Ингибирование чисто неконкурентное

Фиг. 12. Неконкурентное и смешанное ингибирование, /—чисто неконкурентное ингибирование Л1 —смешанное ингибирование.

В частном случае, когда Кд1 — Кдз (т. е. когда связывание А ферментом совершенно не влияет на связывание Р — чистое неконкурентное ингибирование), уравнение принимает вид [c.81]

Очевидно, что для каждой из областей pH в отдельности приведенный выше кинетический анализ полностью аналогичен исследованию неконкурентного действия модификатора. Следует также заметить, что чисто неконкурентное влияние pH, как и чисто неконкурентное ингибирование вообще, наблюдается сравнительно редко, проявляясь лишь в условиях равновесного образования фермент-субстратного комплекса Более того, в условиях, подобных тем, при которых в общем случае проявляется конкурентный эффект модификатора (диссоциация протона только свободного фермента или только свободного субстрата), рН-эффекты будут [c.89]

Гораздо более важным классом ингибиторов является класс обратимых ингибиторов. Эти ингибиторы образуют с ферментом динамические комплексы, которые отличаются по своим каталитическим свойствам от свободного фермента. Фермент в присутствии ингибитора может характеризоваться более высоким значением Кк конкурентное ингибирование), более низким значением Г чистое неконкурентное ингибирование), значениями V и Кщ, уменьшенными в одинаковой степени бесконкурентное ингибирование), или определенной комбинацией этих эффектов смешанное ингибирование). [c.78]

Ввиду того что неконкурентное ингибирование встречается очень редко, некоторые энзимологи трактуют термин неконкурентное ингибирование более широко, включая в него случай смешанного ингибирования. Подобное нововведение не дает никаких преимуществ и является весьма неудачным, поскольку вносит еще большую неопределенность в и без того запутанную ситуацию. Для того чтобы избежать этой неопределенности, в тех редких случаях, когда хотят отметить, что имеет место именно неконкурентное ингибирование, приходится называть его чисто неконкурентным. [c.83]

Следует отметить, что уравнение (4.13) выведено для равновесных условий при отсутствии в системе субстрата. Если в реакционную смесь внесен субстрат, то кинетические соотношения становятся гораздо более сложными, поскольку для всех типов ингибирования (за исключением чистого неконкурентного ингибирования) добавление субстрата приводит к смещению равновесия между свободным и связанным ингибиторами. В том случае, когда связывание субстрата происходит очень быстро, единственно возможный подход к выяснению механизма действия ингибитора состоит в отыскании полного решения сложных уравнений, описывающих конкурентное ингибирование в области В. К счастью, по крайней мере для некоторых ингибиторов, обладающих высоким сродством к ферменту, высвобождение ингибитора из комплекса EI происходит настолько медленно, что смещением равновесия Е -Ь I EI под действием субстрата можно пренебречь. Например, Майерсу [117] удалось описать ингибирование псевдо-холинэстеразы мощным конкурентным ингибитором Nu 683 при помощи уравнения (4.13). Таким образом, низкая скорость взаимодействия фермента с ингибитором привела фактически к тому, чтр торможение реакции приобрело характер неконкурентного ингибирования. Рассматривая только случай 50 %-ного ингибирования (а = 0,5), Майерс преобразовал уравнение (4.13) к очень простому виду [c.101]

Полученное уравнение отличается от уравнения (8.8) только тем, что оно содержит член 8 —8) /2Кр, который становится бесконечно малым при Кр ->- оо. Случаи чистого неконкурентного или бесконкурентного ингибирования можно получить, если подставить в уравн№ие Кр- оо или Кр = Кр соответственно. [c.206]

Этот случай обычно отличают от ингибирования и называют его инактивацией . На практике, однако, этому различию не всегда придают значение, и это весьма прискорбно, так как внешне кинетическое поведение в этом случае ничем не отличается от случая чистого неконкурентного ингибирования, которое имеет совершенно иные причины Ч Особенно важно, что в случае. необратимого ингибирования ничего нельзя сказать относительно места связывания ингибитора в молекуле фермента это место может совпадать и может не совпадать с местом связывания субстрата. Все эти сообра- [c.71]

В заключение следует подчеркнуть,, что эти уравнения выведены в предположении, согласно которому реакции распада комплексов (ЕА) и (ЕАР) протекают сравнительно медленно, так что они заметным образом не влияют на равновесие между свободной и связанной формами фермента, участвующими в реакции. Полный анализ этого вида неконкурентного ингибирования методами стационарной кинетики дает столь сложные уравнения, что пользоваться ими практически невозможно. Моралес [П], однако, показал, что выведенные здесь уравнения (уравнения для чисто неконкурентного ингибирования) строго применимы только для равновесных условий. Точное соответствие опытных данных выведенным уравнениям можно даже рассматривать как признак того, что равновесные условия действительно достигнуты. Единственным случаем типичного неконкурентного ингибирования иного рода является блокирование одного из альтернативных путей реакции, ведущего к образованию (ЕАР) [c.86]

Простейший тип рН-зависимости скорости ферментативной реакции, наблюдаемый в том случае, когда в процессе ионизации участвует единственная кислая или основная группа, не отличается от общего случая гиперболического ингибирования иди активации, рассмотренного в гл. 4. С формальной точки зрения прохонирование основной группы фермента представляет собой просто частный случай связывания модификатора на особом центре, и поэтому приводить снова алгебраические выкладки для этого простейшего случая нет необходимости. Однако между протонами и другими модификаторами существуют определенные различия, вследствие чего протоны целесообразно рассматривать отдельно от модификаторов другого типа. Прежде всего активность практически всех ферментов зависит от концентрации протонов, и поэтому протон является гораздо более важным модификатором, чем любой другой модификатор. По своим размерам протон гораздо меньше всех химических соединений, и для него отсутствуют стерические ограничения. Это приводит к тому, что многие кинетические явления, невозможные для других модификаторов, для протона распространены весьма широко (например, чистое неконкурентное ингибирование). Концентрация протонов измеряется и контролируется в гораздо большем интервале, нежели при использовании любого другого модификатора, поэтому можно ожидать, что удастся зарегистрировать все вызываемые ими эффекты. Наконец, протоны обычно связываются с многими центрами в молекуле фермента, и для всестороннего анализа -рН-зависимости скорости ферментативной реакции рассмотреть связывание протона только с одним центром, как правило, недостаточно. [c.143]

Различают два больших класса ингибиторов ферментативной активности—конкурентные и неконкурентные—на основании того, ослабляется (конкурентное ингибирование) или не ослабляется (неконкурентное ингибирование) их ингибирующее действие при повышении концентрации субстрата. На практике многие ингибиторы не проявляют тех свойств, которые характерны для чисто конкурентного или чисто неконкурентного ингибирования. Другой способ классификации ингибиторов основывается на характере места их связывания. Одни из них связываются с ферментом в том же месте, что и субстрат (в каталитическом центре), а другие—на значительном расстоянии от активного центра (в ал-лостерическом центре). [c.88]

Возможны и другие механизмы односубстратных-однопродуктных реакций, но для иллюстрации достаточно обсудить два из них, приведенные выше. Отметим, что схема 1 в отличие от схемы 2 содержит стадию изомеризации фермента. Поэтому эти два механизма можно легко разграничить в опытах по ингибированию продуктом если выполняется схема 1, то РО и СР должны быть смешанными ингибиторами если выполняется схема 2, то РО и ОР — зто конкурентные по отношению друг к другу ингибиторы. В соответствии с этим Рэй и Росцелли [127], изучив реакцию, катализируемую фосфоглюкомутазой из скелетных мьшщ кролика, нашли, что ингибирование обоими фосфатами глюкозы носит чисто конкурентный характер, без всякой примеси неконкурентной составляющей. Они пришли к заключению, что в данном случае стадия изомеризации либо отсутствует, либо протекает так быстро, что формы Е и Е можно рассматривать как единую форму. Тем не менее Бриттон и Кларк [211, проведя серию элегантных экспериментов (см. ниже), сумели однозначно показать, что для этого фермента выполняется схема 1. [c.139]

Попытки описать кинетику аллостерического ингибирования как конкурентную или неконкурентную по отношению к субстрату основаны на чисто механической аналогии, которая может ввесги в заблуждение. Поэтому мы будем говорить о двух классах регуляторных ферментов—ферментах К-ряда и ферментах У-ряда. Насыщение субстратом аллостерических ферментов К-ряда выглядит как конкурентный процесс в том смысле, что увеличивается (уменьшается сродство к субстрату), и при этом значение никак не изменяется. В случае аллостерических ферментов У-ряда уменьшается Кпах (снижается каталитическая эффективность), но кажущееся значение остается неизменным. Изменения или по всей вероятности, обусловлены конформационными изменениями в каталитическом центре, вызванными связыванием аллостерического ингибитора в аллостерическом центре. В аллостерических ферментах К-ряда эти конформационные изменения приводят к ослаблению связи между субстратом и субстратсвязывающими остатками. В аллостерических ферментах У-ряда основной эффект заключается в изменении ориентации каталитических остатков, что приводит к понижению Однако могут наблюдаться и промежуточные случаи, когда конформационные изменения сказываются и на и на У . [c.108]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология