Фильтровальная бумага как носитель для электрофореза

Фракционированием в ПААГ и агарозе не исчерпываются, современные методы электрофореза. В качестве носителей жидкой фазы широко используют также пленки из ацетата целлюлозы, фильтровальную бумагу, тонкие слои силикагеля, целлюлозы, сефадекса и др. В некоторых случаях, например для разделения низкомолекулярных веществ, эти системы имеют свои преимущества, однако для фракционирования белков, нуклеиновых кислот и их фрагментов в настоящее время используют почти исключительно гель-электрофорез, поэтому только он и будет подробно описан. [c.6]

Электрофорез проводят либо в свободной незакрепленной среде (в свободной жидкости) — фронтальный электрофорез, либо в закрепленной среде — зональный электрофорез — на крупнопористых носителях (фильтровальная бумага, целлюлоза, порошкообразная пластмасса, агар-агар, ацетилцеллюлоза, стеклянный порошок) или на мелкопористых носителях (силикагель, полиакриламидный гель, целлюлоза, оксид алюминия, крахмал и др.). [c.237]

Электрофорез с носителем практикуется чаще. В этом случае ионы мигрируют по бумажному носителю или по гелю, такому, как агар, полимер или силикагель. Носитель насыщен раствором буферного электролита и его концы опущены в буферный раствор с электродами (рис.5.5-1,б). К фильтровальной бумаге, пропитанной раствором электролита, прикладывается постоянное напряжение в несколько киловольт или больше. [c.303]

В качестве пористого носителя для зонного электрофореза используют различные вещества фильтровальную бумагу и картон, стеклянный порошок, кварцевый песок, крахмал, ацетилцеллюлозу, агар-агар и любой другой пористый материал, не проводящий электричество. Наибольшее распространение благодаря своей простоте получил зонный электрофорез на бумаге [7, 18—22]. [c.26]

При электрофорезе компоненты смеси ионов на твердом носителе (напрпмер, фильтровальная бумага или колонка с наполнителем, насыщенные проводящим буферным раствором) мигрируют с различными [c.380]

Эти два принципа сочетания электрофореза с хроматографией схематически изображены на рис. 487 и 488 (в качестве носителя служит фильтровальная бумага, подвешенная вертикально в хроматографических кюветах) (см. также рис. 426, стр. 458). [c.541]

Электрофорез. Компоненты смеси ионов на твердом носителе (например, фильтровальная бумага или колонка с наполнителем, насыгг енные проводяггщм буферным раствором) мигрируют с различ-ньгми скоростями и разделяются на зоны под действием постоянного или переменного электрического поля, прикладываемого к носителю. [c.54]

Более практичным и эф- Поп проницаеыые мембраны фективным оказался, однако, электрофорез с применением тех или иных опорных сред, так называемый зональный электрофорез, т. е. электрофорез в растворах, которыми пропитывается какой-либо твердый пористый или порошкообразный носитель — фильтровальная бумага, крахмал, целлюлоза, стеклянный порошок и др. Еще более эффективным, хотя и менее удобным для препаративных целей, оказалось электрофоретическое разделение в гелях — агар-агаровом, крахмальном, полиакриламидном. [c.31]

Фильтровальная бумага из-за ее пригодности для многих разделений и доступности остается наиболее популярной в качестве стабилизирующей среды, особенно для систем, в которых не требуется анализа большого количества компонентов. Если разрешающая сила является чрезвычайно важным фактором разделения смеси,то вместо бумаги используют полоски ацетилцеллюлозы, которая обладает большей проницаемостью для продвижения крупных молекул, например,протеинов. В качестве других пористых носителей буферного электролита были предложены картон, стеклянный порошок, кварцевый песок, ряд дающих лучшее разделение, чем бумага гелей (крахмал, агар-агар, акриламад, поливинилхлорид и др). Помимо этого для разделения небольших количеств смесей использовали тонкие пленки кизельгура, а также специальную асбестированную бумагу для электрохроматографии в расплавленных солях. Если объемы образца больше, чем те.которые могут быть нанесены на фильтровальную бумагу или тонкий слой другого носителя, можно применять колонки, заполненные тем или иным пористым материалом. Для препаративных разделений существуют различные мод икации установок непрерывного электрофореза,в которых используется ряд рассмотренных выше носителей. [c.163]

Практически более доступным и удобным является метод зонного электрофореза на пористом носителе, заключающийся в том, что на пористый носитель (фильтровальная бумага или тонкий слой любого порошка, не проводящего электричества) наносят смесь разделяемых веществ в виде небольшого пятна., и меаду концами создается электрическое поле. При этом заряженные частицы (ионы) будут шгрировать к соответствующему электроду, и если подвижности этих частиц неодинаковы при данных условиях, то смесь будет разделяться на зоны, соответствующие каждому сорту частиц. Полнота разделения, то есть расстояние между зонами индивидуальных веществ, зависит от различия подвижностей, длительности процесса и величины приложенного напряжения. Кроме того, на четкость разделения в большой мере влияет размытие зон раэ(рляемых ионов. Это размытие обусловлено диффузией, вызываемой градиентом концентрации в зоне данного иона и в объеме раствора, движением электролита вследствие конвективных потоков, электроосмоса, испарения жидкости за счет выделения джоулева тепла, вибрахдаи, толчков и т.д., а также адсорбцией разделяемых веществ на пористом наполнителе. [c.152]

Зонный электрофорез предполагает использование неподвижного носителя, по поверхности или через объем которого осуществляется миграция ионов. Носители могут применяться в виде полос (например, бумаги), колонок, дисков, тонких слоев и т. д. Для зонного электрофореза чаще всего используют фильтровальные бумаги (Ватман № 1 и № ЗММ), а также ацетат целлюлозы, гели агара, крахмала и полиакриламида 24, 25]. Электрофорез осуществляется под действием электрических полей низкого (<1000 В) и высокого (от 1000 до 10000 В) напряжения. При непрерывном электрофорезе (препаративный метод с использованием низкого напряжении) образец непрерывно подается на носитель (чаще всего бумага Ватман № ЗММ или Шлейхер-Шюлль 2230). Электрофорез с высоким напряжением электрического поля проводят, как правило, на бумаге этот метод дает хорошие результаты при анализе аминокислот и других небольших молекул и непригоден для анализа больших молекул. [c.403]

Нанесение образца. Раствор с образцом обычно наносят микропипеткой в виде маленького пятна иЛи узкой полосы. Если отдельные компоненты смеси имеют противоположные заряды, они в ходе разделения будут двигаться к разным электродам, и образец в этом случае нужно наносить примерно посередине. Если же все компоненты будут двигаться в одном направлении, т. е. если все они заряжены либо положительно, либо отрицательно, образец нужно наносить как можно дальше от соответствующего электрода, у противоположного конца носителя, чтобы разделяемые компоненты проходили возможно большее расстояние. При горизонтальном электрофорезе пропитанные образцом полоски фильтровальной бумаги вводят в щель или ямку, вырезанные на поверхности геля. При вертикальном электрофорезе образец в 10%-ном растворе сахарозы наслаивают на поверхность вертикального столбика геля. Изредка образец включают в широкопористый гель, называемый гелем образца. [c.125]

Непрерывный электрофорез представляет собой препаративный метод, заключающийся в одновременном перемещении непрерывно прибавляемого вещества в одном направлении потоком растворителя и в другом направлении — электрическим полем. В качестве носителя здесь часто используют фильтровальную бумагу однако можно проводить проточный электрофорез и без целлюлозного носителя. Схема метода показана на рис. 9.14. БольшоГ лист бумаги, расположенный, как показано на рисунке, помещают в камеру из плексигласа. Верхний край бумаги погружают в. резервуар с буфером, причем первоначально всю бумагу смачивают буфером. Пока резервуар полон, буфер непрерывно движется по бумаге вниз под действием капиллярных сил и капает с зубцов на нижнем крае в пробирки. Вдоль линии старта непрерывно прибавляется разделяемый раствор с помощью механического шприца или фитиля. Электрическое поле приводит к постоянному горизонтальному перемещению, степень которого зависит от [c.238]