Электрофорез в влияние буферной силы

НОМ порошке, порошке поливинилхлорида и т. д., и главным образом на целлюлозе. Электрофоретический метод разделения имеет особое значение для разделения коллоидов и аминокислот, так как заряд частиц этих соединений зависит от значения pH среды. Поэтому значение pH раствора (изо-электрическая точка) оказывает большое влияние на направление движения ионов в растворе. Процесс электрофореза проводят часто в присутствии буферных растворов. Согласно уравнению (7.1.29), состав раствора оказывает большое влияние на скорость движения частиц в растворе. Движению частиц в электрическом поле препятствует явление диффузии. Влияние диффузии обратно пропорционально размерам частиц и силе поля. Для разделения ионов больших размеров можно применять электрофорез при низком напряжении, для разделения частиц небольших размеров следует работать при более высоких напряжениях. Электрофорез на носителе по технике выполнения проще, чем обычный электрофорез. При этом вещества в соответствии со скоростями их движения в электрическом поле фракционно осаждаются на носителе. Используя сорбционное действие носителя, можно замедлить движение частиц, что приведет к расширению зон фракционирования. Под действием выделяемого током тепла, особенно при работе с высокими напряжениями, происходит испарение растворителя, что затрудняет процесс разделения. Важным фактором является удаление перед разделением больших количеств электролитов, например, в процессе диализа. [c.387]

Метод капиллярного электрофореза также используется в /х-СПА-устройствах. Проба и буферный раствор вводятся в капилляр. При создании разности потенциалов на концах капилляра наблюдается протекание двух процессов. Первый, называемый электрофоретическим разделением, представляет собой движение положительно или отрицательно заряженных индивидуальных ионов в жидкости под влиянием приложенного поля. Второй процесс называется электро-осмотическим переносом и приводит к движению всей жидкости в капилляре. Реализация этого процесса обусловлена существованием двойного электрического слоя (слоя Гельмгольца) вблизи стенок капилляра. Этот слой образован неподвижными отрицательными зарядами на стенках капилляра (ионизированные силанольные группы) и положительно заряженными ионами из жидкости, которые притягиваются отрицательными зарядами. Если вектор напряженности электрического поля направлен вдоль капилляра, то электростатические силы приводят в движение слой подвижных положительно заряженных ионов. В конечном счете, благодаря молекулярному взаимодействию между слоями жидкости (вязкость жидкости), вся жидкость в капилляре приходит в движение. [c.646]

Необходимым условием разделения белков является их растворимость в используемом буферном растворе. Этим обстоятельством часто пренебрегают, и во многих случаях в результате анализируется только растворимая часть образца. Поскольку растворимость многих белков зависит от pH и ионной силы, ее характеристика особенно важна, если белковую смесь хроматографируют в градиенте pH или ионной силы. Особенно наглядно влияние растворимости прослеживается при проведении электрофореза в полиакриламидном геле агрегированный материал не может войти в гель и остается на старте. [c.105]

Аппараты для высоковольтного электрофореза, относящиеся к другой группе, устроены таким образом, что фильтровальная бумага погружена в охлаждающую жидкость, не смешивающуюся с водой тепло, воспринятое этой жидкостью, поглощается затем в системе водяным охлаждением. В таких аппаратах бумага помещается вертикально между двумя ваннами, содержащими буферный раствор. В связи с вертикальной укладкой бумаги важно правильно выбрать полярность электродов. Из-за электроэндоосмоса происходит перемещение буферного раствора от анода к катоду. Если, например, отрицательный полюс источника тока соединить с верхней ванной, то специфическое образование хвостов при электрофорезе, вызванное электроэндоосмотическим потоком снизу вверх,, будет полностью компенсировано неспецифическим образованием хвостов , обусловленным движением буферного раствора сверху вниз под влиянием силы тяжести. [c.114]

Условия электрофореза напряжение 850—700 в, сила тока 8—12 ма, время фракционирования 5—6 ч. После прекращения подачи разделяемой смеси и снятия напряжения протекание буферного раствора по бумаге не прекращалось, в течение суток производили вымывание фракций, сдвинутых под влиянием электрического поля. Как и при хроматографическом разделении, для характеристики фракций применяли спектрофотометрический метод анализа. Результаты псследовачий приведены на рис. 23, е. Они описываются семейством монотонно убывающих кривых приведенных оптических плотностей с удалением пробы от вертикальной линии ввода исследуемой смеси они приближаются к абсциссе в длинноволновой области спектра. Крутизна спада спектральных кривых поглощения света, определяемая величиной отношения 48о/ 56о, для отдельных фракций следующая проба V — 3,2 проба VII — 3,4 проба X — 6,0. Таким образом, отклонение движения потока жидкости от вертикального при электрофорезе увеличивается с переходом от гуминовых кислот к фульвокислотам в связи с большей подвижностью последних в электрическом поле постоянного тока. [c.61]