Фосфолипиды на активность ЫаК-АТФазы

Na , К+-АТФаза-фермент состоит из двух полипептидных цепей с молекулярной массой 84000 и 5700, которые формируют большую и малую субъединицы фермента. Белок прочно связан с фосфолипидами, полное удаление которых из мембран приводит к исчезновению АТФазной активности. [c.152]

Поскольку Ыа+К -АТФаза локализована на поверхностях мембран и даже, возможно, является их структурным компонентом, не удивительно, что активность этого фермента зависит от наличия фосфолипида. Присоединение фосфолипида в определенном количественном соотношении к белку ведет к переходу фермента из неактивной формы в полностью активную форму. У разных организмов и в разных тканях активаторами, вероятно, могут служить различные фосфолипиды в солевой железе морских птиц это, по-видимому, не фосфолипид, а сульфатид (рис. 47). [c.145]

Противоречивые данные получены также при исследовании избирательности связывания белков с различными фосфолипидами. Так, селективность взаимодействия фосфолипидов, несущих определенные полярные группы, была выявлена для родопсина, На+, К -АТФазы из 8диа1из a antus, цитохром-с-оксидазы, Са +-АТФазы. Вместе с тем многочисленные эксперименты по реактивации выделенных мембранных ферментов путем добавления экзогенных липидов и детергентов показали, что в большинстве случаев не существует специфических белок-липидных взаимодействий, обеспечивающих ферментативную активность разные типы липидов могут одинаково влиять на функционирование мембраносвязанных белков. Несмотря на то, что взаимодействие липидов с интегральными белками носит в основном гидрофобный характер, электростатические силы связывания заряженной гидрофильной части белковой молекулы и полярных групп окружающих липидов могут существенно влиять на характер липидного микроокружения белка. Кроме того, для активирующего действия липидов по отношению к некоторым мембранным ферментам важны такие факторы, как степень подвижности ацильных цепей и способность липидов образовывать мицеллы. По-видимому, сродство разных липидных молекул к белкам мембраны определяется не спецификой белков, а спецификой липидных молекул. [c.60]

По современным представлениям, Ма , К -АТФаза является типичным липидзависимым ферментом для формирования его функционально-активной конформации необходимы кислые липиды. Показано, что мембранные гликолипиды, локализованные преимущественно в наружной половине бислоя, обеспечивают правильную ориентацию Ма , К -АТФазного комплекса относительно плоскости мембраны (т.е. они отвечают за проявление векторных свойств фермента). Вместе с тем остается неясным, какова специфическая роль мембранных фосфолипидов в обеспечении транспортной функции Ма, К -АТФазы. По-видимому, функционирование центров связывания нуклеотидов и катионов на молекуле фермента не зависит от липидов, тогда как для осуществления конформационных перестроек в ферментном белке важна его связь с мембранными липидами. Кривые, описывающие зависимость ферментативной активности от концентрации липида, имеют сигмоидную форму, что свидетельствует о кооперативном характере связывания липидов с белком. Однако абсолютная потребность фермента в тех или иных фосфолипидах (или их полярных головках) экспериментально не доказана. Так, опыты по ферментативному превращению одних фосфолипидов в другие (например, фосфатидилсерина в фосфатидилэтаноламин) в препаратах мембраносвязанной Ка" , К+-АТФазы показали, что фермент может функционировать без отрицательно заряженных фосфолипидов, но с уменьшением молекулярной активности. [c.92]

Большое значение для нормального функционирования фермен-ta имеет липидное окружение N3, К-АТФазы. Делипидировзние вызывает торможение его рзботы, в то время кзк добзвление фосфолипидов восстанавливает активность. Микровязкость клеточных ембран из-за изменений ионной силы, действия метаболитов и других факторов не является постоянной и может влиять на кон-фОрмационное состояние фермента. [c.10]

I. J. Бе PoIlt е% а1. (1978) показали, что гидролиз различных фосфолипидов, содержащихся в высокоочищенном препарате Ма+, К -АТФазы из ткапи почек крокодила с помощью фосфолипазы С, существенно не влияет на активность фермента. С другой стороны, удаление 60 % фосфолипидов из такого же препарата белка с помощью фосфолипазы А приводило к потере 70 % АТФазной активности, в то время как число уабаин-связываю-щих центров оставалось неизменным. Такой разброс данных о липидной потребности Ма , К -АТФазы объясняется тем, что снижение ферментативной активности обусловлено не только уменьшением содержания фосфолипидов, но и ингибирующим действием жирных кислот, образующихся при гидролизе фосфолипидов фосфолипазами. [c.93]

На рис. 48 показаны УФ-индуцированные изменения функциональной активности На+, К -АТФазы эритроцитарных мембран, обработанных фосфолипазой В. После модификации фосфолипидов мембраны фоточувствительность связанного фермента суп] ественно изменяется. Воздействие УФ-света на обработанные фосфолипазой мембраны приводит к нарушениям в функционировании Ыа+, К+-АТФазы, отличаюш имся по направленности от таковых при облучении интактных мембран, т. е. происходит фотоактивация модифицированного фермента. Следовательно, обработка липидной фазы фосфолипазой нивелирует протекание процессов, обусловливаюгцих фотоинактивацию Ка , [c.171]

Обобш ая результаты вышеописанных исследований по изучению УФ-индуцированных изменений функциональной активности Na% К+-АТФазы и АХЭ эритроцитарных мембран, обработанных фосфолипазой D, можно заключить, что в присутствии последней проявляется различная фоточувствительность этих ферментов, обусловленная нарушениями их нативной конформации вследствие модификации белок-липидных взаимодействий, а также влияния фотохимических продуктов молекул мембранных фосфолипидов. [c.172]

В синаптосомах велико содержание жирных кислот — С 22 6, а в миелине высок процент моноеновых кислот — 18 1. Возможно, что высокое содержание докозагексаеновой кислоты в синаптосомах необходимо для активного транспорта ионов, так как активность На" ", К -АТФазы в них зависит от присутствия полиеновых кислот в фосфолипидах. В мозге имеются регуляторные механизмы, поддерживающие степень ненасыщенности и специфичность жирнокислотного состава в липидах. [c.99]

Тем не менее липиды абсолютно необходимы для проявления ферментативной активности Са-АТФазы, Обработка мембран саркоплазматического ретикулума фосфолипазами и последующее удаление продуктов расщепления фосфолипидов приводят к подавлению АТФазы при внесении экзогенных липидов активность фермента восстанавливается (А. Martonosi el al,, 1968). [c.55]

Для выяснения специфичности фосфолипидов в поддержании АТФазной активности был использован метод замещения эндогенных липидных компонентов саркоплазматического ретикулума в ходе центрифугирования обработанных детергентом везикул в градиенте плотности сахарозы (G, В. Warren et al,, 1974), Ответ был однозначным фосфолипидное окружение АТФазы не оказывает специфического воздействия на АТФ-гидролитическую функцию. Для сохранения активности фермента требуется лишь, чтобы с ним было ассоциировано не менее 30 молекул фосфолипидов. Более того, почти все эти фосфолипидные молекулы без ущерба для функции могут быть замещены неионным детергентом (W. Dean, С, Tanford, 1977). [c.55]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология