соединений в зависимости от типа присутствующих катионов могут принимать целый ряд взаимо-превращаемых конформаций [12]. Эти конформации представляют собой группу левых спиралей, упакованных антипараллельно и отличающихся в основном степенью растянутости. Наиболее сжатой является одна из конформаций гиалуроновой кислоты, в которой одна молекула закручена вокруг другой с образованием двойной спирали [13] во всех остальных случаях молекулы упакованы бок о бок . В некоторых случаях удалось детально выяснить строение молекул, что для волокнистых веществ, в отличие от кристаллических, очень трудно сделать удалось даже выявить положение молекул воды и геометрию участков молекул, координированных вокруг катионов [14]. Важными вехами на пути понимания конформационных принципов строения полисахаридных цепей стали а) первый пример установления с помощью, рентгеноструктурного анализа упорядоченной конформации разветвленного полисахарида (внеклеточного полисахарида Е. oli) это позволило предположить, что наличие ветвлений играет важную роль при ориентации боковых цепей антипараллельно основной цепи и стабилизации таким образом конформации молекул полисахарида посредством нековалентных взаимодействий [15] б) первое изучение этим же методом структуры кристаллического гликопротеина, которое показало упорядоченность конформации его углеводной части [16]. Ко времени опубликования работы [16] определение строения (F -фрагмента иммуноглобулина G) не было доведено до конца, однако уже можно было сделать ряд важных выводов, которые будут рассмотрены ниже. [c.283]

Как правило, любому типу анализа альдоз предшествует кислотный гидролиз. Условия гидролиза подбирают с таким расчетом, чтобы деградация образующихся сахаров была минимальной [5, 8]. Структуру некоторых типов углеводсодержащих соединений, например гликопротеинов и полисахаридов, изучают на основании данных частичного кислотного гидролиза [5]. Этот метод не только позволяет получить максимальный выход каждой альдозы, но и дает дополнительную информацию о последовательности моносахаридных остатков и о характере гликозидных связей. [c.24]

Для установления количественного состава входящих в гликопротеин моносахаридов и аминокислот биополимер подвергают полному кислотному гидролизу, и состав гидролизата определяют обычными методами количественного анализа. Пептидные связи устойчивее гликозидных по отношению к кислотам, поэтому для полного расщепления на мономеры гликопротеины приходится гидролизовать в более жестких условиях, чем обычные полисахариды (6 н. НС1, 100—ПО °С, 24 ч) . Нужно иметь в виду, что как сахара, так и аминокислоты могут частично распадаться в условиях кислотного гидролиза, причем в ряде случаев можно с помощью ХОЛОСТЫХ опытов внести соответствующие поправки при анализе. Специфической для гликопептидов побочной реакцией в условиях кислотного гидролиза является возможная конденсация сахаров с аминокислотами, приводящая к окрашенной сложной смеси различных веществ, в том числе простейших карбонильных соединений (так называемая реакция Майяоа). Например, по данным Готшалка , потеря аминокислот при кислотном гидролизе богатых сахарами гликопротеинов может составлять до 30 %. Количественное определение моносахаридов проводят с использованием хроматографии, спектрофотометрической и колориметрической техники (см. гл. 14). Для анализа аминокислот применяют обычно методы, хорошо известные из химии белка. Так, количественный анализ аминокислотного состава проводят в автоматических анализаторах или с помощью газо-жидкостной хроматографии . [c.567]

В книге собран и обобщен обширный новейший экспериментальный материал по химии и биохимии гликопротеинов — представителей одной из важнейших групп углеводсодержащих биополимеров, широко распространенных в организме человека и животных и выполняющих наравне с белками и нуклеиновыми кислотами ответственные и разнообразные функции (например, они участвуют в явлениях иммунитета, в системе свертывания крови, входят в состав межклеточных и суставных жидкостей, соединительных тканей). В книге представлены все методы анализа гликопротеинов, химические и физико-химические методы их исследования и результаты структурных исследований отдельных гликопротеинов. [c.4]

Другой известный метод — фенол-сернокислый, или метод Дюбуа, — имеет еще более высокую чувствительность (1-10 мкг/мл сахаров в пробе). Существуют различные модификации метода, который нашел наибольшее применение для анализа углеводной компоненты в гликопротеинах. Для определения глюкопиранозных звеньев в непрогидролизовавшихся остатках он применяется сравнительно реже в силу необходимости определенного навыка для получения воспроизводимых результатов. [c.135]

Использование масс-спектрометрии в сочетании с ГЖХ играет важнейшую роль при решении многих задач в химии углеводов, особенно при анализе сложных смесей, образующихся в ходе структурного изучения полисахаридов и гликопротеинов. Подавляющее большинство производных углеводов, используемых для анализа методом ГЖХ. изучено с помощью масс-спектрометрии. Результаты изучения характера фрагментации этих производных детально изложены в прекрасных обзорах Кочеткова и Чижова [367, 368], Ханессиана [369], а также Лённ-грена и Свепссона [370]. Ценная информация, касающаяся хроматомасс-спектрометрии сахаров, содержится также во всестороннем обзоре Даттона, посвященном ГЖХ углеводов [226, 227]. [c.59]

Поскольку многие гликопротеины содержат лишь небольшое количество углеводов, для их анализа могут быть использованы протеолитические ферменты (например, проназы) при обработке этими ферментами образуются гликопептиды с небольшим числом аминокислотных остатков, к которым присоединены интактные углеводные звенья. Такие гликопептнды анализируют [188] классическими методами периодатного окисления [189] и метилирования, а также последовательным ферментативным гидролизом (см. разд. 26.3.2.11) для идентификации моносахаридных звеньев, в результате которого получают единственный аминокислотный остаток, связанный с моносахаридным звеном. Установлено, что осуществляются только два типа такой связи 0-гликозидная связь с серином, треонином, гидроксипролином и гидроксилизином, и Л -гликозидная связь с аспарагином. Показано, что в образовании таких связей могут участвовать только пять моносахаридов -арабиноза, D-ксилоза, D-галактоза, 2-ацетамидо-2-дезокси-0-глюкоза и 2-ацетамидо-2-дезокси-0-галактоза. [c.265]

Белковые вещества пентозных дрожжей представлены протеинами (нуклеопротеин, фосфопротеин, лецитопротеин, гликопротеин), глобулинами, альбуминами и более простыми — пептонами, полипептидами и аминокислотами. Анализ белка хроматографическим методом показал, что он содержит все жизненно необходимые аминокислоты. Количество их- в пентозных дрожжах следующее (в % от сухого вещества) [c.572]

При анализе структуры углеводных цепей гликопротеинов важным этапом является определение моносахаридного состава. Здесь используются обычные методы структурного анализа углеводов, а именно кислотный гидролиз или метанолиз с последующим хроматографическим разделением продуктов. По моносахаридному составу, как правило, можно судить и о типе углевод-белковых связей, в частности наличие N-aцeтилгaлaктoзaм>lнa говорит о присутствии О-гликозидных цепей. [c.475]

В настоящее время делаются попытки разработки автоматического анализа моносахаридов в полисахаридах и гликопротеинах [63] с использова ием метода жидкостной хроматографии их боратных комплексов. [c.84]

Определение сахаров в гликонротеине нуждается в подходе, несколько отличающемся от того, который используется при анализе аминокислотного состава белков. Во-первых, все методики количественного определения данного сахара требуют освобонедения моносахарида из его глпкозида либо в отдельной предварительной стадии, либо в общей части используемой аналитической процедуры. Это объясняется тем фактом, что, вообще говоря, единственными функциональными группами, присутствующими в углеводной части гликопротеинов и обнаруживаемыми физическими или химическими методами до гидролиза, являются гидроксильные группы, общие для всех типов сахаров. Конечно, имеются также карбоксильные группы сиаловых кислот, обусловливающие сильно кислотный характер гликопротеинов, содержащих остатки сиаловых кислот. С другой стороны, боковые цепи аминокислотных остатков обычно свободны, сильно отличаются по структуре и реакционной способности и многие из них могут быть обнаружены и определены количественно физическими или химическими методами. Так, измерение поглощения в ультрафиолете применяется для определения тирозина и триптофана с помощью специальных методик можно отличить цистеин от цистина, а аргинин и гистидин можно определить колориметрическими методами, причем все это выполняется на интактном белке. [c.195]

Ri kert S.J.,Sweeley С.С.-J. hromatogr., 1978.147.317-326. Количественный анализ углеводных остатков гликопротеинов и гликолипидов методом газожидкостной хроматографии. Некоторые детали эксперинента. (Подробно описана методика подготовки проб и анализа углеводов.) [c.347]

ГЖХ ацетатов альдитов представляет собой эффективный и точный метод определения содержания альдоз в биологических материалах. Разделение ацетатов альдитов, начиная с триацетата глицерина и кончая октаацетатами октитов, методом ГЖХ было впервые описано в 1961 г. [1, 2]. Несмотря на то что пригодность метода для количественного анализа была доказана, он не находил широкого применения из-за сложности подготовки колонки кроме того, не удавалось разделить D-глюцит и галактит. В последующие четыре года существенного прогресса не наблюдалось. В 1965 г. была предложена новая жидкая фаза EGNSS-M— сополимер сукцината этиленгликоля и цианоэтил-кремния, — которая оказалась пригодной для разделения всех простых альдитов вплоть до гекситов [3]. С этого времени метод ГЖХ с успехом применяется для определения содержания нейтральных альдоз в гемицеллюлозах древесины [4], полисахаридах клеточных стенок растений [5], гликопротеинах [6—8] и почвенных гидролизатах [9], а также для определения альдоновых кислот в целлюлозе древесины 10], частично метилированных альдоз [11] и продуктов периодатного окисления олигосахаридов [12]. [c.22]

Известен ряд методов определения муравьиной кислоты, образующейся при периодатном окислении. На страницах этой серии сборни-ников рассматривались методы, включающие а) прямое > титрование муравьиной кислоты щелочами [2—4] б) титрование иода, выделяющегося из смеси иодида и иодата [3, 5] в) манометрическое определение углекислого газа, образующегося при разложении бикарбонат-ного буферного раствора [6]. Перечисленные методы не пригодны для определения содержания муравьиной кислоты в интервале О—5 мкмоль в ряде случаев ввиду того, что все эти методы основаны на измерении кислотности среды. На результатах анализа сказывается присутствие любых кислых продуктов и pH раствора, в котором проводится окисление. Кроме того, результат анализа зависит от наличия в биополимере (например, гликопротеине) кислотных групп. Этот фактор устраняют, проводя в тех же условиях холостой опыт биополимер обраба- [c.78]

Принципы и техника электрофореза не требуют специального описания [14—16]. Обнаружение одиночного пика при двух или трех достаточно далеких значениях pH является признаком гомогенности. Применение для этой цели интерференционной онтики менее удовлетворительно, несмотря на ее высокую чувствительность, поскольку полученная кривая требует дифференцирования. Электрофоретическая подвижность зависит как от заряда молекулы, так и от гидродинамического сопротивления, причем оба эти фактора независимы. Они могут компенсироваться, давая в результате одинаковую подвижность для двух физически совершенно различных молекул, по это не может происходить при различных значениях pH. Поэтому важно проверить устойчивость гликопротеина в изучаемом интервале pH многие гликонротеины неустойчивы, особенно при высоких pH [17—19]. Полезная дополнительная информация может быть получена, если гликопротеин содержит заметные количества концевой сиаловой кислоты. В таких случаях заряд молекулы онределяется главным образом этим компонентом, и в большинстве случаев сиаловую кислоту можно почти полностью удалить с помош ью нейраминидазы. Если используемое количество фермента таково, что его можно обнаружить при последуюш,ем электрофоретическом анализе, фермент лучше сначала удалить, если это можно сделать удобным способом. Часто для этого пригодна гель-фильтрация. Молекулярный вес нейраминидазы холерного вибриона составляет около 9 -10 (Лэйвер [20]). Если после обработки нейраминидазой наблюдается два или более электрофоретически различных компонента вместо одного, наблюдавшегося перед обработкой, это значит, что материал, несмотря на его электрофоретическую гомогенность, содержит молекулы, различающиеся по химической природе остатков, от которых зависит заряд молекулы. Эта процедура может повысить степень полидисперсности, если реакция пе доведена до конца, но она не будет превращать гомогенные препараты в гетерогенные. Очевидно, важно убедиться, что используемая нейраминидаза не обладает никакой иной ферментативной активностью, особенно протеолитической. Описаны методы получения нейраминидазы необходимой чистоты [21, 22]. Проверке по этому способу был подвергнут а1-кислый гликопротеин человека [23], после обработки нейраминидазой наблюдалось два электрофоретических ника, несмотря на кажущуюся гомогенность необработанного материала в широком интервале рЬ1. [c.45]

Использование гелевых сред значительно повышает разрешающую силу электрофоретического анализа и позволяет нолучить полезную информацию на очень малых количествах материала. Однако некоторые гликопротеины, главным образом недеградированные эпителиальные гликопротеины с очень большими молекулами, не мигрируют в гелях сколько-нибудь заметным образом. Описан метод [36], состоящий в использовании очень разбавленных агаровых гелей, который позволяет избежать этих трудностей. Однако даже если размер молекул таков, что можно ожидать их проникновения в гель, концентрация раствора, который должен наноситься на стартовую полосу, так высока, что гликопротеин образует плотную молекулярную сетку и сам имеет гелеподобную структуру. При этих условиях образуется интенсивная полоса на старте, иногда сопровождающаяся диффузным хвостом , вытянутым в сторону анода. Тем не менее метод оказался полезным для изучения продуктов расщепления эпителиальных гликопротеинов и служит мощным инструментом исследования более низкомолекулярных и более компактных гликопротеинов. Обнаружение единственной [c.47]

Детали этого метода описаны Кабатом и Мейером [66, 77]. Если можно получить сильные осаждающие антисыворотки, химический анализ преципитата гликопротеин — антитело может дать полезные сведения. Если гликонротеин гомогенен, то весь его гексозамин, гексозы, фукоза и сиаловые кислоты должны быть найдены в иммунном осадке (после поправки на растворимость осадка и если антитело присутствует в избытке). Ценность этой методики для гликонротеинов ясна в противоположность простым белковым антигенам гликонротеины могут содержать значительные количества таких легко определяемых компонентов, которые иммунный у-глобулин содержит только в небольших количествах [78—81]. Естественно, если препарат содержит несколько антигенных компонентов и антисыворотка содержит антитела ко всем этим компонентам, количественный анализ преципитации может указывать на гомогенность, хотя образец загрязнен. При таких обстоятельствах полная кривая осаждения даст большую информацию, и ингибирование осаждения низкомолекулярными веществами (если они доступны) также иногда можно использовать, чтобы отличить гомогенные препараты от гетерогенных. [c.54]

Успешное применение любой из описанных многочисленных модификаций (см. стр. 136) метода анализа смесей аминокислот ионообменной хроматографией зависит главным образом от тщательного выполпепия экспериментальной процедуры. Подробности эксперимента описаны в оригинальных работах, и целесообразно посвятить определенное время отработке выбранного метода, прежде чем переходить к модификациям. Описание деталей выполнения анализа выходит за рамки этой главы, целью которой является обсуждение специальных проблем, возникающих ири аминокислотном анализе гликонротеинов, и связанных с ним структурных соображений. Многие из этих трудностей возникают не нри самом анализе, а в процессе первоначальной обработки гликопротеина, особенно при гидролизе. При расщеплении иолипептидпых цепей белка на аминокислоты появляется возможность для многих побочных реакций, включающих разложение аминокислот. [c.121]

ТОК метода состоит в том, что иптепсивпость окрашивания различна для разных белков, причем эти различия могут достигать трехкратной величины. Для точных анализов необходимо поэтому строить калибровочный график по тому белку, который требуется определять, и нельзя пользоваться, как это часто делают, удобным, но произвольным стандартом типа сывороточного альбумина быка. Готтшалк [70] считает, что калибровка с помощью белкового компонента гликопротеинов неосуществима и это делает невозможным применение обсуждаемого метода для точных определений. Структурные особенности белка, определяющие интенсивность окраски, сложны и включают не только содержание тирозина и триптофана, но и последовательность некоторых аминокислот с функциональными группами в боковой цепи, особенно гистидина, аргинина и глутаминовой кислоты 1123]. Можно ожидать, что различие в содержании тирозина во фракциях гликопротеинов само по себе может давать ошибочные результаты [121]. [c.151]

Только в последние несколько лет получены точные сведения о природе связи между углеводной группой (гетеросахаридом) и полипептидной цепью в гликопротеинах. Это объясняется тем, что только в последние годы в этой области были успешно применены хроматографические методы. Еще в 1938 г. Нойбергер [1] выделил из яичного альбумина гликопептид, который, как это стало ясно теперь, содержал остаток аспарагина но тогда аспарагин не был обнаружен, поскольку не были разработаны удобные методы анализа малых количеств аминокислот, не имеющих специфических характеристик. Решение проблемы было ускорено новыми методами аминокислотного анализа, такими, например, как метод, разработанный Муром и Стейном, и расширением знаний о принципе построения некоторых гликонротеинов. Как можно видеть из гл. 1 и 2, основная концепция об общем построении гликонротеинов была развита только сравнительно недавно, а первые экспериментальные данные о связи между углеводами и пептидами в гликопротеинах животного нроисхождения опубликованы в 1957 и 1958 гг. [c.278]

В тех гликопротеинах, где углевод-пептидная связь осуществляется через остатки серина и (или) треонина, аминокислотные остатки, включенные в эту связь, могут быть обнаружены методом, основанным на характерной реакции -элиминирования (см. стр. 289), которая наблюдается при обработке гликонротеинов и гликопентидов в мягких щелочных условиях. Механизм р-элиминирования обсуждается более полно на стр. 291 и сл. Если провести аминокислотный анализ кислого гидролизата гликопротеина до и после обработки гликонротеина щелочью, то значительное уменьшение количеств серина и (или) треонина, вызываемое щелочной обработкой, может рассматриваться как хороший довод в пользу участия остатков одной или обеих аминокислот в углевод-пептидной связи. Более того, а-аминоакриловая или а-аминокротоновая кислоты, образующиеся из связанных О-гликозидноп связью остатков серина и треонина соответственно, могут быть восстановлены водородом в присутствии платины на угле [21] или борогидридом [22] до соответствующих насыщенных а-аминокислот. Образовавшиеся непредельные а-аминокислоты могут быть также превращены с помощью сульфита в цистеиновую кислоту (из серина) или соответствующее производное треонина [19] можно измерить, кроме того, характерное поглощение непредельных аминокислот в УФ-свете [20]. [c.279]

Количественный анализ компонентов гетеросахарида овомукоида столь же сложен и труден, как и анализ гетеросахаридных цепей любых гликопротеинов (см. гл. 8). В данном случае плохое совпадение результатов, полученных различными исследователями, может быть обусловлено отсутствием метода выделения гемогенного исходного препарата. В табл. 2 приведен ряд условий гидролиза, использованных для выделения глюкозамина, и данные по его составу. Обработка овомукоида 4 н. соляной кислотой при 100° в течение примерно 8 час оказалась оптимальной [30]. Величина, полученная при этих условиях (15,5%), находится в соответствии с теоретической величиной, которую можно получить, если исходить из числа ацетильных групп препарата. При определении ацетильных групп в овомукоиде [c.29]

Аминокислотный состав фетуина изучали в двух лабораториях, причем каждая группа исследователей использовала свой препарат (табл. 3). В обоих случаях был применен кислотный гидролиз гликопротеина и последующий анализ по методу Мура и сотр. [29]. Триптофан определяли спектрофотометрически. [c.62]

Другой особенностью, которая отличает гликопротеины от остальных белков, является наличие в них углеводных остатков, которые мешают исследованию аминокислот, образующихся нри кислотном гидролизе. Эти вопросы обсуждаются в гл. 5 тома 1. Относительно трудно определять амидные группы в белках в присутствии гексозаминов, и особенно сиаловой кислоты этот вопрос обсуждается в гл. 6 тома 1. Взаимодействие между аминокислотами и восстанавливающими сахарами (см. том 1, гл. 4) приводит к частичному разрушению последних, создавая дополнительные трудности по сравнению с теми, которые встречаются при анализе высокоочищенных гетерополисахаридных комплексов. Однозначная идентификация углеводных компонентов при получении их кристаллических производных и другие соответствующие аспекты химии сахаров рассмотрены в гл. 7 тома 1. В гл. 8 обсуждаются различные условия при анализе углеводов гликопротеинов, обеспечивающие получение наиболее достоверных результатов. Методы, применяющиеся в настоящее время и включающие кислотный гидролиз с последующим определением моносахаридов, могут быть в дальнейшем усовершенствованы и улучшены. Необходимо, однако, признать, что для определения углеводных компонентов гликопротеинов необходимы новые методы. [c.294]

Трудности структурного анализа гетеросахаридов гликопротеинов объясняются прежде всего сложностью их состава, так как большинство из них содержит от четырех до шести различных типов углеводных остатков. Вторым фактором является полное отсутствие повторяющихся участков в гетеросахаридах и то, что они имеют разветвленное строение. Эти особенности делают очень трудным анализ экспериментальных данных, полученных с помощью современных методов. Имеется еще одна трудность, состоящая в том, что ряд гликопротеинов содержит несколько гетеросахаридных цепей сходного, но не идентичного состава и, вероятно, с различной последовательностью углеводов. В этом случае трудно отделить такие цепи друг от друга, и интерпретация полученных данных при оценке их строения представляет особую проблему (см. том 1, гл. 9). [c.294]

Применяемые для этой цели методики исходят из общих методов анализа углеводов [49], гликосфинголи-пидов [43] и гликопротеинов [47]. Сахара, связанные гликозидными связями, освобождаются путем метанолиза с выделением 0-метилгликозидов, и все свободные сахара также превращаются в метилгликозиды тем же способом. При метанолизе гликозидных связей происходит изменение конфигурации молекулы, однако при этом образуется только один аномер. Из свободных сахаров образуется больше одного аномер а, так как в растворе присутствует смесь аномеров. [c.211]

Наиболее часто типичные гликопротеины млекопитающих содержат следующие моносахариды ь-фукозу (6-дезокси-ь-га-лактоза), о-маннозу, о-галактозу, Ы-ацетил-о-глюкозамин (2-ацетамид-2-дезокси-о-глюкоза) и сиаловые кислоты (различные производные нейраминовой кислоты). В состав некоторых гликопротеинов входят о-глюкоза или Ы-ацетил-о-галактозамин (2-ацетамид-2-дезокси-о-галактоза). Наилучшие результаты для разделения, идентификации и количественного определения этих семи моносахаридов достигаются с помощью газожидкостной хроматографии. Существует два основных метода модификации сахаров для последующего анализа газожидкостной хроматографией альдит-ацетатный и метил гл икозид-триметил сил ильный. Первый включает водный кислый гидролиз с последующим восстановлением образующихся альдоз до соответствующих аль-дитов и их ацетилирование второй основан на применении метанолиза, приводящего к образованию метилгликозидов и метиловых эфиров сиаловых кислот, которые затем превращаются в триметилсилильные производные. [c.318]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология