Гели, агар

Известно много методов для иммобилизации клеток включение в различные гели, например, в полиакриламидный гель, агар, в мембраны из поливинилового спирта или фоточувствительных полимеров, в белковые мембраны, сшитые диальдегидом крахмала адсорбция на различных целлюлозах и крупнопористой керамике ковалентное связывание с активированным силикагелем. [c.166]

Гель-электрофорез. Электрофорез на геле и крахмале применяют для аналитических целей. Наиболее важным применением гель-электрофореза является иммуноэлектрофорез. Для этого вида анализа используют макропористые гели, в частности гели агара и агарозы. Метод иммуноэлектрофореза основан на том, что после разделения электрофорезом происходит диффузия разделенных веществ — антигенов — в направлении, перпендикулярном направлению электрофореза. Навстречу этим соединениям диффундируют антитела. При соединении антигенов и антител образуются характерные дуги осаждения. Метод иммуноэлектрофореза очень чувствителен при обнаружении антигенов, специфических для данных антител. В настоящее время применяют метод введения радиоактивной метки в антигены, благодаря чему радиоиммуноэлектрофорез является одним из самых чувствительных методов анализа биополимеров. [c.364]

Влияние температуры на кинетику гидролиза этилового эфира Г4-бензоил-Ь-аргиннна, катализируемого трипсином. Условия опыта 2%-ный гель агар-агара pH 5,4 ионная сила [c.256]

В таблице 9 приведена температурная зависимость каталитической константы гидролиза этилового эфира Ы-бензоил-Ь-аргинина, катализируемого трипсином, в 2%-ном геле агар-агара. Вычислить значения стандартных энтальпии и энтропии активации реакции. [c.255]

Поскольку вирусы во многом сходны с нуклеиновыми кислотами, мы приведем здесь лишь несколько примеров их очистки или фракционирования. Вирусные частицы легко отделить от различных низкомолекулярных примесей [82, 83], в том числе и от протами-на, который используют для осаждения, например, вируса полиомы. После растворения в крепком растворе поваренной соли вирус можно отделить от белка на сефадексе 0-75 [84] (см. также [77, 78]). Однако для разделения различных вирусов ввиду их значительных размеров необходим гель с максимальными размерами пор (см. гл. И). Для этого может служить гранулированный [85] или сферический [86, 87] гель агара, а также специальное пористое стекло [88]. Палочкообразные вирусы в таком случае распределяются [c.223]

Следует обратить внимание на то, что электролитная цепь в гальваническом элементе всегда должна быть замкнута. Это достигается с помощью изогнутой стеклянной трубки, которая заполнена гелем агар-агара или желатины, приготовленном в растворе K I. Этот столбик проницаем для ионов, движущихся в электрическом поле. [c.232]

Внутренний носитель представляет собой слой геля агара или крахмала подходящей консистенции толщиной 1—2 мм и имеет форму удлиненного прямоугольника. [c.118]

Для анализа и разделения смесей бромсодержащих ионов электрофоретические методы использовались в варианте БХ 15И, 575, 643] и ТСХ [168], а также своеобразной осадочной хроматографии на колонке, заполненной гелем агар-агара [433]. [c.69]

Осадочная хроматография. Описаны методы разделения на колонках, содержащих диметилглиоксим в смеси с активированным углем или другими адсорбентами [98, 249]. Эти методы пригодны для разделения никеля и кобальта, в частности при анализе солей кобальта, содержащих небольшие количества никеля. Оптимальная величина pH раствора для разделения никеля и кобальта составляет 5—6, причем при связывании кобальта в тартратный комплекс можно отделить никель от кобальта при соотношении, равном или меньшем чем 1 1000. При пропускании раствора солей никеля и кобальта с pH 5—6 кобальт проходит в фильтрат или легко вымывается водой, а никель остается в колонке. Предложены и другие методы отделения кобальта от ряда элементов на колонках, содержащих гель агар-агара, пропитанный растворами фосфата калия, арсенита натрия, тетрабората натрия, силиката натрия [551, 1076]. [c.82]

Плотные получаются путем прибавления к жидким средам таких веществ, как желатина или агар-агар. Желатина, изготовляемая вывариванием костей и хрящей, при добавлении к жидкости в количестве 10—15% образует гель, т. е. студень, с температурой плавления 25—27° и температурой застывания 18—20°. Более удобен и чаще употребляется агаровый гель. Агар-агар добывается из морских водорослей, добавляется к жидкой питательной среде в количестве 1,5—2%, гель имеет температуру плавления 90—100°, застывает при 40°. [c.164]

ГЕЛИ АГАРА И АГАРОЗЫ [c.37]

Эккере [33] применил этот принцип к гель-хроматографии и предложил для очень пористых гелей механизм ограниченной диффузии. (В отличие от других типов геля для сефадекса 0-200 коэффициент распределения между фазой геля и элюентом в равновесном состоянии значительно отличался от значения Кв., определенного на колонке.) Согласно новому принципу, объемы выхода макромолекул (белков) с гранулированного геля агара или сефадекса 0-200 определяются скоростью их диффузии в фазу геля. Вследствие медленной диффузии крупные молекулы проникают в гель не столь глубоко, как мелкие, н поэтому вымываются с колонки гораздо раньше. Вновь применив уравнение Ренкина [32], Эккере связал величину /(( , характеризующую поведение макромолекул в геле, с величиной г Я, где г — радиус частиц белка [c.120]

На основании экспериментальных данных, полученных различными авторами при хроматографировании белков с известными радиусами (по Стоксу), по уравнению (12) были рассчитаны эффективные радиусы пор Я. Для различных гелей агара и сефадекса 0-200 удалось достигнуть удовлетворительного совпадения результатов, что свидетельствует в пользу предложенной теории. [c.121]

Фиг. 33. Разделение вируса полиомиелита и вируса гриппа (заштрихованные столбики) на гранулах 2,5%-ного геля агара [48].

Иммунодиффузию в агаре можно проводить по методу Хансона [14]. После гель-фильтрации на пластинках 10-20 см гель сефадекса удаляют механическим путем, оставляя только полоску шириной 3—5 см, содержащую разделяемые белки. Затем пластинку заливают расплавленным агаром (охлажденным до 50 °С), который при застывании образует гель толщиной 1 мм. При аккуратном выполнении этой операции агар покрывает полоску сефадекса, не нарушая слоя. Таким путем удается получить хорошие зоны преципитации, однако следует заметить, что эта методика требует большого экспериментального навыка. Иммунодиффузию в геле агара можно также выполнять после переноса белков на ацетилцеллюлозные мембраны [57] или полоски фильтровальной бумаги [13]. Полоски помещают на агаровый гель, где осуществляют иммунодиффузию. [c.271]

Измерение скорости электрофореза выполняли в специально сконструированной кювете, схема которой дана на рис. 12.1. Рабочую стеклянную кювету 1 в виде прямоугольного парал-лепипеда с открытыми торцами длиной 20 мм и поперечным сечением 20x0,8 мм помещали между двумя сосудами 2 также прямоугольного сечения, изготовленными из оргстекда. Толщина стенок измерительной ячейки составляла 0,2 мм, что обеспечивало надежную визуализацию микрообъектов при работе с темнопольным микроскопом. Боковые емкости 2 в месте их сочленения с кюветой имели ряд отверстий диаметром 0,5 мм эти емкости прочно закреплялись на основании 3, в котором было высверлено отверстие для вхождения темнопольного объектива 4. Б нижнюю часть емкостей 2 помещали гель агар-агара 5, приготовленный на 1 н. растворе КС1 сверху заливали 0,1 и. раствор USO4 (б) и помещали медные электроды 7. Такая установка удобна в обращении в ней обеспечена герметичность сочленения боковых емкостей с измерительной камерой и возможность тщательной очистки последней после проведения исследований. На основании данных о подвижности частиц дисперсной фазы вычисляли -потенциал по формуле Гельмгольца — Смолуховского без учета поправки на поверхностную проводимость [59]. [c.202]

Кинетика гидролиза этилового эфира Ы-ацетил-Ь-тиро-зина, катализируемого а-химотрипсином, иммобилизованным в геле агар-агара, изучалась согласно методике, описанной в предыдущей задаче. Концентрация фермента в геле равна 1-10- М, концентрация субстрата в растворе равна 1-10- м. Коэффициент диффузии субстрата в геле агар-агара в условиях опыта равен 2-10- см7оек. Найти, при какой толщине пластинки геля реакция будет полностью (с ошибкой не более 5%) контролироваться диффузией, если кинетика ферментативного гидролиза в гомогенном [c.274]

Гели обладают электрической проводимостью. И.ммобилизован-ный растворитель в геле образует, по существу, непрерывную среду, в которой более или менее свободно могут передвигаться ионы различных электролитов. На этом явлении основано применение гелей агар-агара, приготовленных на растворе КС1 для заполнения мостиков, с помощью которых соединяют отдельные электроды в гальваническую цепь. [c.395]

Электролитический ключ. Для создания электрического контакта между двумя полуэлементами гальванического элемента обычно применяют U-образную стеклянную трубку, заполненную либо гелием агар-агара, насынденным соответствующим электролитом, либо насыщенным раствором этого же электролита. Наиболее часто в качестве электролита применяется КС1, Выбор продиктован тем, что КС1 обеспечивает наименьший л<идкостный диффузионный [10тенциаЛ из-за почти оди-на-ковои подвижности и С1 -ионов, Однако при анализе растворов галогенидов во избежание диффузии СЬ-ионов из электролитического ключа в эти растворы следует K I заменить другим электролитом, не влияющим на электро.химические и химические процессы, например KNO3. Для того чтобы раствор электролита удержать в трубке, не-об.ходимо концы ее плотно Закрыть тампоном из фильтровальной бумаги, смоченной тем же раствором электролита. Электролитические ключи следует хранить в насыщенном растворе электролита, которым они заполнены, чтобы предотвратить высыхание ключей, а также появление в них пузырьков воздуха, препятствующих прохождению тока, [c.57]

Каждый электрод с окружающим его электролитом называют полуэлеменюм. Из приведенного выше следует, что полуэлементы могут иметь либо одинаковые электролиз, либо различные. В последнем случае электролиты могут удерживаться от смешения разделяющей их мембраной, которая не препятствует ионному обмену, т.е. протеканию тока. В некоторых случаях два полуэпемента могут соединяться с помощью жидкостного соединения ( , показанного на рис. 4. Жидкостное соединение может состоять из электролита, абсорбированного загустителем, например гелем агар-агара. [c.12]

Нек-рые линейные регулярные гомополисахариды (целлюлоза, хитин, маннаны) не раств. в воде из-за прочной межмол. ассоциации более сложные, особенно разветвл. П. (гликоген, декстраны), раств. в воде или склонны к образованию гелей (агар, альгиновые кислоты, пектины). Гидроксильные группы П. алкилируются, ацилируются, окисляются. Кислотный гидролиз приводит к полному или частичному расщеплению гликозидных связей и образованию моно- или олигосахарндов. [c.466]

Полисахариды - гидрофильные полимеры, мн. из них образуют высоковязкие водные р-ры (растит, слизи, гиалуроно-вая к-та ф-лу последней см. в ст. Мукополисахариды), а в ряде случаев (в результате своеобразной межмол. ассоциации) - прочные гели (агар, альгиновые кислоты, каррагинаны, пектины). Нек-рые полисахариды образуют высокоупорядоченные надмолекулярные структуры, препятствующие гидратации отдельных молекул такие псяисахариды (напр., хитин, целлюлоза) не раств. в воде. [c.23]

Прибор, использованный в работе [433], состоит из стеклянной трубки диаметром i см и длиной 30—80 см, заполненной гелем агар-агара, содержащим индифферентный электролит. В трубку с застывшим 1 %-ным гелем вводят 1 мл расплавленного геля с анализируемой смесью, охлаждают до температуры < 40° С. Один конец трубки погружают в чашку Петри с индифферентным электролитом, содержащим добавку соединения осаждающего иона (AgNO., при разделении смесей галогенид-ионов) с введенным в него платиновым анодом. Другой конец трубки, к которому примыкает слой геля с анализируемой смесью, с помощью шлифа соединен с изогнутой трубкой с индифферентным электролитом, опущенной в соседнюю чашку Петри с тем же элект ролитом и введенным в нее платиновым катодом. Таким образом, осадок образуется в процессе электромиграции, а разделение происходит за счет различия произведения растворимости галогенидов серебра и констант скорости реакций обмена ионов. Этим методом смеси СГ, Вг и хорошо разделяются. [c.69]

При определении бромид-иопов в отсутствие других галогенидов перспективным представляется применение стеклянного индикаторного электрода с Na-функцией в паре с обычным каломельным электродом с солевым мостиком из геля агар-агара, приготовленного на 0,1 М NH4NO3 [567]. [c.126]

После формирования осадка (/ -образная трубка соединяется резиновыми шлангами 6 с ка-пилляра.ми 3. Прибор посредством трубок 2, заполненных 3%-ным гелем агар-агара (приготовленным на фильтрате или 0,1 N растворе КС ) и опущенных в стаканчики 4 с раствором USO4, подсоединяется с помощью электродов 5 к источнику постоянного тока 8. [c.201]

Для уменьшения влияния на течение жидкости поверхностных сил в тонком капилляре на границе раздела жидкость — воздух иа капилляр одевается чашечка диаметром 30 мм, капилляр заполняется фильтратом. Скорость течения замеряется по вводимому в капилляр подкрашенному пузырьку изобутилового спирта. Поверхностное натяжение на границе раздела изобутиловый сиирт — зода значительно ниже (приблизительно в 70 раз), чем на границе вода — воздух, поэтому влиянием поверхностных сил можно пренебречь, так как можно пренебречь и поверхностными силами на границе вода — воздух в большой чашечке. Для подведения к осадку постоянного напряжения над и под осадком устанавливаются неполяризующиеся электроды II. Электроды представляют собой трубки, заполненные 3%-ным гелем агар-агара, содержащим электролит (3%-ный раствор хлористого калия или фильтрат) и опущенные в стаканчики 12 с раствором Си304. Через опущенные в раствор Си304 медные неполяризующиеся электроды прибор подсоединяется к источнику постоянного тока. Для замера силы тока в цепь включается миллиамперметр. [c.203]

В ТОМ же году с другим природным полимером, а именно с гелем агара, работал Полсон [51]. Он также отметил, что способность молекул белка проникать в гель зависит от размеров молекул и концентрации геля. Однако, поскольку у природных полисахаридов крахмала и агара обнаружились многие недостатки, их применение в качестве сред для разделения ограничилось двумя вышеприведенными случаями. [c.24]

Для белков или вирусов, радиус которых известен, установлено, что скорость их диффузии через мембраны из геля агара различной концентрации обычно ниже, чем скорость свободной диффузии в растворе. Совершенно произвольно гель можно рассматривать как совокупность ячеек цилиндрической формы диффузия молекул в эти поры происходит с трудом. В зависимости от относительных размеров молекул снижение скорости диффузии может быть обусловлено либо стерическими факторами, либо различного рода взаимодействиями с веществом геля. Для расчета эффективного радиуса пор по замедлению диффузии и радиусу рассматриваемых частиц Эккере и Штир [31] использовали уравнение Ренкина [32]. У гелей с различной плотностью радиусы пор, рассчитанные с помощью стандартов, хорошо согласовывались между собой следовательно, можно считать, что эта упрощенная модель геля близка к действительности. [c.120]

Использование водного НКЭ с неводными растворами зависит от образования стабильного и воспроизводимого диффузионного потенциала. Кольтгофф и Коци [240] описали свою систему следующим образом Стандартный солевой мост агар-агар — хлорид калия погружается в слегка расщиренную стеклянную трубку, снабженную мелкопористым стеклянным фильтром. В широкой трубке содержится лишь необходимое для электролитического контакта с гелем агар-агара количество фонового электролита ацетонитрила. Раствор внутри трубки с фильтром устанавливается на более- низком уровне, чем во внешнем сосуде (в котором находится исследуемый раствор), таким образом, чтобы давление противодействовало какому-либо нежелательному переносу воды или КС1 через фильтр. При использовании подобного устройства не происходит переноса ощутимого количества воды или КС1 в течение времени, необходимого для полного измерения полярограммы. При продолжительном погружении в ацетонитрил моста из агар-агара на кончике моста образуется затвор из твердого КС1, в результате чего сопротивление цепи значительно возрастает . [c.265]

В ЭТОМ случае ему удалось наблюдать колебания, когда концентрации соли в растворах по обе стороны мембраны были одинаковыми. Помещая один из двух электродов, предназначенных для измерения электропроводности, непосредственно в слой ионообменной смолы и изменяя положение этого электрода, Теорелл обнаружил, что при прохождении постоянного тока в мембране устанавливался градиент концентраций. Возникновение такого градиента вызвано различием в, числах переноса ионов в мембране и растворе, в результате которого у одной поверхности мембраны концентрация противоионов убывает, у другой — растет. Теорелл постулировал, что колебания и в этом случае происходят вследствие искажения концентрационного профиля, если поток объема значителен, или вследствие релаксации, если поток объема близок нулю. Хотя при исследовании слоя ионообменной смолы явления могут быть в некоторой степени осложнены, следует считать, что они определяются теми же физическими причинами, что ив случае обычных мембран. Форгакс [63] обнаружил также колебания электрического потенциала при прохождении постоянного тока через ионообменные (катионо- и аниопообменные) мембраны и через гель агар-агара. [c.504]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология