Плазмиды совместимые

Несовместимость. Многие бактерии содержат плазмиды различной величины. Сосуществование разных плазмид в одной бактериальной клетке говорит о том, что такие плазмиды совместимы между собой. Однако две родственные плазмиды не могут сосуществовать в одной клетке-они несовместимы. Все плазмиды подразделяются на группы несовместимости плазмиды, относящиеся к одной и той же группе, несовместимы друг с другом. [c.464]

ГРУППА СОВМЕСТИМОСТИ. Плазмиды, которые не могут существовать в одной и той же бактериальной клетке. [c.521]

И, наконец, в завершение этого раздела, необходимо вспомнить о совместимости разных плазмид в бактериальных клетках. Различные близкородственные плазмиды, как правило, не могут длительное время сосуществовать друг с другом в клетках потомства исходной их содержащей бактериальной клетки [100]. В результате после некоторого количества клеточных делений в дочерних клетках остается только один вид плазмид из нескольких первоначально в них присутствующих. Это свойство плазмид называется несовместимостью. Считается, что две плазмиды относятся к разным группам несовместимости, если они способны стабильно сосуществовать в одной бактериальной клетке. Причина несовместимости близкородственных плазмид в бактериальных клетках проста все они обладают одним и тем же или очень похожим механизмом контроля числа их копий. Если репрессор одной плазмиды будет подавлять репликацию другой и наоборот, решение о том, какая плазмида будет реплицироваться в данное время, будет приниматься случайно, что с большой вероятностью будет приводить к изменению их соотношения. В том случае, если это соотношение изменится, например, до 3 1, а сами плазмиды окажутся неразличимыми по поведению при сегрегации в дочерние клетки, они будут утрачиваться случайным образом, независимо друг от друга, и одна из плазмид может быть полностью потеряна во время следующего клеточного [c.71]

Принцип действия клеточного дисплея заключается в экспрессии на поверхности клеток гетерологичных белков (белков-пассажиров), которые отсутствуют у данного организма, объединенных в составе гибридной молекулы с помощью пептидного спейсера с полипептидной цепью белка-носителя, обеспечивающего заякоривание всей конструкции в мембране клеток. При этом используют гибридные белки трех типов, в которых белок-пассажир находится на N-конце, С-конце или во внутренней части белка-носителя в виде сэндвича. Для успешного выполнения своих функций белки-носители должны отвечать, по крайней мере, четырем требованиям 1) обладать эффективной сигнальной или транспортной последовательностью, обеспечивающей прохождение гибридного белка через внутренние мембраны клеток 2) проявлять сильные якорные свойства для прочного удерживания белка-пассажира на поверхности клеток 3) должны быть совместимыми с белками-пассажирами, т.е. не дестабилизироваться после объединения с ними 4) демонстрировать устойчивость к протеолитическим ферментам, присутствующим в периплазматическом пространстве или культуральной жидкости. В качестве векторов для генов гибридных белков используют экспрессирующие плазмиды или хромосомы вирусов. [c.350]

Примеры векторных систем, имеющих трАнс-действующие игг-гены, представлены в табл. 1.2. Эти бинарные векторы варьируют по размерам, стабильности репликации в агробактериях, наличию рестрикционных сайтов для встраивания чужеродной ДНК, возможности использования X-GAL для скрининга рекомбинантных плазмид путем а-комплементации, наличию маркерных генов для селекции трансформированных растений и селекции трансконъюгантов. Известно, что большинство этих плазмид совместимо с различными игг-плазмидами-помощниками А. tumefa iens, а многие совместимы и с Ri-плaзмидaмlи. [c.26]

Транскрипт РНК I может блокировать репликацию ряда родственных мультикопийных плазмид, обусловливая их несовместимость с плазмидой olEl. Отметим здесь, что механизм несовместимости плазмид, осуществляемый с помощью антисмысловьгх РНК, очень гибок. В принципе достаточно изменения у входящей плазмиды одного нуклеотида в области образования дуплекса РНК I— РНК II, чтобы воспрепятствовать его образованию и сделать, таким образом, плазмиды совместимыми. [c.87]

Группа совместимости ( ompatibility group) Группа плазмид, члены которой не способны сосуществовать в одной бактериальной клетке. [c.547]

Механизм регуляции числа копий плазмид одного типа в бактериальной клетке. Обеспечивает невозможность внутриклеточного сосутдествования плазмид, принадлежащих к одной группе совместимости. [c.556]

Несовместимость имеет отношение к регуляции числа копий плазмид. Группы совместимости определяются как группы плазмид, члены которых не способны сосуществовать в одной и той же клетке бактерии. Присутствие плазмиды, относящейся к одной группе совместимости, не влияет на выживаемость плазмиды, принадлежащей к другой группе. Таким образом, только один репликон данной группы совместимости может быть сохранен в бактериальной клетке, но он не взаимодействует с ре-пликонами других групп (хотя в неблагоприятных условиях они могут конкурировать за жизненное пространство ). [c.406]

