Иммунный анализ иммуноглобулины

В принципе возможен систематический анализ любой системы иммуноглобулин — лиганд. Исследование моделей связывания может проводиться систематическим образом, поскольку у млекопитающих, например кроликов или коз, синтез антител может индуцироваться по отношению к любой специально подобранной молекуле (с низкой или высокой молекулярной массой). Используя аффинную хроматографию, получаемые антитела затем очищаются. Как правило, эта процедура приводит к вырожденному иммунному ответу, т. е. к синтезу нескольких видов антител несколькими клонами так называемых клеток плазмы (542]. Эти антитела отличаются константами сродства к лиганду, что проявляется также в химических, спектральных и иммунологических свойствах центров связывания. Последующие анализы аминокислотной последовательности показали, что различия вызваны аминокислотными заменами в гипер-вариабельных областях доменов /ь и Ун [622]. На первый взгляд кажется, что вырожденный ответ должен усложнить пространственную организацию центров связывания. В действительности, однако, в этом случае возможно объединить и взаимно контролировать данные по нескольким центрам связывания, что заметно увеличивает вероятность нахождения правильных моделей. [c.245]

Три типа методов ВЖХ, описанные в этой главе, дают возможность очищать и анализировать иммуноглобулины быстрее и с большей чувствительностью, чем обычные методы колоночной хроматографии. В настоящее время емкость колонок для ВЖХ не так велика, как емкость колонок для обычной хроматографии, но уже начато производство препаративных колонок. для ВЖХ. Доступны также колонки для ионообменной ВЖХ, использование которых здесь не обсуждалось. Методы получения высокоочищенных препаратов моноклональных антител и их анализа становятся очень важными не только потому, что эти препараты представляют интерес для биохимиков при исследовании регуляции иммунного ответа и связывания с антигенами, но и потому, что они все шире применяются в медицине для диагностики и лечения. Методы ВЖХ обеспечивают необходимую для решения этих задач разрешающую способность и высокую скорость проведения разделений. [c.148]

При изучении иммунных систем широко используется стандартный метод двойной иммунодиффузии, однако для получения тонких характеристик антител и антигенов может потребоваться анализ иммуноглобулинов в культуральных жидкостях или в сыворотках крови. В этих случаях сывороточные белки метят радиоактивным иодом, а иммуноглобулины, продуцируемые клетками в культуре, — биосинтетически или также иодом. [c.489]

Широкое распространение получают иммунофер-ментные методы - разновидность иммунных методов анализа (радиоактивная или флуоресцентная метка заменяется ферментом). Их используют для определения иммуноглобулинов, гормонов, стеровдов, лек. ср-в, пестицвдов и др. Эти методы обладают исключительно высокой чувствительностью и селективностью. [c.80]

Широкое распространение получил метод синтеза иммуно-пероксидазных конъюгатов, в основе которого лежит окисление перйодатом натрия углеводной части молекулы пероксидазы с образованием альдегидных групп. Так как пероксидаза имеет восемь углеводных остатков, то в процессе синтеза могут образовываться конъюгаты полидисперсного состава, содержащие различное количество молекул фермента и иммуноглобулина или антигена. Поэтому для целей анализа исключительно важно проводить хроматографию комплексов, выбирая необходимые по составу комплексы. Кк к к кат ПбрОКСИДЗЗЫ В КОНЪЮГЗТб С ИММуНО-глобулином о (состав 1 1) практически не отличаются от этих констант для нативного фермента. Сохранение свойств фермента в конъюгате обусловлено тем, что модифицируемые перйодатом углеводные группы находятся в удаленной от активного центра области молекулы пероксидазы. [c.110]

В книге обсуждаются основные вопросы клеточной иммунологии и многие иммунологические феномены, однако она не подменяет собой руководств по общей иммунологии. Именно молекулярные аспекты иммунологии являются ее основным содержанием. В пособии представлены прежде всего те разделы современной иммунологии (строение антигенов и антител, биосинтез антител, эффекторные функции иммуноглобулинов, система комплемента), где уже осуществлен глубокий анализ явлений на молекулярном уровне. Рассматриваются также молекулярные аспекты регуляции иммунного ответа и некоторые проблемы иммунопатологии. В книгу вошел также раздел, знакомящий читателя с методологией нм-мунохимического эксперимента, возможностями молекулярной иммунологии для решения ряда задач современной молекулярной биологии и биохимии. Последнее представляется необходимым, чтобы показать, сколь велики возможности молекулярной иммунологии в областях, во многом определяющих прогресс биологии. [c.4]

Белки играют центральную роль в процессах жизнедеятельности клеток (примером служат ферменты) и в формировании клеточных структур. Анализ содержания в крови определенных белков и ферментов широко используется в диагностических целях. В частности, при заболеваниях печени диагностическое обследование непременно включает электрофоретическое определение относительного содержания альбуминов и глобулинов в плазме крови. Арализ содержания в плазме липопротеинов и иммуноглобулинов с помощью электрофореза и других методов обычно используется при диагностике специфических типов гиперлипопротеинемии и иммунных нарушений. Моча человека в норме не содержит белков поэтому обнаружение в моче даже небольших количеств белка (протеинурия) с помощью соответствующих лабораторных анализов служит важным показателем заболевания почек, в частности различных форм нефритов. [c.42]

Радиоиммунологический анализ (РИА) количественное определение антител или антигенов, меченных радионуклидом, с применением аналогичных антител или антигенов например, искомого антигена с применением иммунной сыворотки и аналогичного антигена, меченного радионуклидом. После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный комплекс антиген — антитело и определяют его радиоактивность по счетчику импульсов количество меченого антигена, связавшегося с антителами, обратно пропорционально количеству искомого антигена. Широкое распространение получили так называемые прямой и непрямой варианты твердофазного радио-иммунологического метода, при которых используют полисти-роловые плашки с адсорбированными антигенами или антителами. Метод применяют для выявления антигенов микроорганизмов, определения гормонов, ферментов, лекарственных веществ и иммуноглобулинов. [c.181]