человека метафазные

В метафазе I каждая отцовская и материнская хромосома имеет равную вероятность оказаться по ту или другую сторону метафазной пластинки. Соответственно в каждой гамете могут оказаться как отцовские, так и материнские хромосомы. Если число хромосом значительно, то число возможных комбинаций сочетания отцовских и материнских хромосом в гамете очень велико, а вероятность того, что в определенную гамету попадут хромосомы только одного из родителей, очень мала. Рассмотрим, например, кариотип человека. В каждой нормальной клетке содержится 23 пары хромосом. Предположим, что первая отцовская хромосома оказалась по определенную сторону метафазной пла- [c.33]

Принцип этого метода прост. Рассмотрим его на конкретном примере картирования некоего фрагмента ДНК человека величиной 14,9 т.п.н., клонированного на фаговом векторе. Функция этого фрагмента ДНК не ясна. Известно, что он присутствует в количестве не более одной-двух копий на гаплоидный геном. Метафазные хромосомы человека, распределенные на стандартном предметном стекле, обрабатывали с целью удаления примесей связанной РНК и денатурации хромосомной ДНК. В качестве зонда использовали клонированный фрагмент ДНК, радиоактивно меченный ( Н) с помощью ник-трансляции. Пред- [c.314]

Таблица 18.5. Результаты гибридизации фрагмента человеческой ДНК (14,9 т.п.н.) с метафазными хромосомами человека

Метафазные хромосомы человека [c.173]

Для получения кариотипа (хромосомный набор клетки) фотографируют серию метафазных пластинок, индивидуальные хромосомы вырезают и располагают в порядке убывания их размера (идиограмма на рис. 8.5). В большинстве случаев удается идентифицировать группы хромосом (например, у человека [c.103]

Сортировка метафазных хромосом. Один из результатов разделения метафазных хромосом человека с помощью проточной цитометрии представлен на рис. 1, г [71]. В этом опыте суспен- [c.46]

Узким местом, ограничивающим применение проточных цитометров для наработки метафазных хромосом в препаративном количестве, достаточном для их использования в молекулярно-генетических исследованиях, является скорость сортировки, а следовательно, и время, которое необходимо затратить для реализации соответствующих проектов. В табл. 2 приведены количества метафазных хромосом, которые требуются для проведения ряда генно-инженерных экспериментов. При использовании обычных сортировщиков, которые анализируют ДО 1000 частиц/сек, индивидуальные хромосомы человека можно накапливать лишь со скоростью 40 хромосом/сек (1000/23). Ясно, что в этом случае 10 хромосом теоретически могут быть получены только за семь часов непрерывной работы прибора, а следовательно, для наработки 6,4 х 10 хромосом, требуемых [c.47]

Основа метода - микроскопическое изучение хромосом человека. Цитогенетические исследования стали широко использоваться с начала 20-х гг. XX в. для изучения морфологии хромосом человека, подсчета хромосом, культивирования лейкоцитов для получения метафазных пластинок. [c.27]

Накручивание ДНК на нуклеосомную сердцевину обеспечивает конденсацию ДНК, так как уменьшает ее линейные размеры. Участок ДНК длиной 200 нар оснований имеет в растворе длину 680 А. В нуклеосоме это количество ДНК укладывается в частицу диаметром 100 А. Таким образом, плотность упаковки (степень конденсации) нуклеосомы составляет примерно 7. Сравнима ли эта величина со степенью конденсации ДНК в хромосоме Метафазные хромосомы человека, которые находятся в сильно конденсированном состоянии, содержат 5,3 КУ пар оснований, что соответствует контурной длине ДНК 180 см. Эта ДНК упакована в 46 цилиндрических структур, общая длина которых составляет 200 мкм. Таким образом, плотность упаковки ДНК в метафазных хромосомах равна приблизительно Ю . В интерфазных ядрах, где хроматин находится в более дисперсном состоянии, плотность упаковки для ДНК составляет примерно 10 -10 Очевидно, нуклеосома представляет собой лишь первый уровень конденсации ДНК. [c.133]

Метафазнь е хромосомы человека Метафазные хромосомы человека Метафазные хромосомы человека [c.402]

Метафазнь.е хромосомы человека Метафазные хромосомы человека [c.402]

Поздние профазные и метафазные хромосомы человека после инкубирования в лимонной кислоте и окрашивания красителем Гимза покрываются темными и светлыми поперечными полосами разной ширины (С-полосы). Характер распределения этих полос различен для большинства хромосом и является строго воспроизводимым. После инкубации с акрихинипритом при освещении ультрафиолетом выявляются флуоресцирующие Р-полосы. Распределение выявляемых полос при обоих типах окраски совпадает. Это свидетельствует о том, что такое окрашивание визуализирует какие-то реально существующие структуры хромосом. На парижской конференции 1971 г. была разработана номенклатура для [c.299]

Рис. 13-51. Кинетохоры. В метафазной хромосоме (А), окрашенной аутоантителами человека, реагирующими со специфическими белками кинетохора, выявляются два кинетохора, каждый из которых связан со своей хроматидой (S). На электронной микрофотографии В-анафазная хроматида с микротрубочками, прикрепленными к кинетохору Хотя большинство кинетохоров трехслойные, тот, который показан здесь (из зеленой водоросли), имеет необычно сложную структуру с дополнительными слоями. (АиБс любезного разрешения Bill Brinkley С - из J.D.

Под этим термином подразумевается совокупность подходов и методов, с помощью которых можно каждый ген отнести к определенной хромосоме, т.е. составить генетическую карту организма. Например, у человека благодаря применению двух основных методов—гибридизации соматических клеток и гибридизации in situ — установлена хромосомная локализация ряда генов, ответственных за некоторые заболевания. При гибридизации in situ препарат метафазных хромосом на поверхности стеклянной пластины инкубируют с радиоактивно меченным зондом. Точную область гибридизации определяют с помощью радиоавтографии (фотографическую эмульсию наносят, непосредственно на пластинку). Образование зерен над гистологически идентифицированной хромосомой позволяет сделать вывод о принадлежности данного гена к конкретной хромосоме, а часто и к определенному ее участку. Некоторые гены человека, локализованные методом гибридизации in situ, представлены в табл. 36.5. [c.46]

Рис. 2.3. Метафазная пластинка культивируемых in vitro фибробластов легкого эмбриона человека. Фотография из первого сообщения, в котором констатировалось наличие в клетках человека 46 хромосом [532].

Электронно-микроскопическая картина хромосом [490, 517]. Чтобы выявить тонкую структуру хромосом человека, были использованы многочисленные методы электронной микроскопии. Современные модели организации генетического материала эукариот будут обсуждаться в разд. 2.3, здесь же достаточно сказать, что данные электронной микроскопии не противоречат модели, предполагающей, что хроматин состоит из сверхспирализованных нитей, причем имеется несколько порядков спирализации (рис. 2.17). Обнаружено три типа хроматиновых фибрилл фибриллы первого типа имеют диаметр 250 A, фибриллы второго типа-100 A и третьего-только 30-50 A. Имеются довольно убедительные доказательства того, что фибриллы этого последнего типа представляют собой генетически активный хроматин. Двойная спираль чистой ДНК имеет диаметр 20 A, следовательно, фибриллы 30-50 A соответствуют диаметру нити ДНК вместе с белками (гистонами и негистонами). Фибриллы диаметром 100 A отражают, по-видимому, вторичную спирализа-цию фибрилл 30-50 A, а нити 250 A могут отражать третичный уровень спирализации. В метафазной хромосоме эти третичные спирали могут иметь примерно такую укладку, как указано на рис. 2.17. Примерно девять фибрилл 250 A, вероятно, каким-то образом связаны вместе, и два таких пучка образуют различимую [c.53]

О сателлитной ДНК человека говорилось в разд. 2.3.1.2. Речь шла о том, что термин сателлит Хфименяется при описании результатов центрифугирования ДНК в градиенте плотности хлористого цезия, которое, помимо основного пика ДНК, выявляет ряд минорных компонентов, специфичных для каждого вида (рис. 2.80). Сателлитная ДНК состоит из относительно коротких, высокоповторяющихся последовательностей их биологическая функция неизвестна, однако вполне возможно, что они оказывают влияние на кроссинговер во время мейоза [437]. У людей выявлено, выделено и охарактеризовано четыре фракции сателлитной ДНК- AT I-IV они составляют около 4% ДНК человека или 1/5-1/6 всей его высокоповторяющейся ДНК. Эти четыре сателлитные фракции транскрибировали для получения радиоактивных комплементарных кРНК, которые затем гибридизировали in situ с метафазными хромосомами людей и человекообразных обезьян (рис. 7.7) с целью выяснения их эволюционной истории. Эти исследования показывают, что неполные данные могут использоваться для построения гипотезы, хорошо вписывающейся в сложившиеся теоретические конструкции. [c.15]

Основными компонентами хроматина являются ДНК, гистоны и негистоновые белки. Общее количество ДНК, приходящееся на гаплоидный хромосомный набор человека, 3- 10 п. н., что составляет около 1 м по длине. На одну хромосому приходится в среднем 4 см ДНК (1,2- 10 п. н.). В то же время длина метафазной хромосомы, т. е. максимально компактного дезоксирибонуклеопротеинового [c.83]

Важным результатом взаимодействия ДНК с белками в составе хроматина является ее компактизация. Суммарная длина ДНК, заключенной в ядре клеток человека, приближается к 1 м, тогда как средний диаметр ядра составляет 10 мкм. Длина молекулы ДНК, заключенной в одной хромосоме человека, в среднем равняется 4 см. В то же время длина метафазной хромосомы составляет 4 мкм. Следовательно, ДНК метафазных хромосом человека компактизована по длине, по крайней мере, в 10" раз. Степень компактизации ДНК в интерфазных ядрах значительно ниже и неравномерна в отдельных генетических локусах. С функциональной точки зрения различают эухроматин и гетерохроматин [36-39]. Эухроматин характеризуется меньшей по сравнению с гетерохроматином компактизацией ДНК, и в нем главным образом локализуются активно экспрессирующиеся гены. В настоящее время все еще широко распространено мнение [c.27]

Долю полиплоидных клеток подсчитывают отдельно под микроскопом, анализируя с этой целью 1000 рутинно окрашенных метафазных пластинок на 2—3 препаратах. При этом оценивается только уровень плоидности без точного подсчета числа хромосом, если этого не требуют условия эксперимента. В большинстве клеточных линий доля полиплоидных клеток не превышает 3—5 %, а уровень плоидности — 4п, где 2п соответствует модальному классу клеток анализируемой линии [15]. Наряду с этим известны линии, например линия клеток человека Molt-4, где модальный класс клеток уже на ранних пассажа х представлен клетками с 92—98 хромосомами [16]. [c.86]

Помимо картирования генов в определенной хромосоме, разработаны также методики регионального картирования в определенном участке изучаемой хромосомы. Для этого используют различные методы. Наиболее точный уровень картирования был достигнут при использовании клонированных генов и рекомбинантных ДНК в сочетании с методами генетики соматических клеток. Можно без преувеличения сказать, что применение методов молекулярной биологии революционизировали методы картирования. Применяется гибридизация клонированного гена с метафазными хромосомами гибрида или с хромосомами клеток родительской формы (гибридизация in situ). Важно отметить, что эти методы позволяют картировать гены, не экспрессирующиеся в гибридных клетках, что характерно для многих тканеспецифичных генов. Гибридизация in situ меченых клонированных генов с метафазными хромосомами позволяет с высокой достоверностью идентифицировать участок локализации гена (цит. по Варшавер, 2000). Впервые с помощью этого метода были картированы гены а- и (3-глобулинов у гибридов между клетками человека и мыши (Риск, Као, 1982). [c.255]

В геноме человека обнаружены многочисленные гены а-ИФН к настоящему времени идентифицировано по крайней мере 14 таких генов, а также 7 псевдогенов, причем большая их часть уже секвенирована. Все они не имеют интронов и расположены в коротком плече хромосомы 9. Это удалось показать при помощи блот-гибридизации клонированных кДНК интерферонов с ДНК из гибридных клеток человек—мышь и гибридизации in situ с человеческими метафазными хромосомами [174, 248]. По крайней мере часть этих генов расположена тандемно, а остальные находятся близко друг к другу один участок в 9937 пар оснований хромосомы 9 содержит два полных гена [c.42]

В 1960 г. Р. Мурхед с коллегами разработали метод культивирования лим( ю-цитов периферической крови для получения метафазных хромосом человека, что позволило обнаруживать мутации хромосом, характерные для определенных наследственных болезней. Другам важным открытием для развития цитогенетики человека явилась разработка методов дифференциальной окраски хромосом. Благодаря ему стала возможна идентификация каждой хромосомы человека, а это резко повысило разрешающую способность цитогенетических методов. [c.8]

Фотография метафазной хромосомы человека N 13, Видны обшее строение хромосомы (Std), характер полос в эухроматиновых плечах, выявляемый после специального окрашивания (три разных метода окрашивания С, О и Р), гетерохроматиновая область в центромере, наблюдаемая благодаря применению особой техни- [c.20]

Это зависит от их размера, положния центромеры и хфактерного рисунка из темных и светлых полос, образующегося после окрашивания фиксированных метафазных хромосом определенными красителями (рис. 7.23). Кроме того, сами полосы захватывают слишком большие отрезки ДНК. Например, З-Ю " пар нулеотидов гаплоидного генома человека содержатся менее чем в 1000 различных полосах (кариотип человека представлен на рис. 1.9), а у растений это число даже меньше. В результате с помощью чувствительной эмульсии можно установить лишь, в какой области хромосомы находится интересующий нас сегмент. Более того, размер зерен серебра и его разброс уменьшают разрешающую способность примерно до 10 пар оснований. [c.336]

Смотреть страницы где упоминается термин человека метафазные: [c.454] [c.314] [c.314] [c.208] [c.402] [c.68] [c.45] [c.128] [c.130] [c.68] [c.44] [c.47] [c.218] [c.79] [c.59] [c.402] [c.446] [c.19] [c.21] [c.21] [c.21] [c.22]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология