Протеины хроматографическое разделение

В последнее время разработаны очень точные методы хроматографического разделения, позволяющие получать все аминокислоты с выходом, составляющим 99% их общего содержания в белке. Кроме них в составе протеинов могут быть в определенных количествах другие вещества углеводы, липиды, металлы, фосфорная кислота и иные соединения. Целый ряд (еще не менее 20) редко встречающихся аминокислот был обнаружен в различных протеинах в разное время. [c.23]

Применение в хроматографии. В последние годы, с развитием методов хроматографического разделения веществ, предложено использовать различные полимеры, в том числе поливинилпирролидон как вспомогательный материал. Описано применение его в бумажной хроматографии при определении лекарственных веществ, в газохроматографических колонках для анализа стероидов и некоторых других полифункциональных соединений, для фракционирования смесей протеинов [87, 88]. [c.144]

В особенности же ценные результаты хроматографический анализ дает в отношении разделения сложных органических смесей (например, протеинов, углеводородов нефтяных фракций) и разделения близких по свойствам ионов (например, редкоземельных металлов). [c.370]

Применение хроматографических методов (бумажная, тонкослойная, газожидкостная и жидкостная хроматография высокого давления), отличающихся высокой эффективностью разделения и надежностью идентификации, как и в других областях структурного анализа, например протеинов, полисахаридов и липидов [1], обычно дает очень хорошие результаты. Хроматографические методы определения продуктов химической деструкции красителей позволяют иметь дело с микро- или даже ультрамикроколичествами анализируемых соединений и значительно упрощают и ускоряют всю экспериментальную работу. Успешный результат анализа зависит от следующих факторов. [c.295]

Ситовый эффект с успехом применялся для отделения неорганических коллоидов [98], высокомолекулярных анионов [7] и протеинов [88] от ионов с низким молекулярным весом. При таких разделениях иногда возникают осложнения, связанные с поверхностной адсорбциех . Если, однако, применяется слой ионита, состоящий из не слишком мелких зерен, то значение этого фактора ничтожно мало [108]. В тех случаях, когда происходит поверхностная адсорбция, адсорбированное вещество может удерживаться ионитом весьма прочно. Этот факт следует учитывать при некоторых хроматографических разделениях [93]. [c.39]

Адсорбция на поверхности зерен ионита некоторых высокомолекулярных веществ, например протеинов, может быть использована для целей хроматографического разделения. Чтобы увеличить поверхностную адсорбцию, следует применять ионит в тонко измельченном виде. Наилучшие результаты, достигнутые в экспериментах с товарными ионитами, получены на слабоосновном катионите марки амберлит ШС-50. Целый ряд ионообменных сорбентов для протеинов может быть получен из целлюлозы [117]. Эти сорбенты имеют большую емкость. Иониты с такими же свойствами получены путем покрытия смолой частиц инфузорной земли (целит 545). Бордман [8] описал получение катионита с карбоксильными группами (стирол—дивинилбензол — метакриловая кислота) и сульфированного стирол-дивинилбензольного катионита, относящихся к тому н<е типу. На основании тех же принципов могут быть получены и анионообменные смолы. [c.41]

Например, длительность хроматографического разделения 18 аминокислот, обычно присутствующих в протеинах, при использовании дьухколоночной системы с катионообменной смолой дауэкс 50 и градиентного элюирования с цитратным буфером была [c.232]

Иониты применяются для хроматографического разделения и очистки многих биологически активных протеинов. Однако для получения протеинов плазмы разработано только два основных способа, в которых разделение или очистка более или менее связаны с ионообменом и доведены до близкой к производству стадии. По методу Кона разделение протеинов ведется осаждением или экстракцией растворами ионов тяжелых металлов иониты применяются во вторичном цикле для удаления или замены ионов или адсорбции некоторых протеинов. По методу Рейда и Джонса [70] на ионитах осуществляется разделение групп протеинов, которые в дальнейшем выделяются или очищаются химическим способом. Иониты не являются существенным элементом, но могут быть использованы при работе по методу Кона, в котором осаждение тяжелыми металлами проводится в этаноловом растворителе. Гордон с сотрудниками [25] скомбинировали основные детали методов для успешного получения очищенного альбумина сыворотки человека из плардентарной ткани. [c.606]

Удаление органических сенсибилизаторов в результате осаждения спиртом было подтверждено выпариванием спиртовых растворов. В случае аллилизотиоцианата эти растворы сначала подогревали в присутх твии аммиака для превращения летучего аллильного производного в тиозинамин. Сконцентрированный спиртовый экстракт добавляли к эмульсии, химическое созревание которой показало, что значительная часть каждого из сенсибилизаторов оставалась в растворе при осаждении спиртом. Попытки хроматографического разделения этих экстрактов были безуспешны вследствие присутствия протеина, который отличался от протеина, экстрагируемого холодной водой, более высоким молекулярным весом. [c.130]

Предложен ряд схем для автоматического полярографического контроля процессов хроматографического разделения смесей определения протеина (Л. 53], ди-нитрофениламинокислот (Л. 54] и а-аминокислот [Л. 55] в элюатах. В последнем случае концентратомером производится довольно сложная автоматическая подготовка пробы к анализу. Вытекающий из хроматографической колонки раствор нейтрализуется, буферируется и пропускается через трубку, заполненную порошком фосфата меди. Аминокислоты вытесняют из фосфатов пропорциональное количество меди и образуют с нею комплексное соединение. Далее аминокислоты комплекса замещаются ЭДТА, раствор освобождается от кислорода, и в нем производится непрерывное полярографическое измерение концентрации меди. [c.31]

Разновидностью хроматографического метода разделения веществ с помощью колонки, заполненной твердофазным наполнителем, является так называемая гельхроматография, в основу которой положен принцип молекулярного сита. Твердое вещество представляет собой органический полимер, который под действием растворителя набухает. При этом в его структуре появляются поры определенного размера, которые пропускают растворитель или растворенные в нем ионы либо молекулы с небольшим радиусом, но задерживают крупные молекулы, размер которых превышает радиус пор. Этот метод успешно используют для отделения, например, неорганических солей от больших органических молекул, таких, как протеины, гормоны, полисахариды, нуклеиновые кислоты и т. д. [c.416]

Целлюлозными ионитами называют такие производные целлюлозы, которые содержат кислые или основные функциональные группы, нерастворимы и ограниченно набухают в водных растворах кислот и щелочей. В 1956 г. они были предложены Петерсоном и Собером [1] как сорбенты для разделения белков хроматографическим методом. С тех пор целлюлозные иониты нашли широкое применение для хроматографии не только белков, по и высших полипептидов, нуклеиновых кислот, олигонуклеотидов, пуклео-протеинов и других природных высокомолекулярных соединений. [c.206]

Большое внимание уделялось адсорбции и разделению аминокислот на ионитах. Типовые операции при этом следующие а) разделение аминокислот на группы, соот ветствующие основным, нейтральным и дикарбоксильным аминокислотам 6) хроматографическое выделелие отдельных аминокислот в) отделение смесей требуемых аминокислот от гидролизатов протеина. [c.596]