Модель негативного контроля плазмидной несовместимости основывается на предположении, что контроль числа копий достигается путем синтеза репрессора, определяющего число точек начала репликации. (Формально она не отличается от модели титрования , предложенной для объяснения регуляции репликации бактериальной хромосомы.) Введение новой точки начала репликации в составе плазмиды той же группы совместимости имитирует результат репликации резидентной плазмиды теперь присутствуют две точки начала репликации. В результате любая дальнейшая репликация предотвращается до тех пор, пока две плазмиды не разойдутся в разные клетки и таким образом не будет восстановлено точное дорепликационное число их копий. [c.406]

По молекулярной массе и числу копий в клетке плазмиды можно разделить на две группы крупные, как правило, трансмиссивные плазмиды с молекулярной массой (30-100) 10 число копий в клетке небольшое (по 1-2 на хромосому) мелкие нетрансмиссивные плазмиды с молекулярной массой (1-10) 10, число копий в клетке 10-15 и более на хромосому. Существует классификация по несовместимости. Совместимые плазмиды могут существовать одновременно в одной и той же клетке, несовместимые неспособны сосуществовать в одной и той же бактериальной клетке. [c.343]

Некоторые плазмидЫ не способны стабильно сосуществовать в одной и той же клетке, т. е. они несовместимы. Изучение несовместимости плазмид разного происхождения привело к распределению их на группы несовместимости — 1пс-группы (от английского in ompatibility — несовместимость). К одной группе несовместимости обычно относят плазмиды, которые несовместимы между собой, но совместимы с любой плазмидой из других групп (N. Datta, 1979). Плазмиды, относящиеся к одной In -группе, обладают, как правило, многими сходными признаками и часто обнаруживают значительную гомологию ДНК- [c.87]

Разрабатывая системы конъюгационного переноса на основе плазмид с широким кругом хозяев, следует учитывать возможные барьеры, которые препятствуют конъюгации. Клетки некоторых штаммов, особенно неродственных видов, могут быть не способными вступать в контакт. Иногда не определены оптимальные условия для скрещиваний. Попав в клетку-реципиент, донорная ДНК может стать мишенью для ферментов рестрикции. Чужеродные плазмиды должны либо использовать систему репликации реиипиентной клетки, либо обладать собственной системой репликации. Они не должны нарушать клеточные процессы реципиента и быть совместимыми с уже существующими плазмидами. [c.93]

Тест на совместимость позволяет разделять плазмиды на группы несовместимости (табл. 3.1). У Е. соИ их насчитывается более 30. Плазмиды, входящие в одну группу, несовместимы, т. е. исключают друг друга. Несовместимыми могут быть и плазмиды с разным фенотипическим проявлением. Например, в группу F1 входят плазмиды типа F (половой фактор). ol (колициногенность) и R (устойчивость к антибиотикам). [c.69]

Дело в том, что если в реципиентной клетке уже имеется конъю-гативная плазмида, то при конъюгации с ней другая плазмидная ДНК проходит через клеточную оболочку с трудом. Частота переноса плазмид при этом падает в 10—100 раз по сравнению с таковой в бесплазмидные клетки. Плазмиды, преодолевшие этот барьер, стабильно сосуществуют с плазмидой-резидентом, если они, конечно, совместимы. [c.70]

Одним из результатов тестирования ARS-активности дериватов рг8а в трансформированных дрожжах является установление совместимости процессов автономной репликации и транскрипции гена селективного маркера автономных трансгенов, сконструированных на базе этой плазмиды. Ранее такие же данные были получены для невирусного автономного трансгепа клеток человека pNeo.My -2.4. В обоих случаях рассматриваемые конструкции представляют собой класс стабильных автономных трансгенов, которые являются прототипами перспективных конструкций для широкого спектра задач генной терапии. [c.239]

Pu . 3.5. Парная система экспрессии РНК-полимераза фага Т7 - поздний промотор 10 фага Т7. Генетические элементы фага Т7 находятся в двух репликонах на основе совместимых плазмид Р15А и olEl [c.147]

В основе молекулярного клонирования лежит встраивание нужного фрагмента ДНК (вставки) в другую молекулу ДНК (вектор), которая способна реплицироваться в соответствующей клетке-хозяине (см. рис. 11.12). Такое встраивание осуществляется in vitro, а затем образовавшиеся рекомбинантные молекулы ДНК вводятся в клетки. Векторая молекула должна содержать точку начала репликации (ori). Кроме того, для репликации нужны специфические ферменты и другие белки их поставляет клетка-хозяин или они кодируются самим вектором. Вектором может быть любой небольшой внехромосом-ный элемент (например, плазмида, ДНК фага или вируса). Каждый из этих элементов встречается в природе в клетках определенных видов, и большинство из них реплицируется только в природном хозяине или клетках близкородственных видов. В большинстве случаев эволюция механизма репликации протекала в направлении создания оптимальных условий для существования в клетках природного хозяина внехромосомных генетических элементов, при этом использовались метаболиты, ферменты и другие белки клетки-хозяина, а также ее аппарат белкового синтеза. Поэтому основным инструментом молекулярного клонирования всегда является двухкомпонентная система—совместимая комбинация хозяина и вектора. [c.227]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология