Электрофорез на бумаге

Методом электрофореза на бумаге можно не только исследовать состав смесей высокомолекулярных веществ, но и выделить отдельные компоненты. С этой целью полоску бумаги, не прогревая, разрезают на части и из них экстрагируют отдельные, уже разделенные компоненты. Теория этого метода, при котором существенную роль играют поверхностные и адсорбционные явления, еще мало разработана. [c.210]

Ледерер М. Введение в электрофорез на бумаге и родственные методы. Пер. с англ.— М. Химия, 1956. [c.160]

Хроматография — колоночная, тонкослойная, бумажная. Электрофорез на бумаге. Г ель-фильтрация [c.230]

Важное преимущество электрофореза на бумаге перед методом подвижной границы связано с возможностью полного разделения компонентов путем элюирования соответствующих зон. С помощью комбинирования сте-кания раствора по наклонной фильтровальной бумаге с электрофоретическим отклонением создан метод, позволяющий беспрепятственно разделять компоненты. [c.158]

Гидразиды аминокислот удаляют реакцией с бензальдегидом, изо-валериановым и другими альдегидами, а находящуюся в водной фазе С-концевую аминокислоту анализируют методами хроматографии или электрофореза на бумаге и в тонком слое или с помощью аминокислотного анализатора. Смесь, получаемую после гидразинолиза, можно обрабатывать динитрофторбензолом или дансилхлоридом. Это дает возможность идентифицировать С-концевые аминокислоты в виде ДНФ- (с. 145) или ДНС-производных (с. 148). [c.156]

НОСТЬ, то напряженность поля изменялась бы на границе скачком и, кроме того, изменялась бы во времени при перемещении границы. Такая неоднородность поля и зависимость его напряженности от времени, обычно не проявляющаяся или проявляющаяся в очень малой степени при электрофорезе, служат существенным препятствием для использования метода подвижной границы при ионофорезе. В тех случаях, когда этот метод может применяться к коллоидным системам, он оказывается очень выигрышным, так как позволяет не только измерить электрофоретическую подвижность, но и разделить путем электрофореза компоненты с разной подвижностью, определить их число и идентифицировать каждый из них. Все эти преимущества привели, с одной стороны, к появлению тщательно разработанного Тизелиусом (1930 г.) метода подвижной границы, а с другой — к широкому применению электрофореза на бумаге и в других средах. [c.156]

Работа 8. Разделение растворимых белков саркоплазмы методом электрофореза на бумаге [114] [c.127]

Электрокинетические явления находят практическое применение. Так, с помощью электрофореза проводят формование различных изделий из тонких взвесей с последующим их спеканием. Метод электрофореза щироко применяют для разделения, выделения и исследования биоколлоидов, особенно белков. Простой его вариант, называемый электрофорезом на бумаге, состоит в том, что нанесенное на полоску бумаги пятно исследуемой смеси белков разделяется на компоненты по величине их заряда, а следовательно, и скорости движения в поле постоянного электрического тока. Этим методом исследуют качественный и количественный состав белков крови и других биологических жидкостей. [c.308]

Для определения относительного содержания отдельных белков в саркоплазме используют метод электрофореза на бумаге. Разделение белков основано на различии в подвижности ионов белковых молекул в электрическом поле. Скорость перемещения молекул пропорциональна величине их свободного заряда. Величина заряда молекул различных белков саркоплазмы неодинакова, а поэтому и скорость их перемещения в электрическом поле тоже разная, что дает возможность разделить белки плазмы на несколько фракций. [c.127]

Работа 64. Разделение смеси алкалоидов методом электрофореза на бумаге [c.231]

МЕТОДОМ. ЭЛЕКТРОФОРЕЗА НА БУМАГЕ [c.147]

Рис. 25Л Схематический разрез камеры к прибору ЭФА-1 для электрофореза на бумаге

Белковые смеси анализируют электрофорезом на бумаге. Хроматографическую бумагу пропитывают буферным раствором, поддерживая тем самым необходимое значение pH. Наносят анализируемую смесь и создают электрическое напряжение. По истечении определенного времени (оно зависит от свойств разделяемых белков, носителя и приложенной разности потенциалов) проявляют электрофореграммы химическими и биохимическими методами. [c.216]

Электрофорез на бумаге. Прибор Тизелиуса очень сложен. В последнее время широкое распространение для исследования белков получил другой метод, предложенный также Тизелиусом, но осуществляемый проще. Это метод электрофореза на бумаге. [c.210]

Для разделения катионов методом электрофореза на бумаге необходимо, чтобы неорганические ионы имели различную подвижность в электрическом поле. Бумагу пропитывают электролитом НС1 и в центр ее помещают каплю анализируемого раствора. Бумагу закрепляют между двумя стеклянными пластинками, а концы ее опускают в кюветы с раствором электролита, в который опущены электроды, подключенные к источнику постоянного тока. Под действием электрического поля происходит перемещение катионов по бумаге с различными скоростями. Катионы, образующие хлоридные комплексные ионы (Сц2+, d +), перемещаются к аноду, а катионы, не образующие таких ионов (Hg2+, Bi +),— к катоду. [c.126]

Электрофорез применяют для очистки различных фармацевтических препаратов. В Фармакопее СССР (изд. 10) предусмотрено установление степени чистоты по электрофоретической однородности ряда антибиотиков, витаминов и других веществ. Электрофорез (ионофорез) является одним из методов введения лечебных препаратов в организм человека. Широкое применение как аналитический и препаративный метод разделения и выделения различных лекарственных веществ и биологически активных соединений нашел электрофорез на бумаге, а также в агаровом или крахмальном геле. Эти методы применяют также при диагностике ряда заболеваний путем сравнения фракционного состава (по числу и интенсивности зон на электрофореграмме) нормальных и патологических биологических жидкостей. [c.408]

Рис. 21. Схема расположения ДНС-аминокислот после электрофореза на бумаге

Диффузионные качества гелей, как об этом указывалось ранее (см. стр. 218), широко используются в лабораторной практике для электрофореза белков. Электрофорез в агаровом или крахмальном геле имеет определенные преимущества по сравнению с электрофорезом на бумаге, так как при этом выявляется большее количество и более четкое разделение белковых фракций как в нормальных, так и в патологических сыворотках крови. [c.240]

Упомянем также об обнаружении фосфорилированных под действием киназ аминокислот после кислотного гидролиза белков. В этом случае наиболее удобным оказался двумерный высоковольтный электрофорез на бумаге ( Whatman ЗММ ) при pH 3,5 и 1,9 [ linton et al., 1982]. [c.485]

При электрофорезе на бумаге в 1 М растворе гликолевой кислоты наблюдается следующий порядок скорости движения ионов металлов к катоду [c.195]

Схема прибора для низковольтного электрофореза на бумаге (объяснения в [c.89]

Электрофорезом на бумаге студентам предлагается провести разделение белков сыворотки крови [c.90]

Для идентификации белков, элюируемых с колонки, содержимое пробирок, соответствующее отдельным пикам на кривой элюции, объединяют, подвергают диализу, лиофилизируют и исследуют с помощью электрофореза на бумаге или в полиакриламидном геле. [c.112]

Идентификация ДНС-аминокислот с помощью электрофореза на бумаге [c.150]

Электрокинетические явлеиия находят практическое применение. Так, с помощью электрофореза проводят формование различных изделий из тонких взвесей с последующим их спеканием. Метод электрофореза широко применяют для разделения, выделения и исследования биоколлоидов, особенно белков. Простой его вариант, называемый электрофорезом на бумаге, состоит в том, что нанесенное на полоску бумаги пятно исследуемой смеси белков [c.331]

Широкие возможности макроэлектрофореза привели к появлению еще одного метода — электрофореза на бумаге, который хотя [c.157]

Рис. 20. Схема прибора для средневольтового электрофореза на бумаге /—электродные отсеки 2 — охлаждающая плита, 5 — пакет из полиэтилена, в котором находится хроматографическая бумага 4 — фитиль из фильтровальной бумаги

И менее точен, но зато значительно проще, чем метод Тизелиуса. На полоску фильтровальной бумаги, увлажненной буферным раствором, наносят в форме поперечной черточки или пятна исследуемый биоколлоидный раствор. Полоску помещают в горизонтальном положении в закрытое пространство, а концы ее погружают в буферный раствор, где находятся электроды. После подключения источника электродвижущей силы электрическое поле вызывает движение компонентов, находящихся в черточке или пятне, вдоль полоски. Скорость перемещения компонентов зависит от их электрофоретической подвижности. Через некоторое время электрофорез прекращают, бумагу высушивают и погружают в раствор красителя, который на биоколлоиде адсорбируется сильнее, чем на бумаге. По полученному изображению видно положение компонентов в конце электрофореза, и можно судить об их числе и электрофоретической подвижности. Из сказанного выше видно, что бумага играет роль пористой среды, препятствующей растеканию компонентов и их конвективному перемешиванию со средой, в которой протекает электрофорез . В последнее время вместо бумаги используют гелеобразные среды (агар-агар, желатин), которые дают более резко очерченные зоны. Электрофорез на бумаге (и в других средах) сопровождается побочными явлениями, такими, например, как перенос вещества, вызываемый миграцией испаряющегося буфера (Машбёф, Ребейрот и др., 1953 г.). Кроме того, было установлено (Шелудко, Константинов, Цветанов, 1959 г.), что, например, в желатине не только сама электрофоретическая подвижность некоторых красителей меньше, чем в воде или водных растворах, но и соотношение между подвижностями компонентов в этом случае совсем иное. Эти особенности метода еще не до конца изучены. Поскольку рассматриваемый метод имеет важное практическое значение, различные проблемы создаваемой в настоящее время теории электрофореза в пористых и гелеобразных средах п разнообразные методы его использования являются предметом многих научных трудов. Некоторое представление о них читатель может получить из монографии [6 1. [c.158]

При растворении Р4О10, в воде наряду с ортофосфорной кислотой образуется смесь различных конденсированных фосфорных кислот. Зти кислоты и их соли, называемые конденсированными фосфатами, можно обнаружить и разделить методами хроматографии на бумаге и электрофореза на бумаге (разд. 38.3.6). [c.549]

Зонный электрофорез на бумаге. Различают бумажный электрофорез низковольтный (при градиенте напряжения 20—30 В/см) и высоковольтный (с градиентом напряжения до 200 В/см). Высоковольтный электрофорез применяют для разделения низкомолекулярных соединений. Приборы оборудуют устройствами для отвода джоулевой теплоты, для чего используют инертные жидкости (тетрахлорид углерода, толуол), в которые помещают пропитанные буферным раствором бумажные полоски (фореграммы). Сама жидкость охлаждается с помощью погруженного в нее холодильника. [c.363]

В смеси инертных комплексов миграция их под действием диффузионных электрофоретических или каких-либо других сил происходит для каждого сорта ионов с характерной скоростью. На этом основано применение хроматографии при синтезе комплексных соединений. Хроматография и электрофорез могут быть использованы при синтезе, очистке и разделении координационных соединений. Например, очистка [Сг(ННз)в] " от [Сг(ННз)б (Нр) и [Сг(ЫНз)4 (Н20)2] на ионообменной колонке с AljOg использование для синтеза хлороаквокомплексов Rh , и и т. д. высоковольтного электрофореза на бумаге. [c.195]

Электрофорез проводят в обычных приборах для горизонтального электрофореза на бумаге и тонкослойных пластинках (обязательно в закрытой во избежание подсыхания пленки камере), например фирмы AMAG (модели 67701 или 61000 последняя — для длинных полосок и высокого напряжения) или фирмы Savant (США). [c.461]

Подобно крахмальному и акриламидному агаровый гель является очень мягким носителем в отличие от электрофореза на бумаге при нем не происходит инактивации белков, что позволяет определять активность отдельных фракций бeлкОДJieпo peд твeннo в геле после проведения электрофореза. Приготовление агарового геля значительно проще, чем крахмального или полиакриламидного, продолжительность электрофореза составляет I—4 ч. [c.92]

Фракционирование белков сыворотки крови на КМ-целлюлозе осуществляют с помощью ступенчатого элюирования, подавая на колонку последовательно следующие растворы 0,02 М натрий-ацетатный буфер, pH 4,6 ( стартовый буфер), затем 0,05 М натрий-ацетатный буфер, pH 5,2 0,08 М натрий-ацетатный буфер, pH 6,0 0,1 М фосфатный буфер, pH 7,0 и, наконец, 0,1 М фосфатный буфер, содержащий 0,5 М Na l, pH 8,3. Каждый новый раствор подают на колонку только после того, как полностью элюируется пик, вымываемый предыдущим раствором. Скорость тока приблизительно составляет 50 мл/ч. Элюат собирают порциями по 2—3 мл. Обработку результатов см. на с. 108. Идентификацию белков осуществляют методом электрофореза на бумаге или в полиакриламидном геле (с. 112). Регенерацию КМ-целлюлозы проводят вне колонки. [c.113]

Аминокислоты в растворе находятся в виде цвиттерионов. Их заряд, определяемый степенью диссоциации карбоксильных, аминогрупп и боковых радикалов, зависит от pH раствора. Используя метод электрофореза на бумаге, удается провести разделение определенных групп аминокислот. Сложные смеси аминокислот могут быть разделены с помощью электрофорезов, проводимых при разных значениях pH во взаимноперпендикулярных направлениях или комбинацией электрофореза и хроматографии. [c.137]

Для идентификации ДНС-аминокислот используют методы высоко- и средневольтного электрофореза на бумаге, тонкослойной хро- [c.149]

Курс коллоидной химии (1976) -- [ c.210 ]

Коллоидная химия (1959) -- [ c.109 , c.110 ]

Аналитическая химия молибдена (1962) -- [ c.136 ]

Аминокислоты, пептиды и белки (1976) -- [ c.12 , c.37 , c.95 ]

Химический анализ (1966) -- [ c.563 ]

Современная аналитическая химия (1977) -- [ c.464 ]

Коллоидная химия (1959) -- [ c.109 , c.110 ]

Радиохимия (1972) -- [ c.229 ]

Биохимия нуклеиновых кислот (1968) -- [ c.205 ]

Руководство к практическим занятиям по радиохимии (1968) -- [ c.175 ]

Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам Часть 2 (1982) -- [ c.100 , c.124 ]

Хроматография неорганических веществ (1986) -- [ c.111 ]

Аналитическая химия молибдена (1962) -- [ c.136 ]

Аналитическая химия синтетических красителей (1979) -- [ c.0 ]

Техника лабораторной работы в органической химии Издание 3 (1973) -- [ c.293 ]

Методы органической химии Том 2 Издание 2 (1967) -- [ c.898 ]

Методы органической химии Том 2 Методы анализа Издание 4 (1963) -- [ c.898 ]

Хроматография на бумаге (1962) -- [ c.40 , c.168 ]

Современные методы эксперимента в органической химии (1960) -- [ c.462 ]

Физическая Биохимия (1980) -- [ c.225 , c.228 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